韦栋平
- 作品数：25 被引量：142H指数：9
- 供职机构：扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金江苏省“十五”科技攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鹅源新城疫病毒NP、P和L基因的克隆与P基因的表达鉴定被引量：12
- 2004年
- 将鹅源新城疫病毒的NP、P和L基因通过RT PCR方法从尿囊液中扩增后分别克隆进pGEM Teasy载体 ,再分别亚克隆到真核表达载体pCI neo上 ,通过酶切、PCR和测序验证克隆正确。利用P基因开放性阅读框 (ORF)上靠近终止密码上游的AgeI位点 ,将报告基因绿色荧光蛋白 (GFP)基因克隆进P基因真核表达重组质粒 ,分别转染COS 1细胞和CEF细胞 ,在倒置荧光显微镜下可见到绿色荧光 ,表明GFP基因已得到表达 ,由此证明P基因也已得到表达。鹅源新城疫病毒NP、P和L基因的克隆成功 。
- 刘玉良吴艳涛黄勇邵卫星韦栋平刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒绿色荧光蛋白
- 两种消毒剂对禽流感病毒的杀灭效果比较
- 2002年
- 卢建红邵卫星刘玉良韦栋平吴艳涛张如宽刘秀梵
- 关键词：消毒剂禽流感病毒杀灭效果
- 鹅源新城疫病毒NP、P和L基因的克隆与P基因的表达鉴定
- 本文对一株鹅源新城疫病毒NP、P和L基因成功克隆进真核表达载体,并且对P基因的表达进行了初步的鉴定.
- 刘玉良吴艳涛黄勇邵卫星韦栋平卢建红张艳梅张如宽刘秀梵
- 关键词：鹅源新城疫病毒基因克隆基因表达
- 文献传递
- RT-PCR诊断猪瘟的应用被引量：9
- 2004年
- 应用猪瘟病毒特异性引物A1/A2进行RT-PCR反应,对1999年11月至2001年1月期间来自广西16个市县、19个养猪场的58份疑似猪瘟病料进行了检测,证明其中34份为阳性,阳性率为58.62%。
- 陆芹章韦栋平罗廷荣刘芳黄伟坚廖素环吴显实余克伦
- 关键词：猪瘟RT-PCR猪瘟病毒
- 新城疫病毒融合蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立
- 2004年
- 用新城疫病毒(NDV)F48E8株作为包被抗原,建立了检测由鸡痘病毒载体介导表达的NDV融合蛋白(F)抗体的间接ELISA方法。通过对20份阳性血清的P/N值与ELISA抗体效价(ET)的自然对数值(InET)的线性回归分析,获得了回归方程InET=0.201×P/N+4.632。应用该ELISA方法对表达NDVF基因的重组鸡痘病毒免疫鸡群进行了血清抗体检验,结果表明,血清的ELISA抗体效价与相应血清中和试验的抗体效价高度相关。攻毒保护试验结果显示,ELISA抗体效价与机体的保护力表现一定程度的相关性。
- 韦栋平徐忠林张如宽刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒间接ELISA法抗体效价
- 共表达新城疫病毒F基因和H9亚型禽流感病毒HA基因的重组鸡痘病毒被引量：15
- 2004年
- 应用RT PCR扩增出新城疫病毒F4 8E8株融合蛋白 (F)基因 ,将其克隆入pGEM Teasyvector构建重组质粒pGEM TF并进行测序确证。分别从pGEM T和pUCHA切下F基因和H9亚型禽流感病毒F株 (A chicken china F 1 998)血凝素 (HA)基因 ,通过一系列分子生物学操作步骤插入到质粒pFPV7S中的鸡痘病毒基因组复制非必需片段构建重组质粒p7SHF ,其中F基因和HA基因分别由鸡痘病毒启动子PE L和合成启动子PS调控。最后将P1 1 LacZ报告基因表达盒插入质粒p7SHF获得转移载体pFPVHF ,用以转染已预先感染鸡痘病毒 2 82E4疫苗株的鸡胚成纤维细胞 (CEF)。通过在含有X Gal的营养琼脂上连续挑选蓝色病毒蚀斑获得并纯化重组病毒。PCR和Southernblot检测证实了F基因和HA基因已插入鸡痘病毒的基因组 ;间接免疫荧光试验结果表明重组病毒能够同时正确表达HA和F蛋白。
- 韦栋平刘玉良邵卫星卢建红刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒H9亚型禽流感病毒重组鸡痘病毒血凝素
- H9N2亚型禽流感病毒基因组全长序列测定和各基因的遗传分析被引量：31
- 2003年
- 用RT PCR技术及cDNA末端快速扩增法获得禽流感病毒分离株A Chicken Shanghai F 98(H9N2 )代表基因组全长的 8个基因片段。基因组序列比较及遗传进化分析结果表明 ,Chicken Shanghai F 98的 8个基因均不属于Quail HongKong G1 97亚系 ,与香港禽流感事件没有直接关系。它与Chicken Beijing 1 94的HA、NA、M、NS基因同源率分别为 96 7%、96 4%、97 5 %和 98 0 % ,这 4个基因属于Chicken Beijing 1 94亚系 ,其中 ,NA基因与Duck HongKong Y2 80 97的同源率为 97 4% ,而且它们均在 2 0 5位后缺失 9个核苷酸。而PB2、PB1、PA和NP基因与已知的 3个亚系关系较远 ,分别在相应的进化树上另成分支。因此 ,Chicken Shanghai F 98是两个以上不同基因亚系间发生自然重排的产物。
- 卢建红刘秀梵邵卫星张评浒韦栋平
- 关键词：H9N2亚型禽流感病毒基因组
- H5亚型禽流感重组鸡痘病毒活载体疫苗的免疫效力被引量：12
- 2003年
- 利用表达H5亚型禽流感病毒血凝素基因的重组鸡痘病毒疫苗免疫SPF鸡和无母源抗体的商品鸡,通过比较免疫后血凝抑制(HI)抗体应答水平、攻毒后发病率和死亡率等指标评价其免疫保护作用。免疫后21d,重组鸡痘病毒免疫组仅有13%～20%鸡的HI抗体检测呈阳性。在同亚型禽流感病毒攻击后,重组鸡痘病毒疫苗免疫组产生了100%的保护率,而未免疫组全部死亡。结果表明:重组鸡痘病毒疫苗不能激发高滴度HI抗体应答,但可抵御同亚型禽流感病毒致死性攻击,保护效果达到或优于目前应用的灭活苗,显示出良好的应用前景。
- 贾立军张艳梅李军伟韦栋平刘红旗陈素娟彭大新张如宽刘秀梵
- 关键词：重组鸡痘病毒禽流感血凝素基因免疫效力
- 无抗性表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原基因的重组菌构建被引量：3
- 2005年
- 利用平衡致死系统成功地将构建表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原基因的重组菌BL21(pFSFaeG)中所含氨苄抗性基因敲除,并转化沙门氏菌宿主菌X4550。经过质粒酶切分析和表达产物的SDSPAGE证实,氨苄抗性基因已经成功敲除,并且目的蛋白仍与谷胱甘肽转移酶相融合,得到有效表达,重组融合蛋白的分子质量约为80ku。经体外连续传代试验,重组菌X4550(pFSFaeG)均能在无抗生素压力下大量扩增并稳定传代,质粒稳定性和蛋白表达稳定性良好。无抗性重组菌的成功构建解决了基因工程疫苗抗性基因潜在危险问题,并有望通过沙门氏菌载体的递送作用,为研制口服疫苗奠定了基础。
- 杨健美张小荣高崧韦栋平刘秀梵
- 关键词：基因敲除蛋白表达
- 新城疫病毒融合蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立被引量：9
- 2004年
- 用新城疫病毒(NDV)F48E8株作为包被抗原,建立了检测由鸡痘病毒载体介导表达的NDV融合蛋白(F)抗体的间接ELISA方法。通过对20份阳性血清的P/N值与ELISA抗体效价(ET)的自然对数值(lnET)的线性回归分析,获得了回归方程lnET=0.201×P/N+4.632。应用该ELISA方法对表达NDVF基因的重组鸡痘病毒免疫鸡群进行了血清抗体检测,结果表明,血清的ELISA抗体效价与相应血清中和试验的抗体效价高度相关。攻毒保护试验的结果显示,ELISA抗体效价与机体的保护力表现一定程度的相关性。
- 韦栋平徐忠林张如宽刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒间接ELISA抗体效价鸡痘病毒基因工程疫苗
