卢曾军
- 作品数:229 被引量:306H指数:8
- 供职机构:中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- ssc-miR-151-3p在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用
- 本发明涉及ssc‑miR‑151‑3p在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用,属于抗病毒药物技术领域。本发明提供了ssc‑miR‑151‑3p在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用,所述ssc‑m...
- 张婧卢曾军孙普李凤娟曹轶梅李冬刘在新
- 口蹄疫病毒前导蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备被引量:1
- 2020年
- 前导蛋白(Lpro)是口蹄疫病毒(FMDV)编码的重要毒力因子,在拮抗宿主抗病毒反应中发挥多种功能。为了获得抗Lpro的抗体以研究Lpro的功能,本研究将L基因克隆到pET-28a(+)原核表达质粒中,构建了重组表达质粒pET-28a-L,转化至大肠杆菌BL21中进行重组蛋白的诱导表达,所获得重组His-Lpro主要以包涵体形式存在,利用Ni-NTA柱纯化获得了高纯度的His-Lpro,将His-重组Lpro与弗氏佐剂混合乳化后免疫新西兰大白兔,制备了高效价的Lpro兔多克隆抗体血清。通过免疫荧光试验(IFA)、免疫印迹试验(WB)检测Lpro兔多克隆抗体血清的反应原性。结果显示,该多抗血清能够特异性识别FMDV感染BHK21细胞后表达的Lpro,表明本研究制备的Lpro多抗血清具有很好的反应原性,为深入研究Lpro功能及其拮抗宿主天然免疫的作用机理奠定了基础。
- 李娜袁红李平花孙普白兴文龚婷龚婷朱国强李坤李坤马雪青卢曾军包慧芳
- 关键词:口蹄疫病毒原核表达多克隆抗体
- 一种猪趋化因子介导的A型口蹄疫靶向性复合表位蛋白及疫苗
- 本发明提供一种猪趋化因子介导的A型口蹄疫靶向性复合表位蛋白,其氨基酸序列为序列表中SEQ ID No.2。本发明还提供包含上述猪A型口蹄疫靶向性复合表位蛋白的疫苗。应用本发明的疫苗免疫动物,一周后均可检测到FMDV特异性...
- 曹轶梅卢曾军刘在新李坤付元芳李冬陈应理包慧芳白兴文孙普李平花
- 口蹄疫病毒非结构蛋白2C主要表位区的原核表达及其单克隆抗体的制备被引量:7
- 2009年
- 本研究制备并鉴定了口蹄疫病毒非结构蛋白2C的单克隆抗体(mAb)。以纯化的原核表达2C蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,所获得的杂交瘤细胞经间接ELISA法筛选,有限稀释法克隆,直至所克隆的细胞能够100%的分泌抗体,用Dot-ELISA以及IFA对mAbs的特异性等进行鉴定。共获得4株抗重组蛋白2C的mAbs,其亚类鉴定结果3株为IgG1,1株为IgG2b,叠加ELISA初步判定4株单抗所识别表位相同或相近。Dot-ELISA显示这些mAbs与重组2C蛋白和(2C'3AB)蛋白以及口蹄疫病毒O/China99感染的BHK-21细胞中的2C抗原均可特异性结合,IFA结果显示所得单抗能与FMDV感染细胞中的2C蛋白特异性结合。本研究获得的针对2C蛋白的特异性mAb,为进一步研究2C蛋白的结构和功能以及诊断方法奠定了基础。
- 田美娜李永亮付元芳卢曾军袁明吴磊刘在新
- 关键词:口蹄疫病毒大肠杆菌表达单克隆抗体
- 一种用于美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒的荧光RPA检测引物、方法及试剂盒
- 本发明公开了一种用于美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒的荧光RPA检测引物、方法及试剂盒。本发明涉及了用于美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒的荧光RPA检测引物和探针组合,包含引物和探针组合反应体系的检测试剂盒及方法;该方法快速省时...
- 孙普卢曾军王方洲张婧马雪青李平花赵志荀袁红包慧芳李冬付元芳曹轶梅李坤王健白兴文刘在新
- B细胞分离方法的研究进展被引量:3
- 2018年
- B细胞是重要的免疫细胞,如何筛选和分离分泌抗体的抗原特异性B细胞,对于研制一些特殊功能的抗体具有重要的方法学意义。本文阐述了不同发育阶段B细胞的表面分子特征与种属差异,以及基于这些表面分子的不同B细胞分离方法的原理与优缺点,旨在为抗原特异性B细胞的分离提供参考。
- 王省李坤卢曾军刘在新曹轶梅
- 关键词:B细胞抗体
- 一种用于捕获PRRSV核衣壳蛋白抗体的融合蛋白3AN及其应用
- 本发明提供了一种用于捕获PRRSV核衣壳蛋白抗体的融合蛋白3AN及其应用,属于病毒检测技术领域。本发明提供了一种用于捕获猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白抗体的融合蛋白3AN,氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。试验表...
- 张婧卢曾军李坤孙普王健张海霞白兴文付元芳曹轶梅刘在新
- 文献传递
- 一种ELISA试剂盒抗原间接包被酶标板的包被方法
- 一种ELISA试剂盒抗原间接包被酶标板的包被方法,包括以下步骤:(1)包被;(2)封闭:采用10g/L鱼明胶的0.01mol/LPBS缓冲液封闭;(3)捕获目标抗原;(4)加含5%蔗糖和1~5%牛血清白蛋白的0.01mo...
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- A型口蹄疫病毒多基因重组腺病毒载体的构建被引量:1
- 2008年
- 采用体外连接法构建了含有A型口蹄疫病毒(FMDV)P1-2A和3C或3ABC基因的重组腺病毒表达载体.利用PCR技术分别扩增得到P1-2A、3C和3ABC基因,经Xba I/BamH I和BamH I/Kpn I双酶切之后,与Xba I/Kpn I双酶切的穿梭载体pShuttle2大片段连接,获得重组穿梭质粒pSh-P12a3c和pSh-P12a3abc.然后用I-Ceu I和PbSce I双酶切穿梭质粒回收目的基因表达盒,通过体外连接法将目的基因表达盒与BDAdeno-X Virus DNA连接,转化DH5α感受态菌.获得两个重组腺病毒质粒分别命名为A-P12a3c和A-P12a3abc,经PCR、酶切及测序鉴定正确、用PacI酶切后转染HEK293细胞。取转染细胞裂解液上清连续传至第5代时,在24-48h内细胞完全病变.分别提取第3、7代病毒DNA,可扩增出目的基因,表明目的基因已整合到腺病毒基因组内,且能稳定传代.
- 孙普卢曾军刘霞李平花白兴文郭建宏包慧芳刘在新
- 关键词:口蹄疫病毒腺病毒载体
- 一种检测口蹄疫病毒O型保护性抗体的试剂盒和检测方法
- 本发明提供了一种检测口蹄疫病毒O型保护性抗体的试剂盒和检测方法,属于免疫学技术领域,所述试剂盒包括以下组分:捕获抗体;检测抗体;生物素;FMDV O型146S抗原;Strep‑HRP;TMB底物;包被缓冲液和封闭液;所述...
- 曹轶梅李坤卢曾军刘在新王省付元芳周莎莎包惠芳孙普李平花白兴文张婧马雪青李冬
- 文献传递