卢建红
- 作品数：29 被引量：205H指数：10
- 供职机构：中国动物卫生与流行病学中心更多>>
- 发文基金：江苏省“十五”科技攻关项目江苏省基础研究计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 重组鸡痘病毒表达的鸡IL-1β、IL-2和髓细胞生长因子对新城疫La Sota疫苗免疫效果影响被引量：1
- 2006年
- 为研究在新城疫LaSota疫苗免疫不全的情况下,重组鸡痘病毒(rFPV)表达的鸡白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素2(IL-2)和髓细胞生长因子(MGF)是否具有免疫增强作用。10日龄SPF鸡随机分成8组(I～VIII),每组18只,每只接种1个半数保护剂量(PD50)的LaSota疫苗,同时免疫不同剂量的表达鸡IL-1β、IL-2或cMGF的rFPV(rFPV-IL-1β、IL-2、cMGF)。结果:rFPV表达的IL-1β、IL-2或cMGF可以消除鸡痘病毒在免疫早期对雏鸡体重增长的影响;一定剂量的IL-1β和IL-2可使鸡脾脏中CD4+T细胞和CD8+T细胞的总体水平提高;免疫21d后用新城疫的F48E8强毒经肌肉攻毒,一定剂量的IL-1β和IL-2(I和III组)能提高LaSota疫苗的免疫保护率,而cMGF却没有表现出这种作用。本研究表明rFPV表达的IL-1β和IL-2在一定的剂量下可以增强LaSota疫苗的免疫效果,具有免疫增强作用。
- 邵卫星卢建红彭大新刘秀梵
- 关键词：鸡痘病毒白细胞介素1Β白细胞介素2
- 共表达新城疫病毒F基因和H9亚型禽流感病毒HA基因的重组鸡痘病毒被引量：16
- 2004年
- 应用RT PCR扩增出新城疫病毒F4 8E8株融合蛋白 (F)基因 ,将其克隆入pGEM Teasyvector构建重组质粒pGEM TF并进行测序确证。分别从pGEM T和pUCHA切下F基因和H9亚型禽流感病毒F株 (A chicken china F 1 998)血凝素 (HA)基因 ,通过一系列分子生物学操作步骤插入到质粒pFPV7S中的鸡痘病毒基因组复制非必需片段构建重组质粒p7SHF ,其中F基因和HA基因分别由鸡痘病毒启动子PE L和合成启动子PS调控。最后将P1 1 LacZ报告基因表达盒插入质粒p7SHF获得转移载体pFPVHF ,用以转染已预先感染鸡痘病毒 2 82E4疫苗株的鸡胚成纤维细胞 (CEF)。通过在含有X Gal的营养琼脂上连续挑选蓝色病毒蚀斑获得并纯化重组病毒。PCR和Southernblot检测证实了F基因和HA基因已插入鸡痘病毒的基因组 ;间接免疫荧光试验结果表明重组病毒能够同时正确表达HA和F蛋白。
- 韦栋平刘玉良邵卫星卢建红刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒H9亚型禽流感病毒重组鸡痘病毒血凝素
- H9N2亚型禽流感病毒基因组全长序列测定和各基因的遗传分析被引量：32
- 2003年
- 用RT PCR技术及cDNA末端快速扩增法获得禽流感病毒分离株A Chicken Shanghai F 98(H9N2 )代表基因组全长的 8个基因片段。基因组序列比较及遗传进化分析结果表明 ,Chicken Shanghai F 98的 8个基因均不属于Quail HongKong G1 97亚系 ,与香港禽流感事件没有直接关系。它与Chicken Beijing 1 94的HA、NA、M、NS基因同源率分别为 96 7%、96 4%、97 5 %和 98 0 % ,这 4个基因属于Chicken Beijing 1 94亚系 ,其中 ,NA基因与Duck HongKong Y2 80 97的同源率为 97 4% ,而且它们均在 2 0 5位后缺失 9个核苷酸。而PB2、PB1、PA和NP基因与已知的 3个亚系关系较远 ,分别在相应的进化树上另成分支。因此 ,Chicken Shanghai F 98是两个以上不同基因亚系间发生自然重排的产物。
- 卢建红刘秀梵邵卫星张评浒韦栋平
- 关键词：H9N2亚型禽流感病毒基因组
- 重组鸡痘病毒表达的鸡IL-1β和IL-2以及cMGF对新城疫LaSota疫苗免疫效果的影响被引量：10
- 2006年
- 将128只10日龄SPF鸡随机分成8组,每只免疫1 PD_(50)的新城疫LaSota疫苗；同时Ⅰ～Ⅵ组鸡分别皮下注射不同剂量的重组鸡痘病毒rFPV-IL-1β、rFPV-IL-2或cMGF,而Ⅶ组和Ⅷ组鸡分别皮下注射鸡痘病毒wt-FPV和PBS作为阴性对照和空白对照。结果,重组鸡痘病毒表达的IL-1β、IL-2或cMGF可以消除鸡痘病毒在免疫后第7d对雏鸡体重增长的影响；一定剂量的IL-1β和IL-2可使鸡脾中CD4^+T细胞在免疫后第7d和CD8^+T细胞在免疫后第14d的总体水平提高；免疫第21d新城疫F48E8强毒攻毒后,一定剂量的IL-1β和IL-2能提高免疫保护率,而cMGF却无此作用。结果表明,重组鸡痘病毒表达的IL-1β和IL-2在一定剂量下可增强新城疫LaSota疫苗的免疫效果。
- 邵卫星卢建红彭大新刘秀梵
- 关键词：鸡痘病毒白细胞介素-2免疫效果
- H5亚型高致病性禽流感疫苗的免疫效力被引量：21
- 2004年
- 利用表达H5亚型禽流感病毒血凝素基因(HA)的重组鸡痘病毒(rFPV-HA)和全病毒灭活疫苗免疫商品鸡,比较两种疫苗的保护效力。结果发现,利用103PFU和106PFU的rFPV-HA免疫无母源抗体商品鸡和含母源抗体商品鸡,HI抗体应答水平均低于灭活疫苗免疫组。利用H5亚型禽流感病毒经肌肉注射攻毒后,rFPV-HA免疫的无母源抗体商品鸡获得了完全保护(100%),高于灭活疫苗保护率(94.7%);但rFPV-HA免疫含母源抗体商品鸡诱导的保护率(11.4%～15.8%)低于灭活疫苗免疫组的保护水平(68.4%)。结果表明,rFPV-HA诱导HI抗体的能力低于灭活疫苗;但rFPV-HA免疫无母源抗体商品鸡的保护率完全达到灭活疫苗保护水平,显示出了良好的应用前景;灭活疫苗和rFPV-HA均受到母源抗体的干扰,不适于在母源抗体处于高峰期时使用。
- 贾立军刘秀梵卢建红张艳梅彭大新张如宽
- 关键词：免疫效力血凝素基因重组鸡痘病毒
- H9N2禽流感病毒反向遗传系统转录/表达载体的构建和验证被引量：6
- 2005年
- 设计带有BsmBI、BsaI或AarI酶切位点的引物,用RT-PCR扩增H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的8个基因全长片段,克隆入双向转录/表达载体pHW2000,并在PB2、PB1和NA基因中共引入了3个沉默突变标签。将其2个表面基因(HA和NA基因)加上任意1个内部基因,而其它5个内部基因来自A/WSN/33,进行了6种3+5组合形式的基因重排,把相应组合的转录/表达质粒共转染COS-1细胞,均产生了预期组合、有感染性的H9N2亚型流感病毒,表明亲缘关系遥远的流感病毒可以互相获取基因片段产生重组病毒,提示表面结构基因和单个内部基因不足以限制H9N2AIV在哺乳动物细胞上的宿主范围,同时也验证了构建的8个转录/表达载体均能有效工作,为进一步研究H9N2亚型AIV基因结构与功能、AIV与宿主之间的关系打下了基础。
- 卢建红邵卫星龙进学刘玉良石火英刘秀梵
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型反向遗传技术基因重排
- 表达鸡白细胞介素2重组鸡痘病毒的构建及其体外表达产物生物活性的检测被引量：3
- 2004年
- 从ConA刺激的鸡脾细胞中扩增出鸡白细胞介素 2 (ChIL 2 )基因编码区。将该编码区cDNA序列和调控其转录的鸡痘病毒早晚期启动子 (PE L)的基因片段定向克隆到鸡痘病毒转移载体p1175中 ,获得重组转移载体p1175IL2 ,然后转染已感染鸡痘病毒 2 82E4疫苗株 (wt FPV)的鸡胚成纤维细胞 (CEF) ,质粒p1175IL2与wt FPV基因组DNA发生同源重组 ,产生了表达ChIL 2的重组鸡痘病毒rFPV IL2。通过在含X gal的营养琼脂上连续挑选蓝色病毒蚀斑 ,获得并纯化重组鸡痘病毒rFPV IL2。应用XTT PMS方法检测的rFPV IL2 (M .O .I 2 0 )感染CEF 72小时后细胞上清中表达的重组ChIL 2生物活性 ,效价为 3 6× 10 5u mL ,表明rFPV IL2能有效地表达ChIL 2。下一步将利用rFPV IL2在体内表达ChIL 2 ,研究ChIL 2的免疫增强作用及其作用机理。
- 邵卫星彭大新卢建红韦栋平刘玉良刘秀梵
- 关键词：鸡白细胞介素2重组鸡痘病毒体外表达生物活性
- 拜特灭毒威对禽流感病毒的杀灭试验
- 2004年
- 禽流感是由正粘病毒科中的 A型流感病毒引起的一种禽类感染的疾病综合症。近年来 ,由于国内外时有从活禽市场检出 H5 N1流感病毒或发生禽流感等情况 ,故加强禽流感的防制工作迫在眉睫。本试验采用湖南省长沙拜特生物科技研究所生产的拜特灭毒威对禽流感病毒进行灭毒试验。结果表明 ,拜特灭毒威在 1:4 0 0 0至 1:2 0 0 0 0或 1:4 0 0 0至 1:2 5 0 0 0的浓度范围内与 AIV作用 5 min或 10 min,对 AIV的杀灭率可达 99.9%以上 ,稀释度在 1:80 0 0以下作用 5 min或 1:10 0 0 0以下作用 10 min,杀灭率均为 10 0 %。
- 卢建红邵卫星刘玉良韦栋平刘武杰张如宽刘秀梵
- 关键词：禽流感病毒杀灭试验消毒药
- 鹧鸪组织滴虫病的诊疗被引量：1
- 2003年
- 1流行情况和症状2001年7月,衡阳市某户养殖的6个月龄和15个月龄的两批种用鹧鸪共110只以及自繁自养的2月龄以内的小鹧鸪500只陆续发病死亡,主要症状为拉稀、消瘦、精神沉郁,有的呼吸困难.使用多种抗菌药物治疗无效.1个月内,种鸪死亡40只,小鸪死亡400多只.
- 卢建红谈志详邱立新刘道新
- 关键词：鹧鸪组织滴虫病剖检变化
- 鹅源新城疫病毒ZJ1株微型基因组的构建及其初步应用被引量：7
- 2005年
- 在获得鹅源新城疫病毒ZJ1株全基因组序列的基础上 ,用增强型绿色荧光蛋白 (eGFP)报告基因取代鹅源新城疫病毒ZJ1株整个编码区 ,只保留与病毒复制、转录和病毒粒子包装相关的调控序列 ,将其反向克隆入转录载体TVT7R(0 0 )中 ,构建了该毒株的微型基因组。当转染用辅助病毒ZJ1株感染的HEp_2细胞时报告基因得到表达 ,表明此微型基因组RNA可被辅助病毒提供的NP、P和L蛋白翻译。同时将该病毒NP、P和L蛋白基因分别克隆入真核表达载体pCI_neo中 ,构建了表达该病毒NP、P与L蛋白的辅助质粒 ,用此微型基因组对辅助质粒的表达产物进行了功能鉴定并对该病毒拯救过程中痘苗病毒的最适感染剂量进行了摸索。
- 张艳梅刘玉良黄勇贾立军刘秀梵卢建红韦栋平吴艳涛
- 关键词：新城疫病毒病毒拯救
