刘在新
- 作品数：318 被引量：763H指数：13
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- O型口蹄疫抗体水平检测试纸及制备方法
- 本发明涉及一种用于对偶蹄类动物O型口蹄疫抗体水平进行快速检测的胶体金试纸条，这种试纸条的制备，以及其具体检测的方法。试纸条的底板上固定有多孔纤维材料构成的加样吸收垫、位于加样吸收垫尾端并与加样吸收垫相连的免疫金标层、和由...
- 蒋韬梁仲王超英杨亚民刘西兰陈涓张军翟国元才学鹏卫广森刘湘涛刘在新任维维智晓莹祁光宇
- 文献传递
- A型口蹄疫病毒衣壳蛋白主要抗原表位区的原核表达及免疫效果分析被引量：2
- 2019年
- 为了探索更有效的A型口蹄疫(FMD)表位疫苗,根据已鉴定的A型口蹄疫病毒(FMDV)主要抗原位点,结合基因序列比对分析,选择了A型FMDV流行毒株的主要抗原位点区进行表位蛋白分子的设计表达。所用表位序列包括A/QH/CHA/2013的VP2 70~81位、118~140位,VP1 G-H环131~157位、C末端188~212位,A/WH/CHA/09 VP1 43~48位、VP3 55~72位,以及非结构蛋白3A中的T细胞表位和通用性T细胞表位,构建免疫原蛋白分子命名为ANX2和ANX3,其中ANX2采用了表位序列反向串联的方式进行设计,用大肠杆菌表达免疫原基因,纯化表位蛋白免疫小鼠和猪,分析特异性体液免疫和细胞免疫应答水平,并对免疫猪进行了攻毒保护试验,评价表位疫苗的保护效果。结果显示,ANX2、ANX3重组蛋白以包涵体表达为主,蛋白大小约为41 ku和39 ku,均能与A型FMDV阳性血清发生特异性反应;免疫小鼠和猪后都能产生抗A型FMDV特异性抗体;用表位蛋白刺激免疫小鼠脾淋巴细胞,细胞因子IFN-γ和IL-4均有明显的升高;攻毒后对猪有一定的保护作用,ANX2的免疫效果略优于ANX3,证明表位序列反向串联更有利于抗原表位的展示,从而增强其免疫效果。本研究为A型FMDV表位疫苗的研究积累了经验。
- 汪肖肖孙普贾怀杰李冬付元芳陈应理曹轶梅景志忠白兴文卢曾军刘在新
- 关键词：A型口蹄疫病毒表位疫苗体液免疫
- 一种过表达HS3ST5基因的试剂在促进病毒感染中的应用及重组CHO-K1细胞系
- 本发明提供了一种过表达HS3ST5基因的试剂在促进病毒感染中的应用及其构建的重组CHO‑K1细胞系，属于基因工程技术领域。本发明提供通过将HS3ST5片段克隆到慢病毒载体中构建出重组慢病毒质粒，再经病毒拯救包装出的慢病毒...
- 白兴文卢曾军袁红黄磊宫晓华刘在新包慧芳李平花孙普李冬马雪青陈应理曹轶梅付元芳张婧邓欣雨焦云娟王利豪杨宇轩
- 一种新型T细胞免疫原的原核表达及对口蹄疫疫苗的免疫增强作用被引量：1
- 2011年
- 主要探讨了T细胞免疫原TI对口蹄疫疫苗的免疫增强作用。设计并原核表达产生了一种包含口蹄疫病毒VP1,VP4,3A和3D蛋白上多个T细胞表位与两个通用T细胞表位的T细胞免疫原,命名为TI;同时表达了O和Asia 1两个型口蹄疫病毒VP1蛋白的串联编码基因,表达产物命名为OA-VP1。将上述T细胞免疫原分别与OA-VP1和口蹄疫灭活疫苗按不同剂量组合免疫小鼠,于免疫后不同时间测定各组小鼠的体液与细胞免疫应答情况。采用微量中和试验检测小鼠O型和Asia1型中和抗体,采用流式细胞检测技术和测定γ-干扰素的水平来分析不同免疫组小鼠细胞免疫的水平。结果显示,与灭活疫苗或OA-VP1单独免疫组相比,添加TI抗原后灭活疫苗(P<0.01)和OA-VP1免疫组(P<0.05)小鼠均能产生高水平的特异性中和抗体;且CD4+T细胞数量显著增多I,FN-γ产生水平显著升高(P<0.01)。说明TI抗原具有很好的诱导特异性体液与细胞免疫应答的作用,是一种很好的免疫增效剂,可作为口蹄疫蛋白亚单位疫苗和灭活疫苗中的一种有效成分,以提高疫苗的免疫效果。
- 赵清孙普刘在新李平花包慧芳曹轶梅白兴文付元芳卢曾军李冬
- 关键词：口蹄疫病毒T细胞表位灭活疫苗亚单位疫苗
- 一种口蹄疫基因工程混合表位疫苗及其制备方法
- 本发明公开了一种口蹄疫病毒混合表位疫苗及其制备方法，该疫苗由四部分组成，由中国型、泛亚、缅甸98三个谱系O型口蹄疫病毒主要中和性抗原表位组成的串联B细胞表位重组蛋白BI，其基因序列为SEQ ID NO：1，氨基酸序列为S...
- 卢曾军刘在新曹轶梅孙普李冬包慧芳李平花付元芳陈白兴文应理谢宝霞
- 文献传递
- 一种口蹄疫病毒致弱突变株及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种口蹄疫病毒致弱突变株及其制备方法和应用，属于生物技术和生物制品技术领域。口蹄疫病毒致弱突变株是将亲本口蹄疫病毒前导蛋白基因中的Lb AUG突变为ATC或AAA，突变病毒在BHK‑21细胞中的复制能力与亲本...
- 卢曾军刘在新李平花袁红张杰白兴文孙普包慧芳李娜
- 动物RNA病毒感染性cDNA的研究进展被引量：1
- 2006年
- RNA病毒不仅对各国畜牧业的发展带来了严重的破坏,而且影响着畜产品进出口。感染性cDNA的研究虽然起步晚,但发展迅速。文章探讨了构建感染性cDNA的主要策略,并对正、负链RNA病毒感染性cD-NA的研究现状、国内外研究进展和应用情况,如基因组功能、研制标记疫苗和基因工程疫苗等做了综述,认为在此病毒上构建感染性cDNA有着广阔的前景,值得作进一步的探索,这对预防和控制RNA病毒引起的疾病将起重要的作用。
- 曾江勇郭建宏刘在新
- 关键词：RNA病毒疫苗
- 一种抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒的长链非编码RNA
- 本发明属于禽畜医药领域，提供了一种抑制PRRSV病毒的长链非编码RNA(lncRNA)，具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。敲低试验表明，敲低猪肺泡巨噬细胞中本发明所述的lncRNA后，PRRSV病毒的复制水平...
- 张婧卢曾军刘在新孙普曹轶梅甘利鹏李冬
- 文献传递
- 口蹄疫病毒O、A、AsiaⅠ型定型诊断胶体金免疫层析方法的建立被引量：30
- 2008年
- 【目的】建立一种从田间样品中快速、灵敏、简便检测O、A、AsiaI型口蹄疫病毒抗原的胶体金免疫层析方法(GICA)。【方法】采用柠檬酸三钠还原制备胶体金颗粒,标记纯化的标准株O、A、AsiaI型口蹄疫抗体。将纯化的口蹄疫流行株O/China99,A/AF72and AsiaⅠ/China05抗体和羊抗豚鼠抗体分别包被在硝酸纤维素膜上,作为检测带与质控带。经试验条件优化,组装形成胶体金定型诊断试剂盒。【结果】本试验研制的口蹄疫定型试剂盒具有良好的灵敏度,可检测到7.8×104LD50(1﹕128倍稀释乳鼠毒)的病毒量。同时对阳性及阴性样品进行3次重复检测结果完全相同,说明其有较好的重复性;特异性试验证实该方法在检测口蹄疫临床症状相似病原,如猪水疱病抗原(SVD)、水泡性口炎(VS)、水泡性疹(VES)等病毒时无交叉反应;试剂盒对206份已知血清型田间及实验室样品的符合率试验,O、A、AsiaⅠ型和阴性样本的符合率分别为92.45%、91.66%、92.75%、100%定型准确率94.58%。试剂盒在4℃下可保存6个月。【结论】本试验研发的口蹄疫病毒胶体金定型诊断试剂盒是一种快速、灵敏、特异的FMD抗原检测方法,对基层现场具有广泛应用价值。
- 蒋韬梁仲陈涓何继军吕律马维民刘在新刘湘涛
- 关键词：胶体金免疫层析法
- 口蹄疫病毒非结构蛋白定量检测ELISA方法的建立被引量：8
- 2009年
- 目的:利用口蹄疫病毒非结构蛋白3B单克隆抗体建立液相阻断ELISA检测方法,进行定量检测口蹄疫病毒培养液中的非结构蛋白含量。方法:首先将工作浓度的3B单抗与待测病毒培养液过夜结合反应,然后取结合液转移至用3B蛋白包被好的酶标板上,用标准3B蛋白做12个梯度做对照,同时设阴性对照和空白对照。通过回归分析算出口蹄疫病毒培养液中的非结构蛋白3B含量。结果:回归曲线呈典型的S形,符合4参数logit曲线拟合,相关系数R=0.99,检测范围为5～1500ng/ml,半数抑制浓度(Ic50)为130ng/ml。结论:该方法能特异、敏感的检测到病毒培养液中的非结构蛋白3B成分,并进行定量。
- 李永亮卢曾军杨苏珍田美娜谢宝霞刘在新
- 关键词：口蹄疫病毒单克隆抗体非结构蛋白
