刘仪
- 作品数：21 被引量：130H指数：8
- 供职机构：北京农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 甜菜坏死黄脉病毒外壳蛋白基因的表达及其表达产物抗血清的制备被引量：24
- 1994年
- 将甜菜坏死黄脉病毒外壳蛋白基因克隆到ｐＢＶ２２０质粒上，构建成在大肠杆菌中经温度诱导表达的载体ｐＢＶＳ４。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳和Ｗｅｓｔｅｒｍ印迹结果表明，ｐＢＶＳ４在大肠杆菌ＤＨ５α中通过４２℃诱导后，特异地表达２１ｋＤ的甜菜坏死黄脉病毒外壳蛋白。经光密度扫描估测，其表达量占大肠杆菌全蛋白的１５．２％。分离纯化经温度诱导表达的甜菜坏死黄脉病毒外壳蛋白作为抗原，免疫家兔制备出了特异性强的ＢＮＹＶＶ抗血清。采用微量沉淀法测定其效价为１：１０２４。
- 姚华建于嘉林金元刘仪
- 关键词：甜菜坏死黄脉病毒外壳蛋白基因
- 一种中国发生的真菌传小麦花叶病毒RNA－13＇末端核苷酸序列分析被引量：27
- 1995年
- 以采自河南的真菌传小麦花叶病毒（ＦＷＭＶ－Ｃ）为材料，抽提病毒ＲＮＡ，合成互补ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）。对杂交筛选所得ｃＤＮＡ克隆进行亚克隆及序列分析，结果表明，亚克隆ｐＧＳＩ含有一个长度为８９１个核苷酸的不完整开放阅读框架（ＯＲＦ）和长度为２５８个核苷酸的３＇末端非编码区（ＮＴＲ），并带有Ｐｏｌｙ（Ａ）尾序。此段序列与大麦黄花叶病毒（ＢａＹＭＶ）及法国报道的一种小麦梭条花叶病毒（ＷＳＳＭＶ－Ｆ）的ＲＮＡ－１３＇末端分别具有６７．６％和６９．９％的同源性。由所测序列编码区（１－８９１ｎｔ）可推导产生２９６个氢基酸，并与ＷＳＳＭＶ－Ｆ及ＢａＹＭＶ外壳蛋白氨基酸序列分别具有７５．９％和７１％的同源性。此结果表明，ＦＷＭＶ－Ｃ为另外一种不同于ＷＳＳＭＶ－Ｆ的大麦黄花叶病毒组（Ｂａｙｍｏｖｉｒｕｓ）病毒，所测基因组片段应为ＲＮＡ－１３＇末端序列，其中可能包括了病毒全长外壳蛋白编码区域。
- 于嘉林晏立英冯继东李大伟蔡祝南刘仪
- 关键词：小麦花叶病毒RNA核苷酸
- 甜菜坏死黄脉病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的高效表达
- 1993年
- 将甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)内蒙古分离物的外壳蛋白基因亚克隆到pJW2上构建成在大肠杆菌中表达的载体。SDS-PAGE及Westexn blotting检测的结果表明,该表达载体在大肠杆菌DH5 α中经温度诱导后特异地表达21kD的甜菜坏死黄脉病毒外壳蛋白。经光密度扫描估测,其表达量占大肠杆菌总蛋白的19.5％
- 姚华建于嘉林刘仪
- 关键词：甜菜坏死黄脉病毒外壳蛋白基因
- 核酸酶保护试验在黄瓜花叶病毒株系鉴定中的初步应用被引量：4
- 1996年
- 采用黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）亚组Ⅰ株系Ｆｎｙ－ＣＭＶＲＮＡ＿２的１２０９～１６２６核苷酸片段和亚组Ⅱ株系Ｌｓ－ＣＭＶＲＮＡ＿２的２００２～２４３３核苷酸片段的ｃＤＮＡ克隆，体外转录，同时掺入￣（３２）Ｐ获得负链ＲＮＡ探针，与纯化的番茄和甜椒上的ＣＭＶ中国分离物的ＲＮＡ杂交，结果表明：ＣＭＶ番茄和甜椒中国分离物与Ｆｎｙ－ＣＭＶ的核苷酸有高度同源性，隶属于Ｆｎｙ－ＣＭＶ为代表的亚组Ⅰ株系。并利用Ｋ－ＣＭＶ株系（亚组Ⅰ，源于中国）的ＲＮＡ＿２全长ｃＤＮＡ克隆的两个ＥｃｏＲＩ位点间的核苷酸序列（１６５７～２１２５ｎｔ）作探针，与上述两种ＣＭＶ中国分离物的ＲＮＡ杂交，进一步比较分析了这两个分离物和Ｋ－ＣＭＶ株系的关系。讨论了核酸酶保护法在ＣＭＶ株系鉴定中的作用。
- 谢响明于嘉林刘仪
- 关键词：植物病毒黄瓜花叶病毒株系
- 我国发生的一种香石竹斑驳病毒株系的生物化学特性及互补DNA合成被引量：5
- 1991年
- 以提纯的香石竹斑驳病毒BS株系为材料,抽提该病毒的RNA进行琼脂糖凝胶电泳检测,结果表明其RNA除有一个分子量约1.4×10~6道尔顿的主要组分外,还有一个分子量约0.55×10~6道尔顿的较弱组分。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳检测外壳蛋白亚基分子量约38 000道尔顿,由17种共335个氨基酸残基组成。以上述RNA为模板,3’末端加多聚腺苷酸尾序后,以Oligo(dT)_(15)为引物反转录合成双链cDNA,平末端插入载体质粒P^(EMBL)9。经抗生素及杂交选择,共获得27个阳性克隆。提取质粒后酶切鉴定,拼接,获得3.7kb近全长cDNA亚克隆P^(BSCY)35.^(32)P标记cDNA探针杂交检测,对香石竹斑驳病毒具特异性,灵敏度可达1ng RNA。部分cDN A序列测定证明,所得克隆包括全长外壳蛋白基因。
- 于嘉林刘仪陈雪梅陈章良
- 关键词：香石竹斑驳病毒生化特性
- 香石竹环斑病毒的研究进展被引量：2
- 1994年
- 香石竹环斑病毒的研究进展蔡祝南，方守国，刘仪（北京农业大学植物病毒研究室１０００９４）香石竹病毒广泛分布于世界各香石竹种植区，国外对其上病毒研究较多，已有明确报道的有香石竹斑驳病毒（Ｈｏｌｌｉｎｇｓ和Ｓｔｏｎｅ，１９７０ａ）、香石竹环斑病毒（Ｔｒｅｍ...
- 蔡祝南方守国刘仪
- 关键词：香石竹病毒
- 甜菜坏死黄脉病毒分子生物学的研究进展被引量：1
- 1995年
- 甜菜坏死黄脉病毒分子生物学的研究进展姚华建，于嘉林，刘仪（北京农业大学农业生物技术国家重点实验室，北京１０００９４）ＡｄｖａｎｃｅｓｏｆＲｅｓｅａｒｃｈｏｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙｏｆＢｅｅｔＮｅｃｒｏｔｉｃＹｅｌｌｏｗＶｅｉｎＶｉｒｕｓ￥Ｙ...
- 姚华建于嘉林刘仪
- 关键词：甜菜坏死黄脉病毒分子生物学病毒
- 甜菜坏死黄脉病毒75kDa通读蛋白基因构建与表达被引量：11
- 1995年
- 利用DNA重组技术,将甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)内蒙分离物的CP基因和54kDa通读区片段拼接,构建了BNYVV75kDa通读蛋白基因。序列分析表明,构建的75kDa通读蛋白基因与野生型相比,只有4个核苷酸发生了改变(包括将CP基因的终止密码子TAG改造为ATG),相应地2个氨基酸也发生了改变。将75kDa通读蛋白基因及其54kD。片段分别克隆到pJW2上,构建了这两个基因的原核表达载体。SDS-PAGE和Western blotting检测结果表明,75kDa通读蛋白基因在E.coli BL21(DE3)中经温度(42℃)诱导后除可特异地表达75kDa。蛋白外,还产生两种小蛋白。75kDa通读蛋白基因的54kDa片段只表达出37kDa的蛋白。
- 于嘉林李大伟刘仪
- 关键词：甜菜坏死
- 中国香石竹病毒病的调查被引量：3
- 1990年
- 香石竹(Dianthus caryophyllus),别名康乃馨,是世界上名贵的花卉之一,由于其花期长,色泽鲜艳,花色多样,保鲜期长,是优良的切花材料。 香石竹在分类上属石竹科石竹属,为多年生草本宿根植物。病毒病的为害严重影响了其观赏价值。我们于1987—1988年以北京市郊巨山苗圃、上海长征苗圃、上海植物园、上海花木联营公司、上海园林局为重点对中国栽培香石竹病毒病首次进行了系统的调查。下面是调查的部分结果。
- 姜春晓蔡祝南刘仪
- 关键词：香石竹病毒病
- 甜菜丛根病症状类型的研究被引量：16
- 1991年
- 对甜菜丛根病4种类型的标样进行了病毒提纯,利用电子显微镜检查提纯的病毒形态,用光学显微镜检查病根中有无多粘菌(Polymyxa beta)和线虫,结合用鉴别寄主进行生物测定。结果认为坏死黄脉型,黄化型和黄色焦枯型由甜菜坏死黄脉病毒引起,病毒粒体杆状,直径18nm,有80,110,260和400nm 4种长度;黑色焦枯型病根中提纯出一种直径30nm的球状病毒,初步鉴定为番茄黑环病毒的一个株系。
- 崔星明刘仪蔡祝南武坚
- 关键词：甜菜丛根病
