于春风
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
- 供职机构：南开大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生理学更多>>
- DNA超螺旋对肠产毒性大肠杆菌CFA/I基因表达调节的研究
- 产毒性大肠杆菌(ETEC)是引起婴幼儿和旅行者腹泻的主要病原菌,是危害发展中国家的重要病原菌之一.一般认为,ETEC首先依靠其表面定居菌毛,粘附到小肠黏膜上皮细胞,释放肠毒素,引起腹泻.CFA/I菌毛是人致泻性大肠杆菌中...
- 于春风
- 关键词：产毒性大肠杆菌基因表达调节
- 文献传递
- DNA超螺旋对大肠杆菌CFA/I基因表达的调节研究
- 黄熙泰徐建国张臻峰于春风万庆叶长云余秀均吴继民
- 该项目旨在研究DNA超螺旋对CFA/I基因表达的调节作用。利用构建的一系列含有CFA/I基因的质粒pJGX15A、pJGX15B、pJGX15C，课题组进行了大量实验，取得了以下成果：CFA/I基因的表达水平与质粒DNA...
- 关键词：
- 关键词：基因表达
- 一种高电子密度线圈型DNA结构
- 从大肠杆菌细胞分离的多拷贝质粒DNA(松弛控制型质粒)通常含有一些特殊的DNA拓扑异构体成份.这些特殊的DNA在琼脂糖凝胶电泳中有特殊的电泳行为,因而可以与普通的结构成份区别开来.本研究小组使用电子显微镜学的手段对这些D...
- 齐静郭宏杰于春风万庆郭世宜黄熙泰
- 文献传递
- 产毒性大肠杆菌CFA/Ⅰ基因表达与DNA超螺旋状态的关系被引量：2
- 2004年
- 将CFA／I结构基因(cfaABCE)克隆到载体pJRD184上构建了质粒pJGX15A,并将其转入大肠杆菌topA野生株E.coli HB101和topA缺陷株E.coli DM800中.Western blot测定的结果表明,在CFA／I的正调控基因cfaD基因缺失时,两株重组菌株都能够表达CFA／I抗原.分别抽提两个重组菌株对数前期和对数中期的质粒pJGX15A DNA,并对其进行氯喹琼脂糖凝胶电泳分析,结果显示E.coli DM800细胞中质粒pJGX15A的负超螺旋水平比野生型细胞E.coliHB101中的较低.同时,菌落免疫酶斑分析的结果显示DM800受体菌中CFA／I的表达水平比HB101受体菌中的表达水平高.实验结果表明,CFA／I结构基因的表达与DNA负超螺旋水平有明显的负相关性,与负超螺旋促进基因表达的看法不同.
- 张臻峰于春风万庆王晓琛黄熙泰叶长芸余秀均吴继民徐建国
- 关键词：产毒性大肠杆菌
- 质粒pUC18DNA的螺线管型超螺旋结构
- 2003年
- 理论上,游离的超螺旋DNA可以采取两种结构形式:互缠式超螺旋和螺线管型超螺旋。前者早已被透射电子显微镜和原子力显微术的研究所证实,而后者却仍然缺乏足够的证据。使用温和的清亮裂解液法,从DNA拓扑酶野生型大肠杆菌HB101细胞抽提质粒pUC18 DNA。经CsCl-EB平衡密度梯度超离心分离获得超螺旋pUC18 DNA和松弛型pUC18 DNA(DNA Ⅱ)。纯化DNA分别用疏水性溶剂系统和亲水性溶剂系统的细胞色素单分子层展开技术制备电子显微镜标本。观察结果显示:在疏水性的甲酰胺-水展开系统中,DNA采取通常的互缠式结构;在含有1.5mmol/L醋酸铵的水介质中制备的超螺旋DNA标本,DNA采取线圈型结构,测得pUC18 DNA(单体)分子这种结构的外直径约为43.8nm,内直径约为2nm。在相同亲水介质中松弛型pUC18DNA采取典型的螺线管型结构,其单体平均外直径约为53.1nm,内直径约为17.2nm。表明:在疏水介质中超螺旋DNA趋向于采取互缠式结构,而在亲本介质中DNA则采取螺线管型结构。DNA链之间可能存在非共价相互作用以维持这种结构。螺线管型结构可能是水溶液中的超螺旋DNA分子普遍的存在形式。
- 齐静张臻峰于春风杨琴黄志刚侯亭黄熙泰
- 关键词：电子显微镜
