黄茜
- 作品数:4 被引量:12H指数:2
- 供职机构:南京师范大学更多>>
- 发文基金:江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程文学更多>>
- 植物乳杆菌Lactobacillu plantarumY1菌株胆盐水解酶基因(bsh)的克隆及重组表达被引量:8
- 2010年
- 经同源蛋白比对分析设计引物,PCR扩增获得植物乳杆菌Y1菌株bsh基因(975 bp),首先克隆至表达载体pET-28a,转化E.coli BL21(DE3)菌株,IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析结果显示表达的重组蛋白为包涵体.选择能为大肠杆菌稀有密码子提供额外tRNA的E.coli Rosetta(DE3)作为宿主菌,仍旧没有改善表达产物的可溶性.但是,选择含IF2融合蛋白标签的pLS-IF2质粒构建表达载体,SDS-PAGE分析及Western blot鉴定结果显示表达的融合重组蛋白IF2-BSH具有可溶性.该结果为进一步研究乳酸菌胆盐水解酶的生物活性,结构功能关系的研究奠定了基础.
- 黄茜黄璐潘道东杨瑶
- 关键词:植物乳杆菌胆盐水解酶原核表达
- 发酵乳杆菌DF-4胆盐水解酶BSH基因的克隆、异源重组表达及产物的研究
- 从1977年Gilliland提出乳酸菌能够降低胆固醇以来,许多的研究都对此进行了证实和深入研究,普遍提出乳酸菌代谢中产生的胆盐水解酶在其降胆固醇作用中的重要作用。胆盐水解酶在体内将结合型胆盐水解成游离胆盐和游离氨基酸,...
- 黄茜
- 关键词:基因重组融合标签
- 文献传递
- 艾丽丝·门罗小说的叙事艺术
- 加拿大短篇小说家艾丽丝?门罗的创作跟随着加拿大英语文学传统的步伐,同时吸取现代主义的创作手法,形成独特的叙事风格。个人的生活经验以及女性的特殊身份都带给了门罗丰富的创作灵感,给了她体验生活、表现生活的窗口。门罗创作最大的...
- 黄茜
- 关键词:艾丽丝·门罗叙事艺术女性生存
- 文献传递
- 重组融合蛋白MBP-BSH在大肠杆菌中的表达及其纯化、功能鉴定被引量:7
- 2012年
- 选择IF2融合标签,另选择含SUMO、GST、NusA和MBP融合标签的质粒构建表达载体。SDS-PAGE电泳结果显示,重组菌Escherichia Rosetta(DE3)(pLS932-BSH)的诱导表达细胞提取液上清出现了明显的融合蛋白MBP-BSH条带,经诱导表达条件优化后,MBP-BSH可溶性大幅度提高。用Ni-NTA Resin和Amylose Resin分别进行目标蛋白纯化,结果显示前者效果更好,并且C端融合His-Tag更有利于其与Ni离子结合,MBP-BSH蛋白纯化量更大,杂带更少。茚三酮显色反应测定酶活力,结果显示纯化后的MBP-BSH的酶比活力为2.4282U/mg。
- 黄茜黄璐潘道东杨瑶
- 关键词:表达纯化胆盐水解酶