毛俊
- 作品数：25 被引量：85H指数：5
- 供职机构：大连医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学政治法律更多>>
- 乳腺癌干细胞亚群中MMP-9和BRMS1的表达及其临床病理意义被引量：9
- 2013年
- 目的探讨基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinases 9,MMP-9)和乳腺癌转移抑制因子1(breast cancer metastasis sup-pressor 1,BRMS1)在乳腺癌干细胞侵袭转移中的作用。方法采用免疫磁珠法从MCF-7乳腺癌细胞中分选出CD44+CD24-和非CD44+CD24-两组细胞亚群,RT-PCR法检测CD44+CD24-、非CD44+CD24-及未分选组中ALDH1 mRNA的表达水平。采用Western blot法分别检测MMP-9、BRMS1在两组细胞亚群中的表达;采用Transwell检测CD44+CD24-、非CD44+CD24-及未分选组中细胞亚群的迁移及侵袭能力;采用免疫组化SP法检测65例乳腺癌中MMP-9、BRMS1及ALDH1蛋白的表达。其中乳腺癌伴淋巴结转移组40例,非转移组25例。结果 ALDH1 mRNA水平在CD44+CD24-细胞亚群中的表达明显高于未分选组及非CD44+CD24-组;CD44+CD24-细胞亚群迁移及侵袭能力均高于未分选组及非CD44+CD24-组(P<0.05);在分选出的CD44+CD24-细胞亚群中MMP-9和ALDH1的表达高于非CD44+CD24-细胞亚群,而BRMS1的表达低于非CD44+CD24-细胞亚群,两者差异均有显著性(P<0.05);MMP-9和ALDH1在乳腺癌伴淋巴结转移组中的表达高于非转移组,且两者表达呈正相关,BRMS1在乳腺癌伴淋巴结转移组中的表达低于非转移组,与MMP9及ALDH1的表达呈负相关(P<0.05)。结论 MMP-9和BRMS1在乳腺癌干细胞侵袭转移中可能发挥重要作用。
- 王丽霞毛俊陶雅军马威张晴晴王波范姝君李连宏
- 关键词：乳腺癌干细胞MMP-9BRMS1ALDH1
- 下调Smoothened基因抑制乳腺癌干细胞生长的相关机制被引量：2
- 2013年
- 目的利用短发夹RNA（shRNA）下调Smoothened（SMO）基因的表达，研究SMO对乳腺癌干细胞增殖的影响。方法设计针对人SMO基因的shRNA，转染人乳腺癌MCF-7细胞系，G418筛选出稳定下调SMO基因的细胞株。体外：活细胞计数试剂盒（CCK8）检测细胞增殖的变化，流式细胞仪检测CIM4＋／CD24-乳腺癌干细胞比例，悬浮球培养检测乳腺球形成的能力，Westernblot检测SMO、GLIl及Oct4的表达。体内：每3天检测各组裸鼠成瘤情况，免疫组织化学SP法检测SMO的表达，Westernblot检测SMO、GLIl及Oct4蛋白的表达。结果21d后筛选出稳定下调SMO基因的MCF-7细胞。CCK8结果显示下调SMO基因可以抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖。流式细胞仪显示下调SMO基因后，CD44＋／CD24-细胞和乳腺癌干细胞球形成的比例明显降低。下调后裸鼠的肿瘤生长速度下降。免疫组织化学检测显示阴性对照组中SMO阳性表达比例为5／5，SMO．shRNA组阳性比例为2／5。两组肿瘤组织中SMO的蛋白表达水平分别为0．72±0．17和0．21±0．09，GLIl的蛋白表达水平分别为1．21±0．21和0．47±0．12，Oct4的蛋白表达水平分别为0．83±0．13和0．25±0．07。SMO、GLI-1和Oct4在SMO—shRNA组中的表达明显低于阴性对照组（P〈0．05）。结论下调SMO基因可以抑制乳腺癌干细胞的增殖。
- 毛俊范盼红马威张晴晴王波范姝君李连宏
- 关键词：乳腺肿瘤肿瘤干细胞
- 高迁移率蛋白A2在肿瘤中的表达及作用机制
- 2016年
- 高迁移率蛋白A2（HMGA2）是一种非组蛋白染色质相关蛋白,其AT-钩结构能够特异性结合特定的DNA序列,主要功能是作为致癌基因和结构转录因子.HMGA2几乎在所有类型的恶性肿瘤中表达,与肿瘤的形成、发展以及不良预后密切相关.HMGA2在各个生物过程,包括细胞增殖、细胞周期、干细胞自我更新、上皮间质转化及DNA损伤修复中都起到了重要作用.深入研究高迁移率蛋白A2对肿瘤的影响及其作用机制具有重大意义.
- 李青卢颖张春影毛俊李连宏
- 关键词：肿瘤基因表达
- 肝癌中烯酯酰辅酶A水解酶1的表达及其亚细胞定位被引量：1
- 2015年
- 目的探讨烯酯酰辅酶A水解酶1(enoyl coenzyme A hydratase 1,Ech1)表达变化在肝癌中的意义及Ech1的亚细胞定位与肿瘤恶性生物学行为的关系。方法应用免疫组化法检测20例正常肝组织和30例原发性肝癌组织中Ech1的表达;应用亚细胞分离法检测Ech1在Hca-F和FEch1下调细胞的四种不同亚细胞组分中的表达。结果 Ech1在原发性肝癌中的表达高于正常肝组织,差异有统计学意义(P<0.05);Ech1表达与患者年龄、AFP值及是否伴有肝硬化或伴有病毒性肝炎差异无统计学意义(P>0.05)。Ech1在Hca-F和FEch1下调细胞的四种亚细胞组分中表达均定位于细胞质和细胞膜,并且细胞质表达强于细胞膜,细胞核和细胞骨架部分中不表达。结论 Ech1在肝癌组织中的表达明显高于正常肝组织,提示其可能与肝癌的发生、发展有关;体外培养细胞中Ech1表达调控对其亚细胞定位的改变没有影响,Ech1对肿瘤恶性生物学行为的影响可能不是通过其亚细胞定位改变而实现的。
- 张军曲鸿曲鸿毛俊魏元怡王华新黄玉红
- 关键词：肝肿瘤亚细胞定位
- SIRT1基因在肿瘤中的作用机制被引量：5
- 2015年
- Ⅲ类去乙酰化酶Sirtuin 1（SIRT1）是一种依赖NAD＋的组蛋白去乙酰化酶.研究发现SIRT1在肿瘤中的作用具有双面性,它可通过抑制炎症、肿瘤血管形成及与肿瘤相关基因相互作用等机制抑制肿瘤的发生发展;也可通过调控肿瘤相关基因、上皮间质转化、促进肿瘤细胞增殖和肿瘤放化疗耐受以及维持肿瘤干细胞的存活等机制促进肿瘤的增殖、侵袭和转移.
- 马威卢颖毛俊赵文月李连宏
- 关键词：肿瘤致癌物SIRT1
- 盐霉素通过下调miR-221抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖的实验观察被引量：3
- 2018年
- 目的探讨盐霉素抑制乳腺癌细胞和乳腺癌干细胞增殖与microRNA-221(miR-221)及其调控的PTEN/PI3K/Akt信号通路的关系。方法脂质体转染miR-221模拟物至乳腺癌MCF-7细胞,盐霉素(1μmol/L)处理后检测细胞增殖能力和乳腺球形成能力。筛选miR-221稳转MCF-7细胞,构建裸鼠荷瘤模型,给予盐霉素腹腔注射治疗。实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测细胞和皮下瘤组织中miR-221和PTEN mRNA水平,Western blot法检测PTEN、p-Akt以及ALDH1蛋白表达。结果 RT-qPCR结果显示盐霉素(1μmol/L)可明显降低MCF-7细胞中内源性miR-221表达水平(P <0. 05)。与miR-221组相比,Sal-miR-221组乳腺球体积明显变小,数量明显减少(117±9. 4 vs 180±15. 6,P <0. 05);RT-qPCR显示miR-221表达水平明显降低(P <0. 05),PTEN mRNA水平则显著升高(P <0. 05);Western blot结果显示PTEN蛋白表达增高,p-Akt和ALDH1蛋白表达降低。Sal-miR-221组裸鼠异体移植瘤体积呈明显减小趋势;瘤组织内miR-221表达明显低于对照组(P <0. 05),而PTEN mRNA表达明显高于对照组(P <0. 05);PTEN蛋白表达亦明显升高,p-Akt和ALDH1蛋白则降低。结论体内外实验结果表明盐霉素抑制乳腺癌细胞和乳腺癌干细胞增殖,可能是通过下调miR-221促进PTEN表达,抑制PI3K/Akt信号通路实现的。
- 韩晓翠李百隆于立辉卢颖毛俊王波沈洁毛利民宋波
- 关键词：MIR-221盐霉素
- Smoothened shRNA载体的构建及其对乳腺癌细胞增殖的影响
- 2011年
- 目的构建并筛选Smoothened(SMO)基因的RNAi表达质粒,了解Hedgehog信号通路影响乳腺癌细胞增殖的作用机制。方法以脂质体LipofectamineTM2000介导转染乳腺癌MCF-7细胞。转染后48 h,采用实时定量RT-PCR技术检测转染细胞中SMO基因mRNA的转录水平,筛选有效的SMO RNAi质粒,Western blot检测SMO蛋白在乳腺癌MCF-7细胞中的表达,CCK-8法比较转染前后乳腺癌细胞增殖变化,实时定量RT-PCR检测SMO短发夹状RNA(shRNA)对cyclinD1 mRNA表达的影响。结果 4个SMO shRNA表达载体SMO shRNA-1、SMO shRNA-2、SMO shRNA-3和SMO shRNA-4经测序鉴定证明插入正确。转染48 h后,与MOCK组相比,SMO shRNA-1、SMOshRNA-3、SMO shRNA-4组SMO mRNA表达量均下降(P=0.015、0.002、0.000),其中转染SMO shRNA-4的MCF-7细胞中SMO mRNA表达水平低于SMO shRNA-1、SMO shRNA-2、SMO shRNA-3组(P=0.007、0.000、0.046)。SMOshRNA-4干扰抑制效率为87%。Western blot可检测到SMO在MCF-7中的表达,干扰片段SMO shRNA-4的抑制效果较好。转染SMO shRNA-4的MCF-7细胞增殖受到明显抑制(P<0.01),转染SMO shRNA后cyclinD1 mRNA表达下降(P=0.000)。结论已成功构建并筛选出SMO基因的RNAi表达质粒,SMO shRNA对乳腺癌细胞增殖有明显的抑制作用,Hedgehog信号通路可通过活化cyclinD1诱导细胞恶性增殖。
- 陶雅军毛俊张晴晴李连宏
- 关键词：SMOOTHENEDSHRNA增殖CYCLIND1
- 盐霉素的抗肿瘤机制
- 2014年
- 盐霉素是一种广谱抗肿瘤药物,能抑制肿瘤生长并能特异性地杀伤肿瘤干细胞,其抗肿瘤作用的潜能引起了国内外广泛关注.盐霉素主要通过诱导肿瘤细胞的凋亡,抑制肿瘤细胞的增殖和转移,降低肿瘤细胞的耐药性等来实现其抗肿瘤作用.
- 卢颖马威毛俊李连宏
- 关键词：肿瘤肿瘤干细胞盐霉素
- Hedgehog信号通路在乳腺癌CD_(44)^+ CD_(24)^-细胞中激活被引量：1
- 2011年
- 目的了解Hedgehog信号通路在乳腺癌发生发展中的作用。方法采用免疫磁珠法从无血清培养的乳腺癌悬浮细胞中分选CD44+CD24-细胞和非CD44+CD24-细胞,分别接种于NOD/SCID鼠乳腺脂肪垫内,观察成瘤情况。采用real-time RT-PCR技术检测Hedgehog信号通路分子SMO和GLI1在CD44+CD24-细胞和非CD44+CD24-细胞中的表达情况。结果分选出的CD44+CD24-细胞约占细胞总数的2.25%,SMO mRNA和GLI1 mRNA在CD44+CD24-细胞中的表达均高于其在非CD44+CD24-细胞中的表达(P均<0.05)。CD44+CD24-组乳腺癌发生率为100%(3/3),发生肺转移、淋巴结和肺转移、肝脏和淋巴结转移各1只;非CD44+CD24-细胞组乳腺癌发生率为50%(2/4),未见有转移发生。结论在乳腺癌CD44+CD24-细胞中Hedgehog信号通路分子表达增强,其与乳腺癌的浸润转移关系密切。
- 陶雅军毛俊张晴晴李连宏
- 关键词：HEDGEHOG信号通路乳腺肿瘤
- CK19与cyclinD1//CDK4、NF-κB在乳腺干细胞及其病变中的表达和相关性研究
- 目的:
干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的特殊细胞。正常情况下,干细胞的自我更新和分化能力受到严格的调控,一旦这种机制被破坏,细胞就会无限制的生长、繁殖、形成异常新生物,即肿瘤。乳腺肿瘤虽然组织类型复杂...
- 毛俊
- 关键词：乳腺干细胞CK19NF-ΚB
- 文献传递
