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李福兵: 作品数：83 被引量：276H指数：9; 供职机构：成都军区昆明总医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划云南省应用基础研究基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学环境科学与工程更多>>

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冷冻对山羊精子转染外源DNA和体外制备转基因胚胎的影响被引量：3: 2008年; 本实验将鲜精和冻精分别与地高锌标记的线形化的pEGFP-N1质粒孵育转染,用原位杂交方法检测转染效率;PCR和Southern Blotting检测精子与外源DNA的整合效率;与成熟卵母细胞体外受精,PCR检测阳性胚胎比率,用透射电镜技术、碘化丙锭和羟化荧光素双探针技术和单细胞电泳(Single Cell Gel Electrophoresis,SCGE)技术,观察精子冷冻前后的超微结构、精子质膜完整性和精子核DNA损伤的变化,研究冷冻对山羊(Caprahircus)精子转染内化外源DNA和体外制备转基因胚胎的影响及机理。结果表明,冻精显著提高了转染外源DNA的效率(81.60%±16.59%vs32.95%±2.93%,t=4.873,P=0.003;41.80%±6.26%vs27.89%±8.64%,t=2.634,P=0.039)。PCR和Southern Blotting检测表明外源DNA已经整合到精子基因组上。用冻精与成熟卵母细胞体外受精,体外受精穿透率和卵裂率显著低于鲜精组(24.19%±3.15%vs58.86%±3.73%,t=7.131,P<0.001;11.83%±2.37%vs29.71±3.47%,t=4.302,P<0.001),但体外生产的胚胎PCR阳性率比鲜精组显著提高(45.45%±10.87%vs24.44%±6.06%,t=1.750,P=0.013)。超微结构观察和双荧光探针检测都发现冷冻-解冻精子质膜完整性降低(8.34%±4.21%vs65.67%±6.46%,t=12.492,P<0.001),SCGE显示冷冻极显著增加了精子彗尾长度和彗星细胞比例(42.67μm±4.56μmvs21.14μm±2.36μm,t=5.644,P=0.005;60.00%±4.00%vs17.37%±2.57%;t=15.787,P<0.001)。冷冻-解冻可以提高山羊精子转染外源DNA的效率,冷冻破坏精子质膜完整性,解除质膜的阻碍作用,是提高外源DNA转染效率的一个主要原因。; 赵永聚王勇王剑李福兵魏泓; 关键词：山羊精子外源DNA 冷冻体外胚胎生产质膜

KH材料修复小鼠骨缺损材料(感染学组): 李福兵陈庆华徐永清颜廷亭朱跃良李霞刘华杨杜明李音赵万秋简洪

体外获能过程中精子凋亡及其对体外受精影响的研究被引量：4: 2003年; 目的　探讨精子体外获能进程与细胞凋亡之间的联系 ,以及获能过程中精子凋亡对体外受精的影响。方法　猪精子经钙离子载体A2 3187(IA)诱导处理后 ,在TALP以及添加 10 %胎牛血清 (TALP +FCS组 )、2 5 μmol/L核酶抑制剂 (ATA)、TALP +ATA组 3种培养液中孵育 ,以考马斯亮蓝和TUNEL检测顶体反应 (AR)率和凋亡率 ;同时行体外受精 ,检查卵母细胞穿透率和卵裂率。结果　鲜精液的精子凋亡率为 5 .7% ,经洗涤、上游处理后凋亡率下降为 3% ;获能培养过程中 ,尽管IA浓度影响精子寿命 ,胎牛血清推迟获能进程 ,但凋亡仅与AR直接相关 ,获能完成后 4小时左右出现明显的凋亡增长峰 ,ATA可阻止获能后的凋亡效应 ;3种获能处理的精子体外受精后 ,TALP和TALP +FCS组有超过 30 %以上的受精卵不发生卵裂 ,而TALP +ATA组仅为 2 0 % ,与阴性对照组相当。结论　精子在顶体反应发生的同时可能启动和 (或 )激活凋亡机制 ,4小时后出现凋亡效应 ;精子DNA的异常断裂影响受精卵的发育能力。; 叶华虎李福兵倪勇魏泓; 关键词：顶体反应细胞凋亡精子

小鼠成骨细胞和破骨细胞共培养模型的建立被引量：11: 2008年; 目的建立小鼠成骨细胞和破骨细胞共培养模型，为探讨成骨细胞和破骨细胞之间的相互调控作用奠定基础。方法利用24h内新生小鼠颅骨和4～8周龄成年小鼠四肢长骨分别分离、培养成骨细胞和破骨细胞，采用间接接触的培养模式将接种了骨髓单核细胞的玻片或骨片置入提前24h接种了成骨细胞的培养皿中进行共培养。共培养一定时间后进行破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate-resistant acid phosphatase，TRAP）染色鉴定和骨吸收功能检测，并进一步采用RT-PCR对破骨细胞标志酶基因基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、TRAP和组织蛋白酶K（CathepsinK）的表达进行检测。结果共培养5天后可见TRAP（＋）多核细胞形成，13天础（＋）多核细胞数目达到高峰；骨吸收陷窝在共培养7天后开始出现，随着培养时间的延长，陷窝面积呈增加趋势；破骨细胞标志基因TRAP在共培养3天时开始表达，而MMP-9和CathepsinK则在共培养5天后表达。结论共培养体系中成骨细胞对破骨细胞调控作用显著，诱导的破骨细胞具有噬骨能力，该共培养模型可用于成骨细胞和破骨细胞之间的相互调控作用研究。; 鲁秀敏陈林苏楠李福兵赵玲; 关键词：成骨细胞破骨细胞共培养

FGFR1-DN对BMSCs成骨诱导培养后碱性磷酸酶活性的影响: 目的探讨FGFR1-DN对骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)成骨诱导培养后碱性磷酸酶活性的影响.方法真核表达质粒pcDNA3.1(+)-DNFGFR1转染BMSCs,适时...; 李霞徐文漭徐永清李福兵简洪赵万秋; 关键词：骨髓基质干细胞成纤维细胞生长因子

成骨细胞特异性过表达h1 calponin转基因小鼠的建立: 2008年; 目的为从整体动物水平研究碱性调宁蛋白(h1-calponin)在骨形成过程中的直接作用,我们构建了成骨细胞中特异性过表达h1-calponin的转基因小鼠模型,并对其表型进行了初步分析。方法构建在成骨细胞特异性启动子(collagen I promoter)驱动下表达h1-calponin的载体(pColI-calponin),纯化DNA片段,再以显微注射的方法将转基因片段导入小鼠受精卵,经移植后得到小鼠。PCR法检测整合到小鼠基因组中的外源基因,提取F1代阳性小鼠原代成骨细胞RNA,RT-PCR检测h1-calponin在小鼠成骨细胞中的表达情况,并观察转基因小鼠表型及体重变化情况。结果PCR检测结果显示1只G0代转基因鼠中检测到阳性信号,RT-PCR显示F1代转基因小鼠成骨细胞中表达h1-calponin较野生对照小鼠明显增加,且转基因小鼠体重与野生小鼠相比有明显降低。结论成功构建了在成骨细胞特异性过表达h1-calponin的转基因小鼠,为深入研究h1-calponin在骨骼发育中的作用提供了良好的动物模型。; 陈锚锚苏楠赵子瑜雷子贤赵玲李福兵陈林; 关键词：成骨细胞转基因小鼠

同种异体冷冻骨移植结合外固定架支撑修复大段骨缺损被引量：3: 2012年; 背景:各种低温、细胞、免疫和灭菌去抗原技术的进步,使得大量的同种异体骨进入临床应用,给各类大段骨缺损的患者带来了希望。目的:评价临床应用同种异体冷冻骨移植结合外固定架支撑治疗大段骨缺损的效果。方法:利用同种异体冷冻骨移植治疗大段骨缺损36例,同时应用外固定架加压固定,提供力学支撑,在固定后定期回访。结果与结论:随访1～24个月,失访1例,其余35例骨移植区骨质生长良好,9～20个月植骨骨化,无骨不连发生,各关节活动及肢体负重良好。部分患者肢体轻度肿胀,其中3例切口周围轻微红肿疼痛,4例患者伤口渗出较多,细菌培养阴性,涂片染色检查有浆细胞及淋巴细胞,中性粒细胞少,考虑为慢性免疫排斥反应所致,经过换药及应用泼尼松3d后分泌物减少,所有患者切口均一期愈合。结果可见同种异体冷冻骨移植结合外固定架加压固定是治疗大段骨缺损的有效治疗方法之一。; 沙勇李春晓徐永清李福兵马涛李军丁晶江慕尧赵万秋; 关键词：骨缺损骨移植外固定架

陈旧性下颈椎骨折脱位的手术治疗: 目的探讨陈旧性下颈椎脱位的治疗方法。方法 5例下颈椎脱位的患者,时间为1-4月,发生部位C4,5两例、C5,6两例,C6,7一例;Frankle分级分别为E级2例,D级2例,A级1例。一期前后路手术治疗1例,单纯后路关节...; 陆声师继红徐永清苏踊跃李福兵姜楠朱崇涛陈国平; 文献传递

食指固有伸肌畸形手术适应症探讨: 目的:探讨食指固有伸肌被食指短伸肌替代畸形手术适应症.方法:23岁男性战士,因右手背肿胀疼痛3月对症支持治疗未见好转来院就诊,查体见右手第二指骨背侧有一梭型肿块,质软,有活动度,随食指伸曲移动,按压疼痛,MRI检查示右手...; 李福兵徐永清师继红陆声朱跃良赵虹瑾苏踊跃唐辉; 关键词：手术治疗适应症临床疗效

FGFR1信号通路在小鼠骨骼发育和重建中的作用: 成纤维细胞因子Ⅰ型受体/(FGF ReceptorⅠ,FGFRⅠ/)在骨骼发育和人类遗传疾病中具有重要作用。人FGFR1 P252A功能增强性点突变引起Pfeiffer综合征和OD综合征,主要引起人类颅缝早闭和趾骨发育异...; 李福兵; 关键词：FGFR1 成骨细胞破骨细胞; 文献传递

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