何玲
- 作品数：23 被引量：38H指数：4
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- 副猪嗜血杆菌抗体间接ELISA检测方法的建立与应用被引量：9
- 2011年
- 本试验采用121℃高压处理副猪嗜血杆菌4型和5型耐热蛋白,混合作为包被抗原,建立了检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA方法。通过对试验条件进行筛选优化,确定了最佳反应条件:抗原包被浓度为10μg/mL,37℃包被2h;封闭液选择含20g/L脱脂奶粉的PBST,封闭30min;血清的稀释度为1∶80;抗原抗体反应时间为45min;酶标二抗稀释度为1∶12000,作用时间为30min;底物显色时间为15min。特异性、重复性和敏感性试验及对200份送检血清的检测结果表明,建立的间接ELISA方法特异性和重复性良好,敏感性比间接血凝试验高,对已知阴阳性血清的临床样本检测结果与国外ELISA试剂盒一致,可用于副猪嗜血杆菌的血清抗体检测和血清流行病学调查。
- 郑念广谭实勇何玲夏芳高娟罗满林
- 关键词：副猪嗜血杆菌抗体间接酶联免疫吸附试验
- 一种猪流行性腹泻病毒M基因全序列的扩增方法
- 本发明提供了一种猪流行性腹泻病毒M基因全序列的扩增方法，包括如下具体步骤：1、提取猪流行性腹泻病毒RNA；2、依据猪流行性腹泻病毒（PEDV）的M基因序列设计RT-PCR引物，并扩增猪流行性腹泻病毒（PEDV）的M基因；...
- 何玲唐满华陈瑞爱梁珪益
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒变异野毒株与JXA1-R疫苗毒株快速鉴别方法的建立被引量：5
- 2011年
- 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)变异野毒JXA1的基因变异序列和疫苗株JXA1-R的基因遗传标志设计合成了2对特异性引物,结合快速RNA抽提试剂和一步法RT-PCR,建立了JXA1变异野毒与JXA1-R疫苗毒的快速鉴别体系,其目的片段大小分别为4002、90 bp,该方法对猪瘟病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病病毒的PCR检测结果均为阴性;对JXA1变异野毒与JXA1-R疫苗毒RNA的最低检测量分别为103、104拷贝/μL。该方法敏感、特异,适用于临床样品的检测。
- 何玲裴仉福
- 关键词：PRRSV变异株RT-PCR
- 猪细小病毒M2株在ST细胞中培养条件优化被引量：5
- 2013年
- 为探索猪细小病毒M2株在ST细胞中培养的适宜条件，将其分别以同步接毒法和单层接毒法接种于ST细胞，比较其接种效果，选择更有效的方法，再对其培养条件（细胞浓度、血清种类、血清含量和收毒时间等）进行优化。结果表明，同步接种法相对于单层接种法更具优势。同步接毒，采用含量为5%的胎牛血清或6%的新生牛血清培养，细胞浓度控制在3.2×104～1.5×105个/mL内，在病毒接种后，80%以上细胞出现细胞病变时收获病毒，能获得较高病毒含量的病毒液。本研究结果为制备高效价的PPV- M2株病毒抗原提供了数据资料。
- 唐满华陈瑞爱何玲李春红梁桂益廖翠银陈振波同戈
- 关键词：猪细小病毒ST细胞
- 猪瘟病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及其初步应用被引量：1
- 2011年
- 针对CSFV基因组5′端非编码区序列设计并合成了高度特异的一对引物和一条探针,用于猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立。将提取的病毒的总RNA做为模板进行反转录和PCR,将PCR产物克隆到pMD18-T载体后进行大肠杆菌转化,提取阳性质粒做为标准品绘制标准曲线,成功地建立了特异性检测CSFV的荧光定量RT-PCR方法,其灵敏度达到100拷贝/μL。将猪瘟活疫苗(细胞源)采用不同剂量免疫猪后,取全血及组织,用所建立的方法进行检测,发现病毒主要分布在猪的血液、脾脏、淋巴结、扁桃体中。
- 夏芳何玲罗满林陈瑞爱
- 关键词：猪瘟病毒荧光定量猪瘟活疫苗病毒分布
- 多表位基因工程疫苗的研究及应用效果
- 多表位基因工程疫苗是运用基因工程技术将多条编码特异性表位的DNA序列进行串联组合,然后重组入原核、真核载体或者病毒、细菌构建重组质粒、重组病毒或表达重组蛋白而制成的。多表位基因工程疫苗是最具开发前景的疫苗之一,在细菌、病...
- 何玲陈瑞爱裴仉福罗满林
- 关键词：抗原表位基因工程疫苗
- 文献传递
- 猪细小病毒CG-05株在ST细胞上的增殖规律研究
- 将猪细小病毒CG-05毒株同步接种于sT细胞，用测定HA和TCID50的方法研究了其在sT细胞上的增殖规律。病毒在接种后24h即可在细胞较稀的区域看到非常轻微的病变，病毒TCID50测定结果也表明，接毒后17h，病毒已经...
- 唐满华陈瑞爱何玲梁桂益
- 关键词：猪细小病毒增殖规律ST细胞
- 多表位基因工程疫苗的研究进展被引量：3
- 2011年
- 多表位基因工程疫苗是运用重组DNA技术将多个编码抗原表位的DNA序列片段进行串联组合,然后重组入原核、真核表达载体或者病毒构建重组子,并进一步表达重组蛋白而制成的疫苗。多表位基因工程疫苗是最具开发前景的疫苗之一,在细菌、病毒、寄生虫等新型疫苗的研究中取得了很大的进步。本文就多表位基因工程疫苗的研究进行综述。
- 何玲陈瑞爱罗满林裴仉福
- 关键词：抗原表位基因工程疫苗
- 猪细小病毒CG-05株在ST细胞上的增殖规律研究被引量：1
- 2013年
- 通过将猪细小病毒CG-05株同步接种于ST细胞,测定不同时间收获的病毒液的TCID50和HA,研究了CG-05株病毒在ST细胞上的增殖规律。病毒接种后镜检观察接毒细胞,在接种病毒后24 h,即可在细胞较少的区域看到非常轻微的病变。测定病毒TCID50,检测到接毒后培养17h病毒已经明显增殖;当培养到40h左右,其TCID50即接近高峰,达到10-7.2/0.1mL以上,并进入平台期;继续培养,TCID50最高可达到10-8.5/0.1mL,且直到122 h也不见明显降低。病毒HA价也出现同样的平台期,但比TCID50的平台期出现得晚,到50 h才进入平台期。结果表明,用ST细胞培养CG-05株病毒,接种病毒培养56～96 h后,如病变达到80%以上,且细胞脱落已形成20%以上空斑,此时收获病毒可获得高效价的病毒液。该研究可为制备高效价的PPV病毒抗原提供数据资料。
- 唐满华陈瑞爱何玲梁桂益
- 关键词：猪细小病毒ST细胞增殖规律
- 禽药的使用方法与使用技巧
- 2009年
- 在家禽疾病临床治疗失败的病例中，用法与用量不当占50％以上；盲目用药、滥用药所致耐药性造成的治疗失败占30％以上，其中药物超大剂量使用导致细菌相对耐药性产生占50%以上；治疗不对症占10％以上；其它约10％。由此看来，同一药物对同一疾病的治疗，用药正确与否，治疗结果差异很大。因此在禽病治疗过程中，必须采取正确方法和措施来消除用药误区，提高治疗效果。
- 杨利军何玲时书宁
- 关键词：用药误区禽药家禽疾病耐药性大剂量药物
