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文华

作品数：1 被引量：3H指数：1
供职机构：北京大学生命科学学院更多>>
发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域：生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白酶
  • 1篇底物
  • 1篇底物专一性
  • 1篇电荷
  • 1篇胰蛋白酶
  • 1篇突变
  • 1篇专一性
  • 1篇面电荷
  • 1篇表面电荷

机构

  • 1篇北京大学

作者

  • 1篇文华
  • 1篇张龙翔
  • 1篇张庭芳

传媒

  • 1篇生物化学杂志

年份

  • 1篇1997
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
表面电荷突变与胰蛋白酶底物专一性的改造被引量：3
1997年
分别利用酶切重组和“３＋１”引物ＰＣＲ定点突变的方法构建了三个胰蛋白酶表面电荷双突变体：Ｒ６２Ｄ＋Ｋ９７Ｅ、Ｒ６２Ｄ＋Ｋ１７５Ｅ和Ｋ９７Ｅ＋Ｋ１７５Ｅ．对三者在Ｅ．ｃｏｌｉＸ－９０菌中的表达产物进行了动力学测定，分别得到了三种双突变体在两种ｐＨ条件下，水解ＴＡＭＥ、ＴＬＭＥ两种底物的动力学数据．结果表明，Ｒ６２Ｄ＋Ｋ１７５Ｅ和Ｋ９７Ｅ＋Ｋ１７５Ｅ在ｐＨ６．８５时，对两种底物的催化活性与野生型相比下降了２～３个数量级，当ｐＨ升高至８．８５时，它们的活性基本丧失；双突变体Ｒ６２Ｄ＋Ｋ９７Ｅ虽然催化活性也有所降低，但随着ｐＨ的升高，它对Ｌｙｓ底物的特异性（选择性系数２５倍于Ａｒｇ底物）转变为对Ａｒｇ底物略高的特异性，基本符合分子设计．实验结果还表明，各种双突变体催化活性的降低主要是由于酶和底物的亲和力降低引起的．
文华张庭芳张龙翔
关键词：底物专一性表面电荷
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共1页<1>
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