朱尚玲
- 作品数：17 被引量：38H指数：4
- 供职机构：中山大学附属第六医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 类风湿关节炎滑膜血管内皮细胞中Smoothened的表达及其意义被引量：4
- 2013年
- 目的:初步观察Sonic Hedgehog信号通路分子Smoothened(Smo)在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜血管内皮细胞的表达及其生物学意义。方法:收集4例病情中度活动的RA患者的滑膜组织,同时收集4例外伤或半月板损伤(无关节炎)者滑膜组织作为对照组,免疫组化检测滑膜组织Smo蛋白表达情况。采用人脐静脉内皮细胞系EA.hy926作为滑膜血管内皮细胞的模型,予不同浓度肿瘤坏死因子α(TNF-α)处理,West-ern blotting检测Smo蛋白表达;采用RNAi技术转染体外合成的特异性Smo-siRNA,应用Western blotting检测沉默效果;转染siRNA 24 h后,经TNF-α/放线菌素D(actinomycin D,ActD)诱导细胞凋亡,CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:RA患者滑膜组织Smo表达高于对照组,以血管内皮细胞表达尤为明显。EA.hy926细胞经TNF-α刺激后,Smo蛋白表达上调(P<0.05)。RNA干扰EA.hy926细胞Smo表达后,细胞存活率为(24.30±0.45)%,低于阴性对照组的(36.86±0.62)%(P<0.05),细胞凋亡率为(48.00±1.96)%,高于阴性对照组的(31.70±0.82)%(P<0.05)。结论:Smo可能参与了RA患者滑膜组织血管内皮细胞凋亡的调控。
- 朱尚玲彭蔚湘罗敏琪王明霞林灼锋黄建林
- 关键词：类风湿SMOOTHENEDRNA干扰内皮细胞
- Sonic Hedgehog信号通路对内皮细胞凋亡影响的初步研究被引量：1
- 2013年
- 目的初步探讨类风湿关节炎（RA）滑膜组织血管内皮细胞Smo蛋白的表达，并观察肿瘤坏死因子（TNF）-α作用于人脐静脉内皮细胞系EA．hy926细胞后SonicHedgehog（Shh）信号通路相关分子的表达，及特异性抑制Smo对细胞凋亡的影响。方法收集4例病情中度活动的RA患者的滑膜组织，同时收集4例外伤或半月板损伤（无关节炎）者滑膜组织作为对照组，免疫组织化学法检测滑膜组织血管内皮细胞Smo蛋白表达情况。予不同浓度TNF-α或联合不同浓度环巴胺处理EA．hy926细胞，实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测Shh、Ptchl、Smo、GlilmRNA表达。予不同浓度环巴胺处理EA．hy926细胞，加入TNF-α＋放线菌素D（ActD）诱导细胞凋亡，采用细胞增殖与毒性试剂盒（CCK-8）检测细胞存活率，流式细胞术检测细胞凋亡情况。两样本均数比较采用t检验，多个样本均数比较采用单因素方差分析。结果RA患者滑膜血管内皮细胞Smo阳性表达率为（81±23）％，高于对照组阳性表达率（20±17）％（P〈0．05）。EA．hy926细胞经TNF-α刺激后，Shh、SmomRNA表达上调（P〈0．05），PtchlmRNA表达无明显变化（P〉0．05），GlilmRNA表达下调（P（0．05）。TNF．n与环巴胺共同作用后，Shh、Smo和GlilmRNA表达下调（P〈O．05）。不同浓度环巴胺（分别为2,4、8μmol／L）作用后的细胞存活率分别为（57±6）％、（44±8）％、（32±5）％，低于TNF-α ActD组细胞存活率（64±6）％（P〈0．05），细胞凋亡率分别为（12．4±3．3）％、（14．5±2．7）％、（15．7±2．4）％，高于TNF-αActD组细胞凋亡率（7．1±1．3）％（P〈0．05）。结论Shh信号通路在RA患者滑膜组织血管内皮细胞中存在激活。特异性抑制Shh信号通路，可以促进内皮细胞凋亡。Shh信号通路可能参与TNF-α作用于内皮细胞后的抗凋亡调控机制。
- 朱尚玲黄建林王明霞彭蔚湘林灼锋古洁若
- 关键词：内皮细胞细胞凋亡HEDGEHOG通路
- 类风湿关节炎患者骨质疏松及其相关因素的初步调查被引量：8
- 2011年
- 目的探讨类风湿关节炎(RA)患者中骨质疏松(OP)的发生情况及其相关危险因素。方法采用GE Insight/Achilles express高频率声波(超声波)检测右跟骨的骨质状态,测量90例RA患者和80名年龄、性别基本匹配的健康志愿者的跟骨骨密度(BMD),按WHO确定的诊断标准将RA患者和正常受试者各分为3组,即骨量正常、骨量减少和骨质疏松组。采用问卷形式调查患者的性别、年龄、体重、身高、吸烟史、钙剂摄入、骨折家族史、RA病程及糖皮质激素应用等因素,分析其与OP的相关风险。结果 RA患者骨量正常、骨量减少和骨质疏松组的构成比与对照组相比较差异有统计学意义(P<0.05)。提示RA患者中发生OP的概率较对照组发生更大。在年龄、性别无明显差异的情况下,RA病程、吸烟、激素、骨折家族史是增加OP的危险因素。多因素Logistic分析得到的回归模型:RA伴发骨质疏松=-0.530+0.164×病程+3.304×吸烟+1.783×骨折家族史。结论 RA患者较健康志愿者更易发生骨量减少和骨质疏松。RA患者BMD的降低和OP的发生是多因素的,其中RA病程是RA患者发生OP的独立危险因素,早期诊断与治疗对预防RA患者发生OP具有重要意义。
- 王明霞黄建林罗敏琪巫世瑶朱尚玲彭蔚湘古洁若
- 关键词：骨密度骨质疏松
- 英夫利西单抗治疗类风湿关节炎病情缓解停药后复发再治疗1例报告
- 2012年
- 患者女，58岁，因“反复多关节肿痛3年，加重2个月”于2010—03—10入院。患者于3年前出现双腕关节、掌指关节和近端指间关节、膝关节肿痛，当地诊为类风湿关节炎（RA），长期服用中药及“特效药丸”治疗，关节症状时好时坏。人院前2个月关节肿痛加重，双膝关节肿痛明显。无发热和皮疹，无雷诺现象，无口眼干燥症状。查体：血压正常。轻度满月脸，跛行。双腕关节肿和压痛、活动受限，以右腕为重；双侧掌指关节、近端指间关节轻度肿和压痛；双膝关节肿胀、压痛、灼热，浮髌征阳性。
- 朱尚玲彭蔚湘黄建林
- 关键词：英夫利西单抗关节炎类风湿生物制剂
- Sonic Hedgehog通路特异性抑镧剂对内皮细胞凋亡的影响
- 朱尚玲黄建林王明霞彭蔚湘古洁若
- 类风湿关节炎患者骨质疏松危险因素分析被引量：8
- 2017年
- 目的探讨类风湿关节炎(RA)患者骨质疏松(OP)的发生率及相关危险因素。方法选取RA患者121例,采用双能X线骨密度仪测定其正位腰椎L_2~L_4、股骨颈及全髋的骨密度,按WHO诊断标准分为OP组和非OP组。同时收集患者性别、年龄、体重、身高、吸烟史、饮酒史、摄入钙剂、摄入活性维生素D3、骨折病史、RA病程、糖皮质激素应用、生物制剂应用、C反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)、类风湿因子(RF)、抗CCP抗体等资料,分析其与OP的相关风险。结果 121例RA患者中,男24例,女97例(其中绝经前25例,绝经后72例),年龄(56.31±13.48)岁。121例RA患者OP比例为49.59%。Logistic回归分析显示高龄、病程长与OP的危险性升高相关,每天钙剂摄入超过600 mg、高BMI与OP的危险性降低相关。女性RA患者绝经与OP危险性升高相关。结论高龄、病程长可能是RA患者发生OP的危险因素,高BMI、每天补充足量的钙剂可能是保护因素。
- 石一鸣朱尚玲冯晓雪刘芳黄建林
- 关键词：骨质疏松类风湿关节炎
- 长链非编码核仁小分子RNA宿主基因1对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的影响
- 2020年
- 目的 初步探讨长链非编码核仁小分子RNA宿主基因1(SNHG1)对RA-成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖的影响及可能的机制.方法 组织块培养法培养RA和创伤患者FLS,用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测二者SNHG1的表达情况;在RA-FLS中,用小干扰RNA(siRNA)沉默SNHG1表达后,CCK-8法检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞周期分布,蛋白质印迹法检测周期蛋白(cyclin)D1的表达情况;2组样本比较用独立样本t检验,多组样本间比较采用单因素方差分析.结果 与创伤患者FLS相比,RA-FLS中SNHG1表达上调[(2.13±0.55)与(1.00±0.01)](t=-5.87,P=0.004);在RA-FLS中,沉默SNHG1表达后,与阴性对照相比,SNHG1-siRNA处理组细胞增殖活力下调[(0.930±0.033)与(0.759±0.027)](t=6.879,P=0.002),G2/M+S期细胞所占比例下调[(28.2±1.5)%与(9.7±2.6)%](t=10.715,P<0.01),cyclinD1蛋白表达下调(t=6.168,P=0.004).结论 RA患者滑膜细胞中SNHG1的表达增高,SNHG1可能通过影响cyclinD1蛋白表达参与FLS增殖调控,从而促进滑膜增生.
- 刘芳冯晓雪朱尚玲林朗黄建林
- 关键词：类风湿长链非编码RNA成纤维样滑膜细胞
- 成纤维细胞生长因子4对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的影响被引量：4
- 2018年
- 目的观察RA患者血清中成纤维细胞生长因子4(FGF4)的表达情况,并初步探讨FGF4对RA成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖的影响及可能机制。方法①收集20例病情活动RA患者及20名与其年龄和性别相匹配的健康对照者的血清标本,蛋白芯片法检测血清FGF4的表达水平。②收集5例病情活动RA患者的滑膜组织,组织块法培养RA-FLS。采用重组人FGF4蛋白(rhFGF4)处理RA-FLS,应用CCK-8法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞周期分布,蛋白质印迹法检测cyclinD1、phospho-Akt(p-Akt)及phospho-p38(p-p38)蛋白表达水平。2组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析或Kruskal-Wallis检验,两两比较采用Dunnett′s t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果①活动性RA患者血清中FGF4表达水平高于健康对照组(P=0.041)。②经不同浓度rhFGF4(分别为12.5、25、50、100ng/ml)处理后,RA-FLS的细胞增殖率分别为:(121±8)%、(126±12)%、(129±12)%、(134±14)%,均高于对照组(100±0)%(P12.5=0.049,P25=0.009,P50=0.004,P100=0.001),G2/M+S期细胞所占的比例分别为:(12.6±3.6)%、(15.3±4.5)%、(17.1±5.1)%、(19.6±4.1)%,除12.5ng/ml组外,其余各组G2/M+S期细胞所占的比例均高于对照组(5.4±2.4)%(P12.5=0.159,P25=0.042,P50=0.018,P100=0.005)。与对照组相比,50ng/ml组、100ng/ml组的cyclinD1蛋白表达上调(P50=0.035,P100=0.027)。浓度为50ng/ml的rhFGF4可短时间内引起p-Akt和p-p38蛋白表达增加(P<0.01)。结论RA患者血清中FGF4表达增高,FGF4可能通过PI3K/Akt通路及p38-MAPK通路参与了RA-FLS增殖的调控,从而促进滑膜增生。
- 冯晓雪朱尚玲刘芳陈应镝何石萍黄建林
- 关键词：关节炎类风湿成纤维样滑膜细胞细胞增殖
- 类风湿关节炎患者外周血单个核细胞Sonic Hedgehog信号通路表达的初步研究被引量：5
- 2012年
- 目的:初步探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMCs)和滑膜组织中SonicHedge-hog(Shh)信号通路相关因子表达及意义。方法:收集符合1987年美国风湿病学会(ACR)RA分类标准、28个关节疾病活动度评分(DAS28)≥3.2,病情活动RA患者(35例)及年龄、性别相匹配的健康志愿者(35例)外周血2 mL,分离PBMCs,提取总RNA,采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测Shh信号通路中信号肽Shh、膜受体Ptch1和核转录因子Gli1 mRNA的表达。收集10例病情中度活动(DAS28≥3.2)RA患者的滑膜组织,同时收集5例外伤或半月板损伤(无关节炎)者滑膜组织作为对照组,免疫组化检测Shh、Ptch1和Gli1的蛋白表达情况。结果:RA患者PBMCs中Shh和Gli1 mRNA的相对表达量分别为1.36±1.48和1.15±0.68,对照组上述信号分子的mRNA表达量分别为0.47±0.25和0.49±0.05,2组差异有统计学意义(P<0.05),Ptch1 mRNA表达在2组间的差异无统计学意义(P>0.05);免疫组化示Shh和Gli1蛋白表达的阳性细胞百分率均高于对照组(P<0.05),Ptch1蛋白表达阳性细胞百分率2组无显著差异(P>0.05)。结论:RA患者PBMCs与滑膜组织中检测到Shh通路相关信号分子Shh和Gli1的表达上调,提示RA患者中可能存在Shh信号通路的激活,其在RA发病机制中的作用值得进一步研究。
- 王明霞黄建林朱尚玲彭蔚湘谢宝钊林灼锋古洁若
- 关键词：HEDGEHOG通路单核细胞滑膜
- 广东汉族类风湿关节炎患者肿瘤坏死因子α启动子区单核苷酸多态性与肿瘤坏死因子α拮抗剂疗效的关系被引量：7
- 2011年
- 目的探讨广东汉族类风湿关节炎(RA)患者肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因启动子区单核苷酸多态性(SNPs)与TNF-α拮抗剂疗效的关系。方法以100例健康志愿者为对照组,以54倒RA患者为RA组。RA组中24列接受英夫利西单抗3 mg·kg^(-1),分别于wk 0、2、6给药;30例接受阿达木单抗40 mg或80 mg,每2 wk皮下注射1次,疗程12 wk,所有患者继续服用原剂量的甲氯蝶呤(MTX)。记录治疗前和治疗后wk 10(英夫利西单抗)或wk 12(阿达木单抗)的相关临床指标,疾病的活动度用28关节计数的疾病活动评分(DAS28)进行评价,DAS28的变化作为主要临床疗效指标。对TNF-α启动子区约1 300 bp的片段进行直接基因测序,分析RA患者TNF-α基因的基因型与TNF-α拮抗剂临床疗效之间的关系。结果与对照组相比,RA组SNPs位点rs1799724(-857C/T)等位基因T频率较高,差异有显著意义(P<0.05),而rs 1799964(-1031C/T)和rs 1800630(-863A/C)位点在RA组和对照组之间的基因型频率分布未发现显著差异。RA组中,rs 1799724(-857C/T)携带T等位基因的患者较携带C等位基因的患者在接受TNF-α抑制剂治疗后DAS28改善更显著(P<0.05)。结论在广东汉族人群中,TNFα的启动子区的rs 1799724.(-857C/T)可能是RA的一种遗传易感标记;携带-857T的RA患者对TNF-α拮抗剂临床治疗效果优于携带-857C者。
- 谢宝钊黄建林王明霞朱尚玲曹双燕魏秋静古洁若
- 关键词：关节炎类风湿肿瘤坏死因子Α单核苷酸肿瘤坏死因子拮抗剂
