朱志峰
- 作品数：14 被引量：101H指数：3
- 供职机构：天津医科大学基础医学院免疫学系更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
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- 大肠杆菌肽脱甲酰基酶的表达、纯化及活性检测
- 2010年
- 肽脱甲酰基酶（peptide deformylase，PDF）是原核生物生长、代谢、繁殖必不可少的关键酶，而在人类和其他哺乳动物中不发挥明显作用，因而被视为新一代广谱抗生素药物筛选的理想靶点。最早被发现并进行研究的是大肠杆菌的PDF，但其体外活性非常低且不稳定，20世纪90年代以来人们一直在对不同金属离子形式的PDF进行研究，以获得既稳定活性又高的PDF。
- 王兰兰车绪春陆融朱志峰王松王冲李晓蕾徐琼王莉林刚姚智
- 关键词：肽脱甲酰基酶大肠杆菌活性检测纯化广谱抗生素原核生物
- 甲状腺激素对成骨样MG-63细胞甲状腺激素受体不同亚型表达的影响被引量：2
- 2011年
- 目的 检测人类成骨样细胞MG-63中甲状腺激素受体（TR）的表达情况以及甲状腺激素（T3或T4）对其的影响.方法 用实时荧光定量PCR法对MG-63细胞中TR的主要4个亚型,α1、α1、β1、β2的mRNA表达进行了测定.结果 TRα1 mRNA的表达水平最高,为10.70±0.45;TRβ1仅及其半,为5.75±0.10;TRβ2不低,相当于TRβ1的60%,为3.34±0.08;TRα2的表达极低,仅为（3.66±0.59）×10-2.分别加入不同浓度的T3或T4,仅TRα1和TRα2对T3表现明显的降调节,且TRα1和TRα2的表达与相应T3浓度之间负相关,其他亚型无显著性变化,也无相关关系;同样浓度范围的T4作用各亚型,表达均无显著性变化.结论 在骨细胞发育分化中TRα1起关键作用.
- 杨宇虹左爱军朱志峰赵学勤郭刚张镜宇
- 关键词：甲状腺激素甲状腺激素受体基因表达
- 酪丝亮肽荧光标记物的合成及其在肿瘤治疗靶点研究中的应用被引量：4
- 2008年
- 酪丝亮肽是一种具有抗肿瘤活性的小分子三肽,它可以诱导造成肝癌细胞发生凋亡坏死,从而杀伤肿瘤细胞,但是酪丝亮肽在肝癌细胞的亚细胞定位尚不十分明确.为了达到对酪丝亮肽进行示踪进而观察其亚细胞定位的目的,使用荧光物质(5(6)-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯,5(6)-TAMRASE)对酪丝亮肽进行了标记,应用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、毛细管电泳和荧光分光光度法对标记酪丝亮肽进行纯化和鉴定.并在激光扫描共聚焦显微镜下观察了荧光标记酪丝亮肽在人肝癌BEL-7402细胞中的分布.结果显示,合成的酪丝亮肽荧光标记物性质稳定,标记的酪丝亮肽在人肝癌BEL-7402细胞的胞浆中呈聚集分布.
- 简序傅正张燕玲韩丽霞朱志峰徐琼王莉周春雷石琳熙刘俊燕陆融姚智
- 关键词：酪丝亮肽肝癌荧光标记激光扫描共聚焦显微镜
- 用于核受体研究的骨组织细胞核制备方法被引量：1
- 2005年
- 朱志峰杨宇红郭刚张镜宇
- 关键词：T3受体细胞核
- 基因芯片分析三肽化合物酪丝亮肽对人肝癌基因表达谱的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:观察三肽化合物酪丝亮肽(YSL)的抗肿瘤作用,分析酪丝亮肽对肿瘤细胞基因表达情况的影响。方法:建立人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤模型,应用基因芯片技术分析酪丝亮肽对人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤肿瘤组织基因表达的影响,应用RT-PCR方法验证相关基因的表达情况。结果:给药剂量为160μg(/kg·d)时,酪丝亮肽能显著抑制裸鼠人肝癌BEL-7402移植瘤的生长,抑瘤率为41.34%,与生理盐水组比较均有统计学意义(P<0.05)。酪丝亮肽组与生理盐水组比较有33个基因变化倍数大于1倍以上,21个促进肿瘤增殖的基因表达下调,12个抑制肿瘤增殖的基因表达上调。结论:酪丝亮肽具有显著的抗肿瘤活性,可能是通过影响肿瘤细胞的PI3K信号转导通路,并籍此影响该通路的下游事件,损伤肿瘤细胞线粒体,诱导凋亡。
- 孙亚军傅正朱志峰王莉贾静车绪春陆融林刚姚智
- 关键词：酪丝亮肽裸鼠基因芯片PI3K
- TGF-β诱导及病毒感染获得iTreg细胞的方法学研究被引量：1
- 2013年
- 目的:建立MSCV-Foxp3感染法和TGF-β诱导法获取诱导性调节性T淋巴细胞(iTreg)的方法,并初步探讨两种iTreg的作用机制异同。方法:分别用MSCV-Foxp3感染和TGF-β诱导获取iTreg,流式细胞术和PCR检测两种iTreg的产率和Foxp3mRNA表达,CFSE染色观察iTreg的免疫抑制作用。ELISA检测iTreg的IL-10和TGF-β分泌,PCR检测iTreg颗粒酶A和B的mRNA水平。结果:感染法和诱导法iTreg产率分别可达49.12%和41.08%,但前者Foxp3 mRNA表达高于后者(P<0.05)。两种iTreg均具有一定的免疫抑制活性,IL-10分泌水平较原始CD4+T细胞上升(P<0.05),但颗粒酶B在诱导组iTreg的表达显著高于感染组(P<0.05)。结论:病毒感染法与TGF-β诱导法均可成功获得具有免疫抑制功能的iTreg,但前者Foxp3 mRNA表达高于后者。两种iTreg发挥免疫抑制功能可能都有IL-10参与,而颗粒酶B可能只与诱导组iTreg有关。
- 汤庆章文周春雷王松朱志峰徐琼李晋平王莉陆融林刚姚智
- 关键词：FOXP3TGF-Β
- 应用中空纤维法评价酪丝缬肽对肝癌的抑制作用被引量：1
- 2008年
- 目的观察三肽化合物酪丝缬肽（YSV）的抗肝癌作用。方法应用新型四氮唑盐（MTS）法，检测YSV对BEL-7402、SMMC-7721、Hep3B、HepG2和SK-HEP-1人肝癌细胞体外生长的抑制作用；应用中空纤维管皮下移植模型，进一步观察YSV对这5种人肝癌细胞体内生长的影响。结果0．1～1．6mg／ml的YSV能够明显抑制BEL-7402、SMMC-7721、Hep3B、HepG2和SK—HEP-1人肝癌细胞的体外生长，YSV组的吸光度（A）值与相应阴性对照组相比，差异均有统计学意义（P〈0．05），其中YSV对人肝癌细胞BEL-7402的抑制作用最强，1．6mg／ml的YSV抑制率达63．3％。160μg·k^-1·d^-1和320μg·k^-1·d^-1的YSV均能够明显抑制BEL-7402、SMMC-7721、Hep3B、HepG2和SK—HEP-1人肝癌细胞的体内生长，YSV组的A值与相应生理盐水组相比，差异均有统计学意义（P〈0．05）。YSV对人肝癌细胞BEL-7402的抑制作用最强，320μg·k^-1·d^-1 YSV的抑制率为53．1％。结论中空纤维法可以快速、准确地观察药物对不同肝癌细胞株体内生长的抑制作用，为YSV的临床应用提供了实验指导和可靠证据。
- 石琳熙陆融王莉周春雷徐琼朱志峰马睿张华俐贾静傅正姚智
- 关键词：肝细胞性肝癌
- 成骨样细胞MG-63中的甲状腺激素受体Ⅰ——细胞核可溶性甲状腺激素受体与激素（T3）结合的动力学
- 2011年
- 建立人类成骨样细胞系MG-63中甲状腺激素受体的结合实验的方法，测定受体动力学参数。体外培养MG-63细胞，制备细胞核提取液，对其细胞核提取物中的甲状腺激素受体与激素（主要是T3）结合的动力学进行了Seatchard分析。MG-63细胞核内存在高亲和力（Ka为7．68×10^9L／mol）和有限结合容量的甲状腺激素受体，最大结合容量为（111．25±10．73）fmol／mg蛋白。建立了一个简易的自培养细胞制备纯净细胞核的方法，为进一步研究成骨样细胞及骨组织中的甲状腺激素受体奠定基础。
- 杨宇虹左爱军朱志峰赵学勤郭刚张镜宇
- 关键词：甲状腺激素受体
- MG63细胞中的甲状腺激素受体动力学分析及其各亚型的表达
- 本文首先探讨MG63(人成骨样骨肉瘤细胞系)细胞中，甲状腺激素对自身受体转录的调节。于MG63细胞中加入不同浓度T3或T4，通过real-timeQ-PCR方法检测其T3受体各亚型的mRNA水平。
然后建立成骨...
- 朱志峰
- 关键词：甲状腺激素受体MG63细胞
- 文献传递
- 基于重组PCR法构建人骨保护素N端的酵母表达载体被引量：1
- 2006年
- 目的:构建骨保护素(OPG)N端片段的酵母表达载体。方法:OPGN端D1-D4域仅由2个外显子编码。以人基因组DNA为模板,PCR分别扩增外显子2和外显子3,并使外显子2的3′引物和外显子3的5′引物具有相互重叠的一段序列。以2种PCR产物混合物为模板,采用重组PCR扩增OPGN端编码序列,拟插入酵母分泌型表达载体pPIC9K。为使未来分泌表达产物具有完全正确的N末端,再次采用重组PCR策略,将pPIC9K信号肽裂解位点前的一段序列(含单一限制酶位点BamHⅠ)与OPGN端编码序列拼接在一起,从BamHⅠ和EcoRⅠ位点插入pPIC9K。结果:得到了OPGN端酵母表达载体,测序证实插入序列正确。结论:重组载体的获得为基因工程研制具有生物活性的OPGN端片段奠定了基础。
- 李晓霞朱志峰王宝利戴芳郭刚张镜宇
- 关键词：破骨细胞成骨细胞聚合酶链反应
