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大鼠羊水双向电泳样品不同处理方法的比较被引量：1: 2012年; 目的比较羊水样品2-d电泳的不同处理方法，以建立相对简单、重复性好、检出效率高的2-d电泳方法。方法提取孕17天正常大鼠单水，分别采用三氯乙酸一丙酮沉淀法（方案1）、三氯乙酸一丙酮沉淀法联合白蛋白和IgG去除试剂盒（方案2）及超滤膜浓缩法联合白蛋白和IgG去除试剂盒（方案3）三种方法处理羊水，之后进行双向电泳分离、胶体染色、软件分析和质谱检测。结果方案1、2和3分别检测到的蛋白点为253±28、749±32和782±27个，方案1与方案2和方案3比较差异均具有统计学意义（P〈0．05）；方案2与方案3比较，差异具有统计学意义（P〈O．05）。方案1、2和3检测的相对分子质量〉50000蛋白点分别为57±14，45±13和41±14个，差异无统计学意义；方案1、2和3检测的相对分子质量〈50000蛋白点分别为196±29，702士35，735±29个，方案1与方案2和方案3比较差异均具有统计学意义（P〈0．05）；方案2与方案3比较，差异具有统计学意义（P〈O．05）。结论采用超滤膜和去除高丰度蛋白预处理羊水标本可去除高丰度蛋白，提高低丰度蛋白含量，是研究羊水蛋白组的有效方法。; 单立平李慧范洋周凤华顾卉袁正伟; 关键词：蛋白组羊水质谱双向电泳

先天性巨结肠的SEMA3A基因单核苷酸多态性分析被引量：1: 2011年; 目的探讨SEMA3A基因单核苷酸多态性（SNP）与先天性巨结肠发生的关系。方法应用PCR扩增后直接测序的方法．分析119例先天性巨结肠患者和93例正常人群中SEMA3Ars7804122、rs7978212个SNP位点基因型。结果SEMA3A基因rs797821位点的等位基因频率和基因型频率在先天性巨结肠组和正常对照组的分布差异无统计学意义（P〉0．05）。rs7804122位点的G等位基因（26．9％）和GG（5．0％），AG（43．7％）基因型在先天性巨结肠组中的频率明显高于正常对照组（12．9％、1．1％、23．7％，P〈0．05）。结论SEMA3A基因是先天性巨结肠重要的易感基因．其rs7804122位点G等位基因是先天性巨结肠发病的危险因素。; 王莉莉范洋张一周凤华李慧吴迪苗佳宁黄天楚袁正伟; 关键词：先天性巨结肠

先天显性脊柱裂胎鼠羊水蛋白谱差异性分析被引量：1: 2013年; 目的采用2-D／质谱电泳方法，比较孕17d正常组胎鼠和全反式维甲酸诱导的显性脊柱裂胎鼠羊水蛋白表达谱的变化，筛查先天性显性脊柱裂相关羊水标记物。方法孕10d大鼠，采用全反式维甲酸胃管灌饲的方法建立先天显性脊柱裂动物模型24只（脊柱裂组），正常对照组9只（正常组）。孕17d晨，麻醉孕鼠，显微镜下获取每个胎囊的羊水及胎鼠，并检查胎鼠畸形情况。提取羊水蛋白质，merck试剂盒去除高丰度白蛋白和IgG，行2-D、胶体染色、图像扫描分析及质谱检测，Western—blot进一步验证2-D结果。结果鉴定出6种蛋白质（其中1种蛋白质可能对应多个蛋白点）：甲胎蛋白（AFP）、转铁蛋白（transferrin，TF）、信号识别颗粒受体B亚基（srprb）55kDa、srprb 77kD、α-1抗蛋白酶及载脂蛋白A4（Apo A4）。其中，Apo A4和Srprb 77kDa在脊柱裂组表达下调，而TF、Srprb 55kDa和α-1抗蛋白酶在脊柱裂组表达上调。46个蛋白质点被鉴定为AFP及其片段，11个AFP蛋白点在脊柱裂组表达降低，35个蛋白点在脊柱裂组表达升高。通过Western-blot共发现69kDa、52kDa、36kDa、24kDa和14kDa5种分子量的AFP片段，其中69kDa的AFP在脊柱裂组和正常组含量均为最高。脊柱裂组与正常组比较，AFP上调42％，而Apo A4下调44％，组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论本研究发现羊水中6种蛋白质与显性脊柱裂畸形发生有关，进一步研究这些差异表达蛋白，可以为了解脊柱裂的发病机制和产前诊断提供实验依据。; 单立平李慧范洋周凤华顾卉袁正伟; 关键词：椎管闭合不全电泳蛋白质组学

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周凤华

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