杨啸
- 作品数：7 被引量：10H指数：2
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- GLP-1对高糖诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用及机制分析被引量：2
- 2014年
- 目的 以高糖刺激的乳鼠心肌细胞模拟糖尿病诱导心肌细胞损伤,给予胰高血糖样多肽-1（GLP-1）预处理,观察其对高糖引起的心肌细胞凋亡的影响,以及细胞内硫氧还蛋白（Trx）系统的变化.方法 将分离培养48 h的大鼠乳鼠心肌细胞分为3组：①正常对照组：使用含葡萄糖5.5 mmol/L的DMEM培养基加入甘露醇20 mmol/L作为对照培养基进行培养;②高糖组：使用含葡萄糖25 mmol/L的DMEM培养基作为高糖培养基进行培养模拟糖尿病;③高糖＋ GLP-1组：以含葡萄糖25 mmol/L的DMEM培养基加入终浓度10 nmol/L的GLP-1继续培养模拟糖尿病GLP-1干预.心肌细胞分别在三种培养基中培养24h后测定指标.结果 ①与正常组比较,高糖组细胞乳酸脱氢酶活性、细胞凋亡率、p38激酶活性均显著升高,Trx活性明显降低（P＜0.05）;硫氧还蛋白表达无明显变化,但细胞内蛋白硝基化的标志物3-硝基酪氨酸生成量增加,Trx的内源性抑制蛋白硫氧还蛋白相互作用蛋白（TXNIP）表达明显上调,活性氧（ROS）生成和丙二醛（MDA）的含量均明显升高（P均＜0.05）.②与高糖组比较,高糖＋GLP-1组乳酸脱氢酶活性、细胞凋亡率、p38激酶活性明显降低,Trx活性明显恢复（P＜0.05）,3-硝基酪氨酸生成、TXNIP表达、活性氧生成和丙二醛的产生量均明显降低（P均＜0.05）.结论 高糖可引起培养的乳鼠心肌细胞发生损伤和凋亡,这种损伤与高糖引起的Trx活性和功能下降有关.蛋白的硝基化、TXNIP的表达上调均可抑制Trx的活性,使其抗自由基和抗凋亡功能减弱,自由基生成增加,p38激酶介导的凋亡途径加强,进而引起心肌细胞损伤和凋亡.GLP-1处理可使高糖引起的TXNIP表达明显下调,蛋白硝基化减轻,Trx活性得到改善,细胞自由基损伤和凋亡减轻,通过对Trx系统的保护而逆转高糖引起的细胞损伤和凋亡.
- 杨啸范丽芬姚艳玲焦向英
- 关键词：硫氧还蛋白心肌细胞
- 腺病毒过表达TXNIP对INS-1胰岛细胞损伤和凋亡的影响被引量：2
- 2014年
- 目的 观察TXNIP过表达是否可以引起正常培养条件下的胰岛细胞发生损伤和凋亡,分析TXNIP引起细胞损伤和凋亡的下游途径,以进一步明确TXNIP在糖尿病中引起各器官细胞损伤的机制.方法 将使用正常糖脂浓度培养的胰岛细胞分为4组：正常培养组、Ad-eGFP空病毒组、Ad-TXNIP过表达组和Ad-TXNIPC247S点突变过表达组.结果 与Ad-eGFP空病毒组相比,两个过表达组的TXNIP mRNA水平、TXNIP蛋白水平均显著升高,表明病毒转染成功,TXNIP成功过表达.与空病毒组相比,Ad-TXNIP过表达组TXNIP与Trx的结合量升高（1.67±0.08比1.06±0.05,P＜0.05）,而Trx活性显著降低（0.42±0.11比1.13±0.14,P＜0.01）;LDH活性[（498.8±55.62）U/L比（266.2±36.49）U/L,P＜0.01]、caspase-3活性[（3.799±0.330）nmol·h-1·mg-1 pro比（0.979±0.100）nmol·h-1·mg-1 pro,P＜0.01]及p38激酶活性（2.45±0.22比1.10±0.08,P＜0.01）均显著增高.与Ad-TXNIP过表达组相比,C247S点突变的TXNIP过表达组TXNIP与Trx的结合量减少,Trx活性明显升高,LDH活性[（421.6±41.31）U/L比（498.8±55.62）U/L,P＜0.05]和caspase-3活性[（3.377±0.290）nmol·h-1·mg-1 pro比（3.799±0.330）nmol·h-1·mg-1 pro,P＜0.01]较低,p38激酶活性（0.80±0.07比2.45±0.22,P＞0.05）明显降低.结论 单纯过表达TXNIP可以引起正常糖脂浓度培养条件下的胰岛细胞发生损伤和凋亡.TXNIP介导细胞损伤和凋亡的机制一方面与其抑制Trx活性、增加自由基损伤、增加ASK1-p38激酶依赖的凋亡途径有关,同时也有不依赖结合抑制Trx的途径存在.TXNIP的表达上调是糖尿病引起胰岛细胞损伤和凋亡的重要原因.
- 刘晓波杨啸姚艳玲张倩焦向英
- 关键词：硫氧还蛋白硫氧还蛋白相互作用蛋白胰岛细胞凋亡
- GLP-1对高糖诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用及机制分析
- ＜正＞目的以高糖刺激的乳鼠心肌细胞模拟糖尿病诱导心肌细胞损伤,给予胰高血糖样多肽-1（GLP-1）预处理,观察其对高糖引起的心肌细胞凋亡的影响,以及细胞内硫氧还蛋白（Trx）系统的变化。方法将分离培养48h的大鼠乳鼠心肌...
- 杨啸范丽芬姚艳玲焦向英
- 文献传递
- 蛋白质非酶糖化在丙酮醛促进心肌细胞缺氧/复氧损伤敏感性增加中的作用
- 2013年
- 目的观察蛋白质非酶糖化是否会增加心肌缺氧/复氧损伤的敏感性。方法常规培养H9C2细胞,分别给予PBS(对照组)、丙酮醛(200μmol/L)、丙酮醛(200μmol/L)+氨基胍(100μmol/L)孵育6 d后接受缺氧/复氧处理,以MTT法测定心肌细胞存活率,微量酶活性测试法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放变化,比色法检测丙二醛(MDA)含量,并通过免疫组织化学检测心肌细胞终末糖化晚期产物(AGEs)表达。结果缺氧/复氧降低细胞存活率,增加心肌细胞MDA含量和LDH释放;而丙酮醛处理6 d的心肌细胞的AGEs含量明显增加,并对缺氧/复氧损伤的敏感性增加,与PBS孵育细胞经缺氧/复氧处理后相比,MDA含量和LDH释放显著上升,存活率明显下降(P<0.01);MGO引起的上述变化可以被糖化抑制剂氨基胍部分阻断(P<0.05)。结论蛋白质非酶糖化是糖代谢中间产物丙酮醛增加心肌细胞对缺氧/复氧损伤敏感性的重要机制。
- 姚雪莉王瑾杨啸张炜芳赵焕新焦向英刘慧荣王晓樑
- 关键词：肌细胞非酶糖化缺氧复氧
- 白藜芦醇对高糖诱导乳鼠心肌细胞凋亡和损伤的保护作用被引量：3
- 2013年
- 目的观察白藜芦醇对高糖诱导的乳鼠心肌细胞凋亡及损伤的影响，探讨硫氧还蛋白（Trx）系统在此过程中的作用。方法使用培养的乳鼠心肌细胞，随机分为三组：正常对照组（葡萄糖5．5mmol／L）、高糖组（葡萄糖25mmol／L）和高糖＋白藜芦醇组（葡萄糖25．0mmol／L，白藜芦醇30．0umol／L）。白藜芦醇组给予白藜芦醇30umol／L预处理45min，对照组和高糖组均给予等量相应溶剂处理。各组细胞于正常糖浓度DMEM或高糖DMEM中继续培养48h后，收集上清液和细胞裂解液进行后续研究。结果与正常对照组相比，高糖组细胞乳酸脱氢酶漏出和细胞凋亡明显增加。进一步分析发现，高糖组细胞p38激酶活性、细胞内活性氧生成量，丙二醛（MDA）含量和3一硝基酪氨酸生成量明显升高，Trx活性降低，但其表达未见明显改变，其内源性抑制蛋白硫氧还蛋白相关蛋白（TXNIP）表达增加。白藜芦醇预处理显著减轻了高糖诱导的细胞凋亡及损伤，m活性得到改善，高糖引起的TXNIP表达明显下调，细胞p38激酶活性、细胞内活性氧生成、MDA含量、3一硝基酪氨酸生成量明显降低。结论白藜芦醇对高糖诱导的乳鼠心肌细胞凋亡和损伤具有明显保护作用，其机制与白藜芦醇减少Trx的硝基化，抑制高糖诱导的TXNIP表达上调，从而保护Trx的功能，减少自由基损伤和凋亡的发生有关。
- 范丽芬杨啸姚艳玲薛晓维焦向英
- 关键词：硫氧还蛋白凋亡白藜芦醇心肌细胞
- 使用腺病毒过表达TXNIP对INS-1胰岛细胞损伤和凋亡的影响
- 目的： 使用腺病毒转染技术，通过在培养的胰岛细胞株过表达TXNIP蛋白及C247S点突变的TXNIP，观察TXNIP过表达是否可以引起正常培养条件下的胰岛细胞发生损伤和凋亡，并通过与C247S位点突变导致丧失与Trx结合...
- 杨啸
- 关键词：硫氧还蛋白硫氧还蛋白相互作用蛋白胰岛细胞凋亡
- 文献传递
- 使用腺病毒过表达TXNIP对H9C2心肌细胞损伤和凋亡的影响被引量：5
- 2013年
- 本文旨在使用病毒转染技术,观察正常培养条件下的心肌细胞单纯过表达硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin inter-acting protein,TXNIP)是否可以引起细胞损伤和凋亡的发生,并分析其作用途径。对数生长期的H9C2心肌细胞分为三组:正常培养组、空病毒(Ad-eGFP)组、TXNIP过表达(Ad-TXNIP-eGFP)组,使用正常糖脂浓度(5mmo1/L葡萄糖)的DMEM培养基,均于转染72h后收集细胞和培养基进行指标测定。结果显示,细胞转染成功,72h转染效率达到高峰。与Ad-eGFP组相比,Ad-TXNIP-eGFP转染组TXNIPmRNA(P<0.05)和蛋白表达(P<0.01)均明显升高;心肌caspase-3(P<0.05)和LDH活性明显升高(P<0.01);使用流式细胞仪测得细胞凋亡明显增加(P<0.01)。Trx活性、与Trx相关的自由基损伤以及介导氧化应激损伤凋亡途径的p38激酶的活性检测显示,与Ad-eGFP组相比,TXNIP过表达组的Trx活性明显降低(P<0.01),反映膜脂质过氧化损伤的指标丙二醛(malondial dehyde,MDA)、3-硝基酪氨酸明显升高(P<0.01),p38激酶活性明显升高(P<0.01)。这些结果提示,通过腺病毒转染单纯过表达TXNIP可以引起正常糖脂浓度培养条件下的心肌细胞发生损伤和凋亡,其具体机制与抑制Trx活性、增加自由基损伤和p38激酶介导的凋亡有关。
- 姚艳玲杨啸薛晓维范丽芬焦向英
- 关键词：硫氧还蛋白硫氧还蛋白相互作用蛋白心肌细胞凋亡
