张翠萍
- 作品数:107 被引量:249H指数:9
- 供职机构:中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程更多>>
- 低氧对巨噬细胞分泌TNF-α和IL-6的影响及其机制
- 目的:观察低氧对巨噬细胞(M)前炎症因子TNF-α和IL-6分泌的影响及其机制。方法:收集分离小鼠腹腔M,建立M的低氧(1%O2,5%CO2)培养模型,并用非特异性酯酶染色法进行鉴定;ELISA法检测上清液中TNF-α和...
- 张翠萍谢印芝陈鹏洪欣聂鸿靖董宏彬尹昭云
- 关键词:低氧巨噬细胞核因子-KAPPAB肿瘤坏死因子-Α白介素-6
- 文献传递
- 低氧促进神经干细胞向多巴胺能神经元分化被引量:5
- 2007年
- 神经干细胞(neural stem cells,NSCs)作为具有多向分化潜能的神经前体细胞,被广泛应用于细胞移植等研究,而低氧不但调节干细胞的体外增殖,在干细胞分化中也具有重要的作用。本文着重探讨了低氧对NSCs分化的调节作用。采用Wistar孕大鼠(E13.5d),分离胚胎中脑NSCs,加入无血清DMEM/F12培养液(含20ng/mLEGF、20ng/mLbFGF、1%N2和B27),3~5d后传代,细胞培养至第三代进行诱导分化,分别在低氧(3%O2)和常氧(20%O2)条件下诱导分化3d,然后在常氧条件下分化成熟5-7d(DMEM/F12含1%FBS、N2和B27)后进行检测。Nestin、NeuN以及TH免疫组织化学鉴定NSCs;流式细胞术分析测定NSCs向TH阳性神经元方向的分化;高效液相色谱测定细胞培养上清液中多巴胺(dopamine,DA)含量。结果显示,分离培养的NSCs均为nestin阳性细胞;低氧呵明显促进NSCs向神经元方向的分化;TH阳性神经元比例在常氧和低氧组分别为(10.25±1.03)%和(19.88±1.44)%。NSCs诱导分化7d后,低氧组细胞培养上清液中DA浓度明显增加,约为常氧组的2倍(P<0.05,n=8)。上述结果表明,3%低氧可促进NSCs向神经元方向,特别是向DA能神经元方向分化。这为NSCs应用于临床治疗帕金森病提供了基础。
- 赵彤张翠萍朱玲玲靳冰黄欣范明
- 关键词:神经干细胞低氧分化多巴胺能神经元
- 去分化表皮干细胞的来源鉴定和分析
- 目的利用染色体特异性分析鉴定去分化表皮干细胞的来源。方法包皮皮片去除皮下脂肪后,中性蛋白酶消化过夜,分离表皮和真皮。分离的表皮片用Ⅳ型胶原反复粘贴并冲洗去除表皮干细胞。处理后的表皮片经免疫组化鉴定后移植到雌性BALB/c...
- 张翠萍付小兵孙同柱
- 人骨髓间充质干细胞转分化为汗腺样细胞的DNA甲基化调控机制
- 目的:筛选与人骨髓间充质干细胞(MSCs)转分化为汗腺样细胞过程密切相关基因启动子位点,探索DNA甲基化调控MSCs的转分化机制.方法:热休克汗腺诱导MSCs共培养10d,免疫组化检测MSCs转分化后KRT19和CEA标...
- 赵焕军赵宏良张翠萍付小兵
- 瘢痕组织成纤维细胞重编成iPS的实验研究
- 目的通过逆转录病毒携带外源性基因Oct3/4、Sox2、Klf4及c-Myc多潜能转录因子转染宿主细胞,多种正常成体细胞能够进行重编程,形成在形态学、表观遗传学、全基因表达谱以及细胞分化潜能方面与胚胎干细胞高度相似的iP...
- 李美蓉付小兵张翠萍
- DNA甲基化对干细胞分化的影响及其作用方式被引量:5
- 2013年
- 在生物不断进化的过程中,哺乳动物的组织表型高度分化,功能更加特异,其潜在的多能性也被局限化[1].干细胞作为具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的细胞群体,因其多潜能分化特性在组织再生与修复领域中备受关注[2,3].表观遗传学是指在DNA序列不变的前提下,编码基因顺序改变对基因表达和细胞表型所产生的影响,它主要包括DNA甲基化(methylation)、组蛋白修饰、基因印记以及非编码RNA等内容.DNA甲基化 在干细胞分化调控、维持细胞正常功能、细胞发育、X染色体失活以及基因印记等过程中起着重要作用[4,5].本文主要就DNA甲基化对于干细胞分化的调控作用进行综述,包括DNA甲基化对干细胞分化潜能的影响,DNA甲基化对基因表达的调节方式与调控机制等,为干细胞生物学与再生医学研究提供一定的参考.
- 赵换军赵洪良张翠萍付小兵
- 关键词:DNA甲基化干细胞分化多向分化潜能细胞分化调控干细胞生物学X染色体失活
- 去分化来源表皮干细胞的分离及表型特征观察
- 目的分离培养去分化来源的表皮干细胞(dedifferentiation-derived epidermal stem cells,DDESCs),并进一步观察其表型特征。方法包皮皮片去除皮下脂肪后,中性蛋白酶消化过夜,分...
- 张翠萍付小兵孙同柱
- 文献传递
- 高钙培养对表皮角质细胞形态和生长特点及角蛋白表达的影响被引量:1
- 2008年
- 目的:观察高钙培养后表皮角质细胞的形态、生长特点及角蛋白表达的变化,进一步探讨钙在促进表皮角质细胞分化过程中的重要作用。方法:表皮角质细胞分别在低钙(0.05mmol/L)和高钙(1.2mmol/L)环境条件下培养1-2d,光镜下观察细胞的形态和生长特点,并采用免疫组织化学方法检测表皮角质细胞中角蛋白10(K10)、K14和K19的表达水平。结果:低钙培养的表皮角质细胞散在生长,分布均匀,细胞间隙较大,胞膜圆滑,边界清楚。高钙培养后,细胞胞体变得扁平,细胞间隙消失,并且细胞出现明显的成簇生长趋势。在正常培养即低钙培养条件下,K10和K19阳性细胞比例较少,所培养的细胞几乎全为K14阳性细胞;在高钙培养条件下,K10和K19阳性细胞比例明显增加,而K14的表达没有明显变化。结论:高钙培养能改变表皮角质细胞的形态和生长特点并提高细胞内角蛋白的表达水平,从而促进表皮角质细胞的分化成熟。
- 张翠萍付小兵李淑云孙同柱
- 关键词:钙分化
- Wnt/β-catenin信号通路活化对人表皮细胞表型变化的影响被引量:6
- 2010年
- 目的探讨Wnt/β-catenin信号通路活化对人表皮细胞表型变化的影响。方法差速贴壁法分离人成熟表皮细胞。并将细胞分为对照组和诱导组,诱导组又分为氯化锂(LiCl,20mmol/L)诱导组和GSK-3β抑制子(15μmol/L)诱导组,诱导6d后观察细胞的形态变化,并采用Westernblot检测表皮细胞内β-catenin的表达水平,免疫组织化学法检测表皮细胞表面标志性蛋白CK10、CK14、CK19和β1整合素的表达变化。结果人表皮细胞内β-catenin的表达在被LiCl(2.15±0.54)和GSK-3β(2.58±0.65)抑制子诱导后分别比对照组(0.71±0.23)增加了2倍和2.5倍(P<0.01)。而且诱导后细胞体积变小变圆,细胞核、细胞质比例变大。免疫组织化学检测结果表明,诱导前表皮细胞高表达CK10,部分细胞表达CK14,CK19和β1整合素表达阴性;诱导后已无CK10阳性细胞存在,有部分CK14阳性细胞,而且CK19和β1整合素的表达呈强阳性。结论 Wnt/β-catenin通路活化可引起人成熟表皮细胞的去分化,即Wnt/β-catenin通路可能是调控人表皮细胞去分化的关键环节。
- 张翠萍陈鹏付小兵孙同柱
- 关键词:表皮细胞表型特征去分化
- 不同来源的表皮干细胞促进皮肤创面愈合的研究被引量:7
- 2011年
- 目的 观察表皮干细胞(ESCs)及去分化来源的表皮干细胞(DESCs)对皮肤创面愈合的促进作用及其异同.方法 由新鲜人包皮标本以贴壁法分离ESCs,随机分为3组,第1组作为原代ESCs:第2组传代培养至第6代时可见细胞成熟呈表皮细胞(ECs)形态,由原来的大克隆生长的小圆细胞形态变为较为肥大的不规则型细胞,无法形成克隆样增殖;其细胞表型也由β1整合素、CK19强阳性、CK10阴性变为β1整合素、CK19阴性,而CK10强阳性,予以100μg/L的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)培养48 h进行去分化诱导,48 h后ECs周边开始出现小圆细胞并呈克隆样生长,β1整合素、CK19、CK10等细胞表型也趋于与ESCs一致,即DESCs;第3组传代培养至第6代获得ECs.3组细胞皆以D-Hanks液重悬调其终质量浓度为2×106个/ml.将12只裸鼠每只背部左右各制备1个直径6 mm创面,共24个创面.将全部创面随机等分为4组,每组6个,分别以ESCs、DESCs、Ecs及生理盐水(NS)各0.2 ml进行创面注射.于术后0、3、7 d测量创面面积进行统计学分析,并于术后7 d行创面取材苏木素-伊红(HE)染色.结果 ESCs组与DESCs组在术后3 d时创面面积分别为(11.758±2.544)、(11.515±1.351)mm2,7 d时创面面积分别为(1.795±1.063)、(2.043±1.138)mm2,修复速度要明显快于ECs组与NS组[3 d时创面面积分别为(17.857±1.722)、(16.192±2.256)mm2,7 d时创面面积分别为(5.367±1.219)、(5.070±1.357)mm2,P<0.01];而ESCs与DESCs组之间创面修复速度比较差异无统计学意义(P>0.05);ECs组与NS组之间比较差异无统计学意义(P>0.05).HE染色提示ESCs组与DESCs组的创面愈合质量优于ECs组与NS组,可见有皮肤附属腺的再生且纤维瘢痕组织较少.结论 ESCs与DESCs皆有促进创面愈合的作用,相互之间无明显差异.
- 费阳张翠萍付小兵
- 关键词:表皮干细胞去分化创面愈合