徐绍钢
- 作品数：19 被引量：72H指数：5
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- K_(ATP)通道Kir6.2亚基点突变体Kir6.2AAA在大鼠心肌细胞中的表达
- 2014年
- 目的制备含K ATP通道亚基点突变的重组腺病毒,并将其在大鼠心肌细胞中表达。方法针对Kir6.2位点的引物,利用Overlap PCR的方法定点突变Kir6.2的GFG氨基酸变成AAA,并将其克隆到pShuttle载体中进行序列分析,经PmeⅠ线性化、连接到腺病毒表达载体pAdEasy-1中,将pAdEasy-1包装进脂质体、转染入大鼠原代心肌细胞,并利用反转录PCR和Western blot法进行检测。结果成功制备了携带大鼠Kir6.2AAA及EGFP基因的重组腺病毒,病毒的滴度为2.64×1011VP/mL。荧光显微镜下可见Kir6.2AAA重组体腺病毒感染后的大鼠心肌细胞表达EGFP而发出绿色荧光,反转录PCR证实重组腺病毒载体Ad-Kir6.2AAA感染的心肌细胞中Kir6.2AAA的表达显著上调,Western blot法证明Kir6.2AAA在大鼠心肌细胞中过表达。结论成功构建了携带EGFP基因的Kir6.2AAA重组腺病毒载体并将其在大鼠心肌细胞中正确表达。
- 张晓晖魏春山林坚熊益群徐超英刘心亮穆桂萍徐绍钢刘文赫
- 关键词：点突变腺病毒载体
- 补肾清透方治疗慢性乙肝e抗原阳性患者外周血T淋巴细胞亚群的变化被引量：4
- 2012年
- 目的观察补肾清透方治疗慢性乙型肝炎(CHB)e抗原阳性患者外周血中HBV载量和T淋巴细胞亚群的变化。方法60例慢性乙型肝炎e抗原阳性患者被随机分成CHB治疗组和CHB对照组,每组30例,CHB治疗组接受补肾清透方治疗,疗程48周,CHB对照组不接受药物治疗;同时选择30例健康人作为健康人对照组。第48周时CHB患者抽血检查T淋巴细胞亚群和HBV DNA载量以及肝功能,健康人对照组检测T淋巴细胞亚群。结果CHB对照组与健康人对照组相比,CD4+、CD4+/CD8+显著下降,CD8+显著升高(P<0.01),CD3+变化不明显(P>0.05);CHB治疗组与CHB对照组比较,CD4+、CD4+/CD8+显著升高,CD8+,HBV载量显著下降(P<0.01),CD3+变化不明显(P>0.05)。结论补肾清透方能抑制CHB e抗原阳性患者HBVDNA复制,提高机体的免疫功能。
- 刘心亮熊益群周大桥童光东贺劲松徐绍钢穆桂萍刘文赫
- 关键词：E抗原
- 慢性乙型肝炎肝郁脾虚证生物信息学差异研究被引量：1
- 2012年
- 目的:应用基因芯片技术研究慢性乙型肝炎肝郁脾虚证与它证的生物信息学差异。方法:应用Affymetrix Gene Chip人类全基因组芯片,分析了9例、3证型慢性乙型肝炎患者(肝肾阴虚型、湿热中阻型、肝郁脾虚型各3例)基因表达谱。通过应用Scanner 3000 7G 4C扫描仪对芯片进行扫描和信号值转换,获得各个中医证型之间的相对表达比值。结果:在检测的全部54676个基因中,中医证型基因表达存在着明显的差异,肝郁脾虚型与肝肾阴虚型、肝郁脾虚型与湿热中阻型比较,表达差异基因均占全基因的0.21%。结论:慢性乙型肝炎在肝郁脾虚证的基因层面上有着异常表达,这可能是临床出现同病异证的生物信息学基础,为其有效预防和治疗提供新的思路。
- 熊益群姚小萍周大桥马健高辉刘心亮贺劲松鲁艳平穆桂萍徐绍钢
- 关键词：肝郁脾虚证基因表达基因芯片技术辨证规范化
- 烧伤方对实验性烫伤大鼠的实验研究被引量：4
- 2012年
- 目的探讨烧伤方外敷治疗实验性烫伤大鼠的作用机理。方法选择60只大鼠随机分为模型组、烧伤方组、京万红组,每组20只。各组用80℃恒温热水对大鼠造成Ⅱ度烫伤模型,烧伤方组和京万红组大鼠分别采用烧伤方和京万红软膏外敷烫伤皮肤,每日4次,每次约2 mL,连续7 d;观察其对烫伤创面愈合、水肿抑制、中枢调控镇痛(脑啡肽)以及机体抗氧化防卫系统超氧化物歧化酶的变化。结果与模型组比较,烧伤方组和京万红组在烫伤创面愈合、水肿抑制、中枢调控镇痛以及机体抗氧化方面均有显著疗效;并且烧伤方组疗效优于京万红组。结论烧伤方能促进烫伤创面愈合、抑制水肿、对中枢调控发挥镇痛作用,能提高机体抗氧化防卫系统能力。
- 刘心亮曾小粤温志鹏熊益群王重阳徐绍钢穆桂萍
- 关键词：烧伤方烫伤创面愈合脑啡肽超氧化物歧化酶
- 青芪散对小鼠淋巴细胞亚群及白细胞介素2的影响被引量：6
- 2005年
- [目的]观察青芪散对免疫损伤小鼠的免疫调节作用。[方法]中药复方制剂青芪散小、中、大3个剂量治疗冻干卡介苗(BCG)加脂多糖(LPS)免疫性肝损伤小鼠,与迈普新(Tα1)对照,观察其对淋巴细胞亚群、白细胞介素2(IL2)及肝脏病理的影响。[结果]青芪散中剂量组显著降低CD8+,提高CD3+、CD4+及CD4+/CD8+比值,与Tα1组比较差异有统计学意义(P<0.05);对肝组织病理学影响,中剂量组与Tα1组比较稍优,但无统计学意义(P>0.05)。[结论]青芪散有明确的免疫调节作用。
- 熊益群周大桥姚小萍高辉吴国庆贺劲松李之清汪厚祥刘心亮徐绍钢
- 关键词：淋巴细胞亚群白细胞介素2
- 补肾清透方治疗慢性乙型肝炎患者血清HBV载量及标志物的变化研究被引量：2
- 2012年
- 目的探讨补肾清透方对慢性乙型肝炎（CHB）患者血清HBVDNA载量、乙肝病毒标志物（HBV-M）和肝功能的关系。方法60例慢性乙型肝炎患者被随机分成治疗组和对照组，每组30例，治疗组接受补肾清透方治疗，疗程48周，对照组不接受药物治疗。两组分别在开始和第48周时抽血检查HBVDNA，HBV—M和肝功能。结果治疗组治疗后病毒标志物HBVDNA，HBsAg和HBeAg阴转率分别为23．3％（7／30），16．7％（5／30）和36．7％（11／30），HBeAb阳转率为16．7％（5／30），与治疗前比较，差异有统计学意义（P〈0．01或0．05）；肝功能指标ALT，AsT和GGT下降，A／G升高，差异有统计学显著性意义（P〈0．01或0．05）。对照组检测上述指标，结果差异均无统计学显著性意义（P〉0．05）。结论补肾清透方能降低乙型肝炎病毒载量，提高乙肝病毒标志物转化率，改善肝功能。
- 刘心亮熊益群周大桥童光东贺劲松徐绍钢穆桂萍刘文赫
- 关键词：慢性乙型肝炎病毒载量乙肝病毒标志物
- 原花青素B_2对LPS诱导的心肌细胞凋亡的保护作用被引量：12
- 2015年
- 目的研究原花青素B_2(procyanidin B_2,PCB_2)对脂多糖(lipopolysacchride,LPS)诱导的心肌细胞凋亡的保护作用及其机制。方法采用原代培养新生大鼠心肌细胞,LPS诱导心肌细胞损伤模型,PCB_2低、中、高剂量组分别用含有6.25、12.5、25.0μmol·L^(-1)PCB_2的DMEM培养基持续培养24h。采用四唑盐(MTT)比色法测定心肌细胞存活率,光泽精化学发光法测定心肌细胞NOX的活性,Western blot法分析心肌NADPH氧化酶p47^(phox)亚基的表达,TUNEL法检测细胞凋亡,流式细胞术测定心肌细胞ROS的含量。结果 LPS诱导的细胞损伤组与正常对照组(Control)比较,心肌细胞活力明显降低(P<0.01),而心肌细胞NOX活性、p47^(phox)亚基的表达、凋亡细胞数量以及ROS含量均明显增加(P<0.01)。PCB_2处理后,低、中、高剂量组细胞活力均明显升高,心肌细胞NOX活性、p47^(phox)亚基的表达、凋亡细胞数量以及ROS含量均明显下降,且具有剂量依赖性(P<0.01)。结论 PCB_2通过抑制NADPH氧化酶激活、p47^(phox)的表达以及活性氧的产生发挥对LPS诱导的心肌细胞凋亡的保护作用。
- 张晓晖曾繁典孙智达杨卓欣熊益群徐超英刘心亮林坚穆桂萍徐绍钢刘文赫
- 关键词：脂多糖心肌细胞凋亡NADPH氧化酶活性氧自由基
- 慢性乙型肝炎中医证型基因表达谱研究
- 熊益群周大桥高辉刘心亮贺劲松徐绍钢
- 荔枝壳原花青素对脓毒症大鼠心肌细胞凋亡的作用及其机制研究被引量：9
- 2015年
- 目的研究荔枝壳原花青素(Procyanidins extracted from the litchi pericarp,LPPC)对脓毒症大鼠心肌细胞凋亡的作用及其机制。方法实验大鼠随机分为5组,连续灌胃两周:空白对照组(control)和脓毒症模型组(LPS)每天给予蒸馏水灌胃1次;LPPC低、中、高剂量组分别每天给予新鲜配制的LPPC 50,100,200 mg·kg-1·d-1灌胃1次。给药结束后,建立脓毒症动物模型。即除空白对照组外所有大鼠腹腔内注射LPS(lipopolysacchride,10mg·kg-1,ip)诱导急性脓毒症模型。4 h后收集大鼠血清,检测血清同工酶(CKMB)、乳酸脱氢酶(LDH)和谷草转氨酶(AST/GOT)的活力。取大鼠心肌组织,测定心肌组织丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量。TUNEL染色观察大鼠心肌细胞凋亡情况。Western blot法检测凋亡相关蛋白Cleaved caspase-3及TNF-α水平。结果与正常对照组(control)比较,脓毒症模型组大鼠血清CK-MB、LDH、AST/GOT以及心肌组织MDA含量均明显升高(P<0.01);同时,心肌组织T-AOC和GSH的活力明显降低(P<0.01);凋亡心肌细胞数量明显增加(P<0.01);Cleaved caspase-3及TNF-α表达水平明显下降(P<0.01)。LPPC预处理明显降低了大鼠血清CK-MB、LDH、AST/GOT以及心肌组织MDA含量;增加了大鼠心肌组织T-AOC和GSH的活力;凋亡心肌细胞数量明显减少;Cleaved caspase-3及TNF-α表达水平明显下降。结论荔枝壳原花青素预处理能够明显减轻脓毒症大鼠心肌细胞凋亡,可能与其抗氧化性损伤作用有关。
- 张晓晖孙智达李书艺曾繁典熊益群徐超英刘心亮林坚穆桂萍徐绍钢刘文赫
- 关键词：脓毒症心肌细胞凋亡
- 青芪散对小鼠淋巴细胞亚群及NK细胞影响的实验研究
- 2006年
- 目的:观察青芪散对免疫损伤小鼠淋巴细胞亚群和自然杀伤细胞(NK细胞)的影响。方法:采用青芪散小、中、大3种剂量治疗免疫性肝损伤小鼠,与迈普新治疗对照,观察其对淋巴细胞亚群、NK细胞及肝脏病理的影响。结果:青芪散中剂量组显著降低CD8+,提高CD3+、CD4+及CD4+/CD8+比值,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);实验各组能提高NK细胞活性,其中中剂量组疗效与对肝组织病理学影响一样,较对照组稍优,但无统计意义(P>0.05)。结论:青芪散对免疫损伤小鼠特异与非特异性免疫机制有积极作用。
- 熊益群周大桥姚小萍高辉吴国庆贺劲松李之清汪厚祥刘心亮徐绍钢
- 关键词：淋巴细胞亚群NK细胞小鼠
