冯晓雪
- 作品数：6 被引量：15H指数：2
- 供职机构：中山大学附属第六医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省社会发展领域科技计划项目广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 长链非编码核仁小分子RNA宿主基因1对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的影响
- 2020年
- 目的 初步探讨长链非编码核仁小分子RNA宿主基因1(SNHG1)对RA-成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖的影响及可能的机制.方法 组织块培养法培养RA和创伤患者FLS,用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测二者SNHG1的表达情况;在RA-FLS中,用小干扰RNA(siRNA)沉默SNHG1表达后,CCK-8法检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞周期分布,蛋白质印迹法检测周期蛋白(cyclin)D1的表达情况;2组样本比较用独立样本t检验,多组样本间比较采用单因素方差分析.结果 与创伤患者FLS相比,RA-FLS中SNHG1表达上调[(2.13±0.55)与(1.00±0.01)](t=-5.87,P=0.004);在RA-FLS中,沉默SNHG1表达后,与阴性对照相比,SNHG1-siRNA处理组细胞增殖活力下调[(0.930±0.033)与(0.759±0.027)](t=6.879,P=0.002),G2/M+S期细胞所占比例下调[(28.2±1.5)%与(9.7±2.6)%](t=10.715,P<0.01),cyclinD1蛋白表达下调(t=6.168,P=0.004).结论 RA患者滑膜细胞中SNHG1的表达增高,SNHG1可能通过影响cyclinD1蛋白表达参与FLS增殖调控,从而促进滑膜增生.
- 刘芳冯晓雪朱尚玲林朗黄建林
- 关键词：类风湿长链非编码RNA成纤维样滑膜细胞
- 成纤维细胞生长因子4对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的影响被引量：4
- 2018年
- 目的观察RA患者血清中成纤维细胞生长因子4(FGF4)的表达情况,并初步探讨FGF4对RA成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖的影响及可能机制。方法①收集20例病情活动RA患者及20名与其年龄和性别相匹配的健康对照者的血清标本,蛋白芯片法检测血清FGF4的表达水平。②收集5例病情活动RA患者的滑膜组织,组织块法培养RA-FLS。采用重组人FGF4蛋白(rhFGF4)处理RA-FLS,应用CCK-8法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞周期分布,蛋白质印迹法检测cyclinD1、phospho-Akt(p-Akt)及phospho-p38(p-p38)蛋白表达水平。2组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析或Kruskal-Wallis检验,两两比较采用Dunnett′s t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果①活动性RA患者血清中FGF4表达水平高于健康对照组(P=0.041)。②经不同浓度rhFGF4(分别为12.5、25、50、100ng/ml)处理后,RA-FLS的细胞增殖率分别为:(121±8)%、(126±12)%、(129±12)%、(134±14)%,均高于对照组(100±0)%(P12.5=0.049,P25=0.009,P50=0.004,P100=0.001),G2/M+S期细胞所占的比例分别为:(12.6±3.6)%、(15.3±4.5)%、(17.1±5.1)%、(19.6±4.1)%,除12.5ng/ml组外,其余各组G2/M+S期细胞所占的比例均高于对照组(5.4±2.4)%(P12.5=0.159,P25=0.042,P50=0.018,P100=0.005)。与对照组相比,50ng/ml组、100ng/ml组的cyclinD1蛋白表达上调(P50=0.035,P100=0.027)。浓度为50ng/ml的rhFGF4可短时间内引起p-Akt和p-p38蛋白表达增加(P<0.01)。结论RA患者血清中FGF4表达增高,FGF4可能通过PI3K/Akt通路及p38-MAPK通路参与了RA-FLS增殖的调控,从而促进滑膜增生。
- 冯晓雪朱尚玲刘芳陈应镝何石萍黄建林
- 关键词：关节炎类风湿成纤维样滑膜细胞细胞增殖
- 类风湿关节炎患者骨质疏松危险因素分析被引量：8
- 2017年
- 目的探讨类风湿关节炎(RA)患者骨质疏松(OP)的发生率及相关危险因素。方法选取RA患者121例,采用双能X线骨密度仪测定其正位腰椎L_2~L_4、股骨颈及全髋的骨密度,按WHO诊断标准分为OP组和非OP组。同时收集患者性别、年龄、体重、身高、吸烟史、饮酒史、摄入钙剂、摄入活性维生素D3、骨折病史、RA病程、糖皮质激素应用、生物制剂应用、C反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)、类风湿因子(RF)、抗CCP抗体等资料,分析其与OP的相关风险。结果 121例RA患者中,男24例,女97例(其中绝经前25例,绝经后72例),年龄(56.31±13.48)岁。121例RA患者OP比例为49.59%。Logistic回归分析显示高龄、病程长与OP的危险性升高相关,每天钙剂摄入超过600 mg、高BMI与OP的危险性降低相关。女性RA患者绝经与OP危险性升高相关。结论高龄、病程长可能是RA患者发生OP的危险因素,高BMI、每天补充足量的钙剂可能是保护因素。
- 石一鸣朱尚玲冯晓雪刘芳黄建林
- 关键词：骨质疏松类风湿关节炎
- Sonic Hedgehog通过调控促分裂原活化的蛋白激酶／胞外信号调节激酶信号通路促进类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖被引量：1
- 2017年
- 目的初步探讨促分裂原活化的蛋白激酶/胞外信号调节激酶（MAPK/ERK）信号通路在Sonic Hedgehog（Shh）调控RA成纤维样滑膜细胞（RA-FLS）增殖中的作用。方法收集病情活动（DAS28≥3.2）的RA患者经关节镜下滑膜清理术或关节置换术切除的滑膜组织，组织块培养法培养分离RA-FLS，分别予Shh激动剂purmorphamine、抑制剂cyclopamine及MAPK/ERK信号通路抑制剂U0126处理，采用蛋白质印迹法检测RA-FLS细胞MAPK/ERK信号通路关键蛋白phospho ERK1/2（p-ERK1/2）磷酸化水平，细胞增殖与毒性试剂盒（CCK8）检测细胞增殖活力，以及流式细胞术检测细胞增殖情况，采用单因素方差分析和Kruskal-Wallis H（K）方法对数据进行分析。结果与对照组相比，浓度为1 μmol/L的purmorphmine可短时间内引起p-ERK1/2蛋白表达增加，作用15 min时显著（P〈0.01），经U0126和cyclopamine处理后，p-ERK1/2蛋白表达明显下降（P〈0.01）。RA-FLS经purmorphmine（1 μmol/L）处理后，细胞增殖活力为（114±5）%，明显高于对照组（100±0）%（P〈0.01），purmorphmine（1 μmol/L）组S期细胞占（8.39±0.60）%，较对照组（3.29±0.69）%明显增加（P〈0.01）；经cyclopamine（10 μmol/L）处理后，细胞增殖活力为（89±1）%（P〈0.05），S期细胞占（1.53±0.22）%（P〈0.05）；经purmorphamine（1 μmol/L）和U0126（10 μmol/L）共同处理后，细胞增殖活力为（89±2）%（P〈0.05），S期细胞占（1.07±0.25）%（P〈0.05）。结论Shh可能通过调控MAPK/ERK信号通路，促进RA-FLS细胞增殖，促进滑膜增生，导致RA疾病的进展。
- 刘芳朱尚玲冯晓雪罗敏琪张白玉李朝霞王晓红潘云峰黄建林
- 关键词：关节炎类风湿HEDGEHOG
- 托珠单抗治疗类风湿关节炎的长期疗效和安全性——一项至少治疗6个月的停药后观察被引量：1
- 2015年
- 目的:观察曾接受托珠单抗(tocilizumab,TCZ)治疗半年以上的类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者停用TCZ后的长期疗效和安全性。方法:随访我科曾参与的方案号为WA19926(入组4例)、WA18696(入组11例)和ML21753(入组20例)的TCZ临床研究受试患者,评估其压痛关节数、肿胀关节数、患者对疼痛的总体评价、患者和医生对疾病活动度的总体评价、健康评估问卷、疲劳量表、晨僵时间、血沉和C反应蛋白等指标,疾病活动度采用DAS28-ESR进行评价。结果:3项临床研究曾纳入患者35例,本次共回访患者29例(失访率17.14%),纳入分析28例(29例中有1例因试验尚未揭盲,无法确定是否使用TCZ而未纳入分析),包括WA19926中3例、WA18696中9例和ML21753中16例。TCZ停药时,17例(17/28,60.71%)患者达到临床缓解,其中,WA19926中1例(1/3,33.33%),WA18696中8例(8/9,88.89%),ML21753中8例(8/16,50.00%),另有3例(3/28,10.71%)患者(ML21753中3例(3/16,18.75%))达到低疾病活动度(low disease activity,LDA)。以上20例患者中,12例患者在TCZ停药后能规律服用改善病情抗风湿药(disease modifying antirheumatic drugs,DMARDs),其中WA19926中1例,WA18696中4例,ML21753中7例。回访时,此12例患者中有6例仍处于缓解状态(WA19926中1例,WA18696中2例,ML21753中3例),2例仍处于LDA(ML21753中2例)。有2例患者停用TCZ后未再服用DMARDs,回访时仍保持达标状态(WA18696中1例,ML21753中1例)。未发现肿瘤、结核、胃肠穿孔病例。结论:RA患者使用TCZ治疗达标率高,停用TCZ后仍应根据病情需要,遵医嘱服用DAMRDs,以达到良好的疾病控制状态。
- 冯晓雪朱尚玲曹双燕刘芳古洁若黄建林
- 关键词：类风湿关节炎长期疗效
- Smoothened表达对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞RhoA/ROCK通路的影响被引量：1
- 2014年
- 目的初步探讨Sonic Hedgehog(Shh)信号通路分子Smoothened(Smo)对类风湿关节炎(RA)成纤维滑膜细胞(FLS)RhoA/ROCK通路相关分子的影响。方法收集病情活动(DAS28≥3.2)RA患者关节镜手术或关节置换术切除的滑膜组织,组织块培养法培养RA-FLS作为细胞模型,流式细胞术检测CD55阳性率鉴定细胞,然后分别予Smo分子激动剂Purmorphamine或抑制剂KAAD-Cyclopamine处理,应用GST-pull down法检测RhoA活性,Western blot检测ROCK活性与Smo蛋白表达。结果与对照组相比,RA-FLS经Purmorphamine刺激后,活性RhoA蛋白、磷酸化MYPT1蛋白及Smo蛋白均上调(P<0.05);经KAAD-Cyclopamine处理后,活性RhoA蛋白、磷酸化MYPT1蛋白及Smo蛋白均下调(P<0.05)。结论 RA-FLS Smo表达可影响RhoA/ROCK信号的传导。Smo可能参与了RA-FLS中Shh信号通路非经典途径的调控。
- 彭蔚湘朱尚玲冯晓雪林灼锋黄建林
- 关键词：SMOOTHENED成纤维样滑膜细胞
