王建安
- 作品数：58 被引量：138H指数：6
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 可溶性E-选择素cDNA基因克隆及其真核表达
- 1996年
- 从ｐＵＣ１８／Ｅ－选择素重组质粒经ＰＣＲ扩增得到可溶性Ｅ－选择素ｃＤＮＡ基因，将此基因插入到痘苗病毒表达载体ｐＪＳＡ１１７５的ＳｍａⅠ位点，构建了正向表达质粒ｐＪＳＡ１１７５／可溶性Ｅ－选择素，采用脂质体共转染的方法，将上述质粒转染ＴＫ－１４３细胞，用ＢｕｄＲ和Ｘ－ｇａｌ双筛选获得带有人可溶性Ｅ－选择素ｃＤＮＡ重组痘苗病毒，连续传代１０代以上，经ＡＰＡＡＰ检测和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳，证实重组痘苗病毒能稳定。
- 胡美茹蔡铀庆汲言山孙涛王建安孙英勋沈倍奋
- 关键词：可溶性E-选择素痘病毒真核细胞
- 小剂量抗CD3单克隆抗体有效逆转新发的Ⅰ型糖尿病被引量：3
- 2008年
- 目的验证抗CD3单克隆抗体治疗自身免疫病如Ⅰ型糖尿病的可行性,并对机理进行初步探讨。方法以Ⅰ型糖尿病动物模型-非肥胖性糖尿病(nonobese diabetic,NOD)小鼠为研究对象,将新发病的小鼠随机分为治疗组和对照组,分别给予抗CD3抗体和对照抗体,剂量均为5μg/d×5d,监测血糖观察糖尿病的逆转情况。结果经短期小剂量CD3单抗治疗,到第9周时,75%的小鼠的血糖恢复至正常。维持时间超过30周,胰岛形态亦得到了明显改善。CD3单抗的这种效应并不是由于清除T细胞引起免疫抑制所致,而是诱导产生了胰岛β细胞特异性的免疫耐受。结论小剂量抗CD3单克隆抗体治疗可有效逆转新发的Ⅰ型糖尿病。
- 陈宇陈国江韩根成王建安黎燕
- 关键词：抗CD3单抗NOD小鼠特异性免疫耐受
- 38例散发乳腺癌患者BRCA1基因突变检测被引量：16
- 1999年
- 目的： 分析３８ 例散发乳腺癌患者 Ｂ Ｒ Ｃ Ａ１ 基因突变情况及突变位置。方法： 应用 Ｐ Ｃ Ｒ Ｓ Ｓ Ｃ Ｐ（ Ｓｉｎｇｌｅｓｔｒａｎｄｅｄ ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ， Ｓ Ｓ Ｃ Ｐ） 和直接测序方法。结果：４／３８ 例患者 Ｂ Ｒ Ｃ Ａ１ 基因有突变，突变例数占总例数的１０ ．５ ％ ，其中３ 例突变位置在内含子的拼接区，一例突变位置在１１ 号外显子上。结论：筛查 Ｂ Ｒ Ｃ Ａ１ 基因突变对于乳腺癌患病风险评估、发病检测、早期诊断及基因治疗具有重要的临床意义。
- 赖春宁江泽飞江泽飞宋三泰王建安沈倍奋
- 关键词：BRCA1基因乳腺癌基因突变PCR-SSCP
- 人CD20胞外区片段原核表达质粒的构建被引量：1
- 1999年
- ＣＤ20是Ｂ细胞表面特有的抗原结构,为一种跨膜的非糖基化蛋白。它通过参与Ｃａ2+离子通道而对Ｂ细胞的分化和成熟进行调控,同时还通过参与细胞内的酪氨酸激酶信号转导途径而对细胞周期进行调控,促进细胞通过Ｇ1期进入Ｓ期。研究发现,ＣＤ20的过度表达与细胞癌变有关,尤其...
- 洪海燕舒翠玲郭燕翔王建安胡美茹沈倍奋
- 关键词：片段原核表达质粒
- 抗CD3抗体治疗新发Ⅰ型糖尿病的作用机制研究
- 目的：阐明抗CD3单克隆抗体治疗逆转新发Ⅰ型糖尿病的作用机制.意义：对抗CD3抗体作用机理的深入揭示不仅可为阐明CD3抗体治疗其他自身免疫病的作用机制提供理论依据,而且将为寻找更为特异的治疗靶标优化抗体的治疗方案奠定基础...
- 陈国江王建安韩根成王仁喜徐若男沈倍奋黎燕
- 关键词：抗CD3单克隆抗体NK细胞NKT细胞TGF-Β
- STAT3反义表达载体的构建、稳定表达及对M1白血病细胞表型的影响被引量：1
- 2001年
- 目的 探讨JAK STATs通路在IL 6信号转导中的功能。方法 将含起始密码子在内的约 1.2kbSTAT3cDNA反向插入到真核细胞表达载体pcDNA3中 ,采用电穿孔法将重组质粒导入到M1小鼠急性髓系白血病细胞中 ,进行G418筛选。结果 G418筛选出抗性克隆后 ,基因组DNAPCR扩增表明STAT3反义基因片段已导入M1细胞中并在基因组中整合。STAT3反义RNA不影响M1细胞的生长动力学特征 ,但可显著拮抗IL 6诱导的STAT3激活 ,并拮抗IL 6对M1细胞的生长抑制效应。结论 STAT 3反义RNA能够在M1细胞中稳定表达 ,成为进一步研究JAK STATs途径功能的新模型。
- 张纪岩舒翠玲王建安冯建男裴武红宋伦黎燕沈倍奋
- 关键词：STAT3白细胞介素6反义RNA白血病细胞表型
- 可溶性 CD8α链基因克隆及序列分析
- 1992年
- 可溶性 CD8抗原(sCD8)是从 CD8^+细胞分泌或脱落至细胞外的白细胞分化抗原,sCD8与免疫调控和再生障碍性贫血等疾病有着密切关系。为从膜 CD8抗原基因中获得具有编码可溶性 CD8分子的基因,我们以 CD8抗原复合体分子的主要亚基α链基因为改构对象,采用逆转录重组 PCR 方法,在基因扩增的同时进行 DNA 重组拼接,除去编码 CD8α链穿膜序列的 DNA,从而克隆出 sCD8α链基因,并对重组的sCD8α链基因进行了序列分析.sCD8α链基因的克隆为进一步研究其表达及可溶性 CD8抗原在免疫调控中的功能奠定了基础.
- 郑建强王建安马宏进白炎沈倍奋
- 关键词：CD8基因PCR基因克隆
- 膜结合型白细胞介素6受体β亚基突变体的构建及其对白细胞介素6信号的影响
- 2000年
- 目的 探讨只含白细胞介素 6 (IL 6 )受体 β亚基 (gp130 )胞外第二、三个FNⅢ (CBD)区的膜结合型gp130突变体 (mgp130 )能否传导IL 6信号。方法 首先用重叠延伸PCR方法扩增出mgp130cDNA ,将其克隆到真核表达载体pRc RSV中 ;用脂质体转染法将此表达载体导入骨髓瘤细胞系SKO 0 0 7和Jurkat细胞中 ,通过点杂交证明其得到有效表达 ;用阻滞电泳法比较野生型gp130和mgp130分子传导IL 6信号的情况。结果 在SKO 0 0 7细胞中IL 6能激活APRF ,而将野生型和突变的gp130cDNA的表达载体分别导入细胞后 ,APRF活性均得到增强 ,但野生型gp130增强的程度较突变体为高 ;在Jur kat细胞中IL 6不能激活核因子 ,导入野生型和突变的gp130cDNA的表达载体后 ,IL 6能激活APRF ,但不能激活NF IL6。与SKO 0 0 7细胞的结果类似 ,野生型gp130激活的信号强于突变体。结论 只含胞外CBD区的mgp130 ,尽管仍能传导IL 6信号 ,但其效率远低于野生型gp130 ,因此gp130的免疫球蛋白样区在IL 6转导中也起着十分重要的作用。
- 杨志华倪长源沈倍奋王建安王之贤
- 关键词：白细胞介素6信号传导膜结合型
- 可溶性人干细胞因子基因的克隆及表达
- 1994年
- 干细胞因子(SCF)是近年发现的一种新的细胞因子,该因子是c-kit原癌基因编码受体的配体,在机体造血等多种功能细胞的生长发育中起重要调控作用.国外临床前期和临床Ⅰ期的研究表明,SCF在治疗某些顽固性贫血,恢复放化疗后骨髓的造血机能及抗辐射损伤等方面具有潜在应用价值.本研究应用分子生物学技术,克隆了编码人可溶性SCF基因cDNA并在COS7细胞和大肠杆菌中成功地进行了表达,现报道如下.
- 朱元晓王建安赖春宁薛生沈倍奋
- 关键词：干细胞因子基因无性系可溶性
- 红细胞分化相关因子EDRF1的反义RNA下调蛋白激酶C-α mRNA的表达被引量：2
- 2001年
- 为了研究通过功能筛选得到的一个新的红细胞分化相关的全长cDNA(命名为EDRF1)的功能 ,选择K5 6 2细胞作为模型细胞来观察反义EDRF1表达对细胞功能的影响。通过快速构建 ,同时得到了正向和反向插入片段的真核表达载体pcDNA3 EDRF1 S(sense)及pcDNA3 AS(antisense) ,并通过改进的LipofectAMINE细胞转染和G418筛选 ,得到了稳定表达的细胞株 ,进行基因组PCR鉴定 ,证明了转染的高效性。NorthemBlot试验的结果表明 ,反义载体转染的K5 6 2细胞中 ,EDRF1在mRNA表达水平上受到下调 ,提示EDRF1反义DNA的表达可能抑制了EDRF1mRNA的正常转录。进一步 ,γ 珠蛋白和PKC α的表达在反义构建质粒转染K5 6 2细胞中的表达均受到下调 ,这可能传递了红细胞分化的负反馈信号 。
- 王敦成张晓东王建安赖春宁黎燕沈倍奋
- 关键词：反义RNA红细胞分化蛋白激酶C-Α信号转导珠蛋白
