刘俏俏
- 作品数：10 被引量：12H指数：2
- 供职机构：莱州市人民医院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金山东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 诱导型siRNA技术及其应用研究进展被引量：1
- 2009年
- RNA干扰为基因和蛋白质学的研究等提供了崭新的技术方法,诱导型siRNA主要是通过构建诱导型siRNA表达载体,实现siRNA技术对目的基因的可调控表达,为基因功能的研究、疾病基因治疗、疾病模型的建立、药物筛选等提供更完善的研究方法。本文主要对诱导型siRNA近年来的发展和应用进行综述。
- 刘俏俏尹昆闫歌
- C35基因诱饵表达载体的构建及活性检测
- 2011年
- 目的C35是一种新型的乳腺癌肿瘤标志基因,在乳腺癌细胞中存在普遍性高表达,可作为乳腺癌早期诊断的标志分子。为了进一步揭示C35基因在乳腺癌的发生和发展中对癌细胞的调控和信号转导机制,本研究拟构建C35基因的酵母双杂交诱饵表达载体,并进行自激活活性和诱饵蛋白毒性检测。方法采用RT-PCR自乳腺癌T47D细胞中克隆C35表达序列,合成3种C35基因片段,连接入诱饵表达载体pGBKT7,采用选择性培养皿和β-半乳糖苷酶(β-Galactosidase)分析检测重组质粒的自激活活性和细胞毒性。结果3种诱饵表达载体经鉴定全部克隆成功,其中C35全长基因的表达产物对酵母细胞具有生长抑制作用,两种截短体C35 1-153和C35 154-348不具有自激活活性和细胞毒性,无需3-AT抑制。结论C35全长基因的诱饵表达载体可能具有抑制酵母细胞自身蛋白表达系统的作用,两种截短体重组载体可应用于乳腺癌T47D cDNA文库双杂交筛选。
- 尹昆肖婷刘俏俏赵桂华朱嵩闫歌
- 关键词：乳腺癌酵母双杂交
- 新型乳腺癌标志基因C35的研究进展被引量：2
- 2011年
- C35基因是近年来发现的在乳腺癌细胞中特异性高表达,而在正常乳腺上皮细胞中不表达的基因,且C35基因的高度表达较Her2/-neu更为直接,表达谱更为广泛和稳定。C35基因可通过其保守的ITAM结构域促使细胞癌变,已成为一种新的特异性乳腺癌标志基因。本文综述了C35基因的序列分析、表达调控、致癌机制、互作因子和结构研究等方面的研究进展。
- 尹昆赵桂华刘俏俏肖婷
- 关键词：乳腺癌
- 弓形虫免疫作图蛋白1(TgIMP1)表位疫苗的设计及构建被引量：1
- 2022年
- 目的设计基于弓形虫免疫作图蛋白1(TgIMP1)抗原蛋白的表位疫苗并进行结构验证。方法分别采用IEDB和ABCpred软件预测TgIMP1蛋白的B细胞抗原表位,分别采用SYFPEITHI和IEDB软件预测TgIMP1蛋白的T细胞抗原表位,运用DNA man比对筛选出T-B联合表位,在PfIMP2同源结构中验证表位性质并设计TgIMP1优势表位盒。结果通过计算机虚拟设计,得到了4条TgIMP1的优势B细胞表位(B1-B4)和2条优势T细胞表位(T1-T2),6条优势表位均处于PfIMP2结构外侧的无规卷曲区,且均为极性表面,适合作为表位疫苗的备选肽段。结论根据预测结果构建了3种TgIMP1优势表位盒,为多价表位疫苗的研发奠定基础。
- 徐昊志周贝贝刘俏俏董宏杰代莉莎谢环环孙航王琦张俊梅赵桂华徐超尹昆
- 关键词：抗原表位弓形虫
- siRNA腺病毒体内抑制Survivin基因表达诱导裸鼠肿瘤细胞凋亡的研究被引量：2
- 2008年
- 目的利用腺病毒siRNA载体介导的RNA干扰技术,在免疫缺陷鼠肝癌肿瘤动物模型中通过靶向沉默细胞凋亡因子Survivin的表达,探讨其在活体动物肿瘤组织中的作用。方法利用肝癌细胞株HepG2构建裸鼠肝癌肿瘤细胞动物模型,并按照病毒注射剂量分组,将已构建的Survivin-siRNA重组腺病毒注射入裸鼠肿瘤内,观察肿瘤生长状况并绘制肿瘤生长曲线,利用TUNEL反应测定肿瘤组织细胞内DNA的片段化观察细胞凋亡。结果注射AdsiR- NA-Survivin高、低剂量组肿瘤生长明显受到抑制,且抑制程度与注射的腺病毒浓度呈正相关;TUNEL实验表明注射AdsiRNA-Survivin高、低剂量组的肿瘤组织标本可见大量细胞核呈黄褐色、核质浓缩、细胞形态不规则的凋亡细胞。高剂量组、低剂量组、AdsiRNA-U6组、PBS组凋亡细胞数依次减少。结论腺病毒siRNA载体系统可应用于活体动物试验中;AdsiRNA-Survivin对裸鼠人肝癌移植瘤有明显抑制作用,与肿瘤感染数或浓度成正比,且能促进人肝癌肿瘤细胞的凋亡。
- 尹昆刘俏俏朱嵩闫歌
- 关键词：SURVIVIN裸鼠动物模型凋亡
- 抑制C35基因表达诱导乳腺癌细胞凋亡及相关信号通路的研究
- 目的 siRNA载体抑制C35基因的表达后，观察乳腺癌细胞的凋亡及相关信号通路变化.方法 siRNA载体转染乳腺癌细胞，通过流式细胞和Tunel法检测细胞凋亡并利用Western blot研究相关信号分子Caspase-...
- 刘俏俏高歌尹昆朱嵩闫歌
- 腺病毒siRNA抑制RhoA基因并联合TNF-α诱导肝癌细胞凋亡的研究被引量：3
- 2012年
- 目的建立RhoA基因的腺病毒siRNA系统,并联合TNF-α诱导肝癌细胞凋亡,分析RhoA在肿瘤细胞中的功能和作用。方法用已构建的RhoA干扰质粒构建RhoA的腺病毒siRNA系统,筛选重组病毒并感染HepG2细胞,应用Western blot和RT-PCR检测RhoA蛋白表达和基因表达水平。感染Ad-siRNA-RhoA腺病毒的肝癌细胞用TNF-α诱导后进行MTT以及细胞内DNA片段化检测。结果成功构建RhoA基因的siRNA腺病毒系统。用重组病毒感染肝癌细胞,RhoA蛋白表达抑制率为76.48%;RhoA基因的mRNA转录水平降低74.46%。MTT检测显示,感染腺病毒Ad-U6-control对照组以及感染腺病毒Ad-siRNA-RhoA实验组的细胞A值差异无统计学意义(F=5.41,P>0.01),即利用siRNA抑制肝癌细胞中RhoA表达,肿瘤细胞凋亡不明显。TUNEL检测显示,RhoA腺病毒siRNA联合TNF-α致肿瘤细胞凋亡作用显著。结论构建的腺病毒siRNA载体系统能抑制目的基因RhoA的表达,联合TNF-α能抑制肿瘤细胞生长和增殖并诱导肿瘤细胞凋亡,为肿瘤基因功能的基础研究和肿瘤基因治疗打下了实验基础。
- 李冕朱嵩尹昆刘俏俏巴再华张佃波闫歌
- 关键词：RHOA基因TNF-Α肝癌细胞SIRNA腺病毒
- 抑制C35基因表达介导乳腺癌细胞凋亡及相关信号通路的研究
- 乳腺癌是严重危害女性健康的重要疾病之一，据调查数据显示，全球每年120万妇女罹患乳腺癌，并有50万死于该病。在西欧、北美等发达国家，乳腺癌的发病率占女性恶性肿瘤首位。传统的治疗方法，如手术、化疗、放疗等，尽管取得了一定的...
- 刘俏俏
- 关键词：SIRNA抑制乳腺癌凋亡细胞信号传导通路基因治疗
- 文献传递
- 乳腺癌细胞C35基因siRNA表达载体的构建以及抗肿瘤治疗应用
- 本发明属于基因工程技术领域，具体地说是乳腺癌细胞C35基因siRNA序列的设计，表达载体的构建及其在抗肿瘤治疗中的应用。本发明根据siRNA的设计原则，分别选择C35蛋白编码区259nt-278nt，编码区282nt-3...
- 闫歌尹昆刘俏俏朱嵩赵桂华刘波
- 文献传递
- siRNA抑制乳腺癌细胞C35基因的表达被引量：4
- 2009年
- 目的构建C35的小干扰RNA(siRNA),观察其在乳腺癌细胞株T47D中对C35基因的表达抑制作用。方法设计两对针对C35编码区的siRNA并合成,构建到转录载体pTZU6+1上,形成重组质粒siRNA-C35,在脂质体介导下转染乳腺癌细胞株T47D,RT-PCR分析RNA干扰后mRNA的变化,Western blot检测表达蛋白的变化。结果DNA测序和双酶切证明重组表达载体构建成功。RT-PCR结果显示,质粒pTZU6+1、pshRNA-C35-1和pshRNA-C35-2组的相对表达率分别是脂质体对照组的95.3%、40.0%和28.4%。Western blot结果显示,以转染脂质体组的蛋白带为标准,其他组与之比较,转染质粒pTZU6+1、psiRNA-C35-1和psiRNA-C35-2组的相对表达率分别是转染对照组(脂质体组)的94.9%、29.6%和32.2%。结论通过构建siRNA转录载体转染乳腺癌细胞株能有效抑制乳腺癌细胞中C35基因的表达。
- 刘俏俏尹昆朱嵩肖婷温培娥张玲李翠玲刘淼闫歌
- 关键词：RNA干扰乳腺癌
