夏曦
- 作品数：19 被引量：83H指数：5
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 环孢素A延长腺病毒基因治疗载体体内存在时间的研究被引量：1
- 2006年
- 目的研究重组腺病毒载体在免疫抑制疗法应用中的安全性并探讨环孢素A对该载体在体内清除的影响。方法采取腹膜后注射纯化重组腺病毒建立动物模型,连续给予环孢素A 14 d,取不同时间点大鼠样本,HE染色观察各主要脏器病理反应,免疫组化方法检测肝、脾、肺、肾、肌肉及淋巴结腺病毒的表达情况。结果①HE染色切片,各脏器呈现一过性可逆性轻微炎性反应。②免疫组化检测,对照组中重组腺病毒逐渐减弱至阴性,实验组中重组腺病毒存在时相性明显延长(P<0.05)。③腺病毒分布呈现肝脾肺高表达而其它组织表达相对较低。结论重组腺病毒作为基因治疗载体在免疫抑制疗法应用中具有一定的安全性,环孢素A能够部分抑制实验动物体内的免疫反应从而延长重组腺病毒在体内存在的时间。
- 夏曦王蓓蓓陈刚吴鹏罗丹枫李辅军郉辉王金韬卢运萍周剑锋马丁
- 关键词：环孢素A腺病毒基因治疗载体免疫抑制疗法
- AKT2基因沉默抑制卵巢癌细胞侵袭和粘附能力的实验研究被引量：4
- 2008年
- 目的:探讨AKT2基因对人卵巢癌细胞A2780侵袭和黏附活性的影响。方法:构建AKT2基因的短发卡状RNA质粒转染人卵巢癌细胞A2780,运用RT-PCR、蛋白质免疫印迹法比较转染前后AKT2表达的差异;用transwell小室检测细胞侵袭人工基底膜的能力;MTT法检测卵巢癌细胞与细胞外基质黏附能力。结果:与对照相比,构建shR-NA表达载体可抑制AKT2 mRNA转录和蛋白的表达;AKT2表达下降后,穿透重组基底膜的细胞数明显下降(P<0.05),且可显著抑制细胞与细胞外基质的黏附(P<0.05)。结论:靶向AKT2 shRNA能有效地抑制卵巢癌细胞中AKT2基因的表达,并抑制卵巢癌细胞体外侵袭和黏附能力。AKT2基因有可能成为治疗卵巢癌的新途径。
- 孙冬岩夏曦翁丹卉卢运萍马丁
- 关键词：卵巢肿瘤基因AKT2RNA干扰
- 骨髓间充质干细胞携带重组腺病毒靶向杀伤乳腺癌
- ＜正＞目的:目前,肿瘤基因治疗以重组腺病毒应用为主导。腺病毒全身应用大部分被截留于柯萨奇病毒受体（CAR）高表达细胞,以肝细胞为甚;同时,机体对其的快速免疫应答产生腺病毒中和抗体,到达肿瘤局部病毒量明显减少。最新研究表明...
- 夏曦纪腾胡问成韩志强高庆蕾周剑锋
- 文献传递
- 高危型HPV检测在预测宫颈上皮内瘤变锥切后残存病变或复发中的意义被引量：23
- 2010年
- 目的:评价高危型HPV(HR-HPV)检测在预测宫颈上皮内瘤变宫颈锥切术后残存病变或复发中的意义。方法:收集2004年4月1日～2009年5月30日武汉同济医院妇产科因宫颈上皮内瘤变行二次手术治疗的44例病人的临床资料进行回顾性研究,所有病人均于首次宫颈手术前6个月内进行了HR-HPV检查。结果:Logistic回归模型分析显示,患者年龄、产次、锥切方法、腺体是否累及和CIN病变程度与宫颈锥切后病人是否发生残存病变或复发无关,而HR-HPV测量值(RLU/PC)≥500是宫颈锥切术后发生残存病变或复发的高危因素。结论:HR-HPV检测是一种有效地预测宫颈锥切术后残存病变发生或复发的方法,对子宫颈疾病的诊疗具有重要的意义。
- 蒋学锋杨洁阚淳一张逸群叶双梅夏曦李科珍卢运萍马丁
- 关键词：宫颈上皮内瘤变宫颈锥切复发
- 人乳头瘤病毒16型E5对人宫颈癌SiHa细胞恶性潜能的影响及其机制探讨
- 2008年
- 目的通过构建和筛选持续表达HPV16E5的细胞SiHa／16E5，探讨HPV16E5对宫颈癌SiHa细胞的作用及机理。方法利用pEGFP—C1构建HPV16型E5的正义全长真核表达载体并稳定转染SiHa细胞；利用RT-PCR和Western印迹技术检测转染前后E5和P21基因的mRNA和GFP＋E5和P2t蛋白的变化；利用MTT法检测SiHa细胞稳定转染后的增殖活性；利用软琼脂克隆形成和裸鼠成瘤实验分别在体内外验证了SiHa／16E5细胞的致瘤情况。结果稳定转染携带HPV16全长E5基因的质粒后，SiHa细胞中E5基因的mRNA和相应蛋白表达明显升高，而P21的表达则明显下调；MTF结果显示稳定转染后细胞的增殖活性与转染空载体细胞和未转染细胞比较明显增高（P〈0．05）；软琼脂克隆形成结果示：SiHa／16E5细胞组的可隆形成数为33．4±1．6，与空质粒对照组细胞（15．1±3．1）及未转染组细胞（16．3±2．5）比较差异有统计学意义（P〈0．05）；裸鼠成瘤实验结果显示，4个实验组在共20d的观察中，SiHa／16E5组裸鼠成瘤明显快于其他3个对照组（P〈0．05）。结论HPV16E5可降低宫颈癌SiHa细胞中P21的表达，加强宫颈癌SiHa细胞增殖和成瘤效应。
- 廖书杰邓东锐夏曦韩凌斐胡晓继白向阳王薇卢运萍王世宣马丁
- 关键词：人乳头瘤病毒宫颈癌
- 人乳头状瘤病毒16型多肽疫苗的制备及体内外效应观察被引量：2
- 2009年
- 目的探讨人乳头状瘤病毒（HPV）16型多肽疫苗的制备，并观察HPV16多肽疫苗的体内外效应。方法（1）针对抗原加工相关转运子（TAP）设计HPV16E7蛋白的主要组织相容性复合物I类分子（MHC—I）的抗原结合表位，利用生物信息学分析平台筛选出一致性较高、特异性及亲和力较强的HPV16E7多肽作为研究对象制备HPV16多肽疫苗用于以下研究，本研究共筛选出3段多肽，分别命名为E7Pa、E7Pb、E7Pc。（2）C57BL／6小鼠注射鼠肺上皮细胞株TC-1细胞（为鼠源性的HPV16阳性的肿瘤细胞株）后，采用等额抽取的随机方法分为5组，E7Pa＋二核苷胞嘧啶（CpG）、E7Pb＋CpG、E7Pe＋CpG[均为实验组，分别加入终浓度为50μg／ml的E7Pa、E7Pb、E7Pc和终浓度为12mg／L的刀豆蛋白（ConA）]、CpG（为阳性对照，加入终浓度为12mg／L的ConA）和空白对照组（不做任何处理）。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测各组作用不同时间后小鼠脾T淋巴细胞的体外增殖效应，乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测小鼠脾T淋巴细胞在不同效靶比下的体外细胞毒T淋巴细胞（CTL）活性，实时荧光定量RT—PCR技术检测小鼠肿瘤组织中1干扰素（IFN-γ）、白细胞介素2（IL-2）mRNA的表达水平，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠外周血中IFN-γ、IL-2的表达水平，通过定期测量比较各组小鼠接种HPV16多肽疫苗后体内肿瘤体积的变化。结果（1）本研究筛选出了一致性较高、特异性及亲和力较强的3段HPV16E7多肽作为研究对象制备HPV16多肽疫苗，分别命名为E7Pa、E7Pb、E7Pe。（2）MTT比色法检测显尔，在接种疫苗24、48、72、96h后，以E7Pa＋CpG组的增殖效应最明显，其细胞增殖率分别为（131±32）％、（302±15）％、（552±28）％、（731±24）％，明显高于空白对照组的（72±15）％、（120±57）％、（176±41）％、（288±29）％（P〈0．01）；E
- 廖书杰胡晓继韩凌斐蒋学峰夏曦王薇卢运萍王世宣马丁
- AKT2通过调控p27表达逆转卵巢癌顺铂耐药被引量：4
- 2008年
- 目的:探讨上皮性卵巢癌中蛋白激酶B beta(v-akt murine thymoma viral oncogene homolog 2,AKT2)与p27在卵巢癌多细胞球体顺铂耐药中的作用。方法:三维培养获得人卵巢癌多细胞球体(multi-cellular spheroids,MCS);Western印迹法分析p27及AKT2表达;构建AKT2干扰载体,脂质体法转染A2780细胞后三维培养形成多细胞球体,不同浓度顺铂处理后通过FCM法检测细胞凋亡,MTT法比较细胞对顺铂的敏感性。结果:Western印迹法结果提示,MCS中AKT2及p27的表达高于单层细胞;转染AKT2干扰载体(shRNA-AKT2)的MCS中AKT2、p27表达量较未转染MCS及转染空载体的MCS明显降低。流式细胞仪分解结果表示,不同浓度顺铂作用后,MCS凋亡率明显低于单层细胞;转染shRNA-AKT2的细胞球凋亡率较未转染MCS及转染空载体的MCS升高。MTT法示瞬时转染shRNA-AKT2的细胞球顺铂对细胞抑制率较未转染MCS及转染空载体的MCS升高。结论:干扰AKT2可降低p27的表达,从而逆转卵巢癌对顺铂的化疗耐药。
- 项涛夏曦卢运萍马丁
- 关键词：卵巢肿瘤小分子干扰P27
- 三位点短发卡状RNA在提高RNA干扰效率中的作用被引量：6
- 2008年
- 背景与目的:shRNA技术是近来发展的热点技术之一,但普遍采用的单位点shRNA干扰载体效果并不理想。本研究探讨三位点短发卡状RNA在提高RNA干扰效率中的作用。方法:构建外源基因DsRed全长载体转染HEK293细胞。针对报告基因DsRed设计4个干扰载体,一个含有3段shRNA,另外3个分别含有此3段中1段shRNA。转染293/DsRed,荧光显微镜观察基因DsRed。应用实时定量PCR(Real-timePCR)和流式细胞仪(FACS)检测4个载体对DsRed基因在mRNA及蛋白水平干扰效应。结果:4个载体对靶基因DsRed在mRNA及蛋白水平均有干扰效应,且含有3段shRNA载体对DsRed基因干扰效率为(89±16)%,显著高于3个只含有1段shRNA载体[(50±23)%,(52±15)%,(55±27)%],差异有显著性(P<0.05)。结论:三位点shRNA干扰载体可以提高对靶基因的干扰效率。
- 翁艳洁翁丹卉夏曦宋晓红卢运萍王世宣马丁王常玉
- 关键词：RNA干扰外源基因DSRED短发卡状RNA
- 逆转卵巢癌化疗耐药新靶点——胞浆P21
- 目的研究细胞周期依赖性激酶阻滞剂 P21亚细胞含量与卵巢癌化疗耐药之间关系。方法以卵巢癌配对细胞株 C13K与 OV2008为模型,激光共聚焦显微镜(Confocol Microscope)判断细胞内靶分子定位;RT-P...
- 夏曦吴鹏邢辉翁丹卉卢运萍马丁
- 文献传递
- Snail对宫颈癌细胞侵袭转移的影响被引量：9
- 2009年
- 目的研究Snail与宫颈癌侵袭转移间的关系,并探讨其分子机制。方法构建正义全长Snail真核表达载体并转染宫颈癌细胞系HeLa、SiHa。采用Western blot方法分析相关基因表达,细胞伤痕愈合实验,Trans well模型穿膜细胞计数检测细胞侵袭转移能力。结果①在转染pEGFPC1/Snail的宫颈癌细胞株HeLa、SiHa中E-cadherin表达明显下调,Snail和Vimentin则表达上调(P<0.05)。②宫颈癌细胞系HeLa、SiHa转染正义全长Snail真核表达载体,12h细胞伤痕愈合能力显著提高(P<0.05);转染pEGFPC1/Snail后,HeLa、SiHa细胞12h穿膜细胞数明显增多(P<0.05)。Snail过表达可显著促进宫颈癌细胞株HeLa、SiHa的侵袭转移潜能。结论转录因子Snail促进宫颈癌上皮细胞间质化转变(EMT),并提高其侵袭转移能力。
- 纪腾夏曦胡问成方勇王世宣周剑峰卢运萍马丁
- 关键词：SNAIL宫颈癌上皮细胞钙黏蛋白
