王新星
- 作品数：6 被引量：21H指数：3
- 供职机构：山西医科大学第一医院更多>>
- 发文基金：山西省科技攻关计划项目国家自然科学基金山西省卫生厅科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 多发与单发性胶质瘤患者石蜡包埋组织中微小RNA差异表达的初步探讨被引量：5
- 2015年
- 目的 比较多发与单发性胶质瘤甲醛固定石蜡包埋（FFPE）组织中微小RNA （miRNA）表达谱的差异,初步探讨差异表达的miRNA及其靶基因在胶质瘤侵袭迁移中可能发挥的作用.方法 选取多发和单发胶质瘤患者FFPE标本各6例,提取总RNA并进行质检;采用基因芯片技术检测miRNA表达谱,利用芯片分析软件对结果进行数据分析,筛选出多发与单发胶质瘤表达差异有统计学意义的miRNA,再利用生物学信息库预测表达差异最显著miRNA的靶基因.结果 所有FFPE组织标本中提取的总RNA质量均符合质控标准.与单发胶质瘤相比,多发胶质瘤中共有128个miRNA表达差异有统计学意义（倍数＞2或＜0.5）,其中有10个miRNAs显著上调（倍数＞50）,分别为miR-21、miR-455、miR-199、miR-410、miR-148a、miR-335、miR-34b、miR-664a、miR-542、miR-4453;有5个表达明显下调（倍数＜0.05）,分别为miR-200a、miR-451、miR-29a、miR-101、miR-96.基于上调和下调最显著的miR-21（差异倍数为240.11）和miR-200a（差异倍数为0.009913）靶基因预测结果,其多种靶基因涉及肿瘤侵袭迁移相关的生物学功能.结论 FFPE组织可以满足后续miRNA芯片等实验研究.多发胶质瘤与单发胶质瘤存在miRNA的差异表达,其中miR-21和miR-200a可能与胶质瘤的侵袭和迁移密切相关.
- 王宏勤李晋虎苗旺范益民慕伟王新星刘晓东
- 关键词：神经胶质瘤芯片分析技术肿瘤侵润
- MiR-195对胶质瘤细胞U251增殖和凋亡的影响被引量：9
- 2013年
- 目的探讨miR-195过表达对人脑胶质瘤细胞系U251增殖和凋亡的影响及其机制。方法实验分为Blank组、NC组和miR-195组，Blank组处理时仅加等体积PBS，后两组通过脂质体将无义序列或miR-195模拟物转染至U251，RT—PCR检测转染前后miR-195表达水平；用CCK-8法计算细胞生长抑制率和平板克隆形成实验评价细胞的增殖能力；流式细胞仪分析细胞凋亡和周期；Hoechst33342和PI双染法检测原位细胞凋亡坏死；利用生物信息学技术预测miR-195的靶基因，Westernblot检测Bcl-2的蛋白水平。结果RT—PCR测得转染后miR-195表达水平提高6倍左右；细胞生长抑制率和平板克隆形成结果分别显示过表达miR-195可以抑制U251生长和克隆形成能力（与NC组比较P〈0．001）；流式细胞仪检测细胞凋亡和Hoeehst33342和PI双染法结果示miR-195组细胞凋亡和坏死比例明显增高（与Blank组及NC组相比P〈0．001）；流式细胞仪检测细胞周期发现miR-195能够阻滞U251在G0／G1期，与Blank组及NC组相比P〈0．05；TargetSean预测发现Bcl-2是miR-195的靶基因；Westernblot检测示过表达miR-195可以下调Bcl-2的表达，与Blank组及NC组相比p〈0．05。结论过表达miR-195可以抑制胶质瘤细胞U251的增殖，促进胶质瘤细胞凋亡和坏死并产生G0／G1期阻滞，可能成为胶质瘤基因治疗的新靶点。
- 王宏勤王新星苗旺刘晓东慕伟郭庚范益民
- 关键词：神经胶质瘤增殖凋亡BCL-2
- p53上调凋亡调控因子对不同p53表型胶质瘤细胞生长的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察p53上调凋亡调控因子（PUMA）对不同p53表型人类脑胶质瘤细胞系生长的影响，并探讨其可能的作用机制。方法构建PUMA腺病毒（Ad—PUMA）及空载体腺病毒（Ad．DsRed），分别转染胶质瘤细胞系U251（p53突变型）及SHG-44（p53野生型），CCK-8法检测各组细胞增殖能力；流式细胞术检测各组细胞凋亡率；Westernblot法检测PUMA及凋亡相关蛋白bcl-2、Bax的表达；Caspase活性检测试剂盒检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性。结果在p53状态不同的胶质瘤细胞系U251及SHG-44中，Ad．PUMA转染组与空载体组及空白对照组比较，均显现出细胞增殖抑制效应抑制率分别为（50．89±4．73）％和（44．45±5．33）％，P〈O．05]以及促凋亡作用凋亡率分别为（44．89±5．08）％和（31．67±7．32）％，P〈0．051；Westernblot结果显示，Ad—PUMA组胶质瘤细胞转染后，可见PUMA蛋白表达升高，同时伴随抗凋亡蛋白bcl-2表达降低及促凋亡蛋白Bax表达增强（P〈0．05）；Caspase活性检测结果显示Ad—PUMA组Caspase-3、Caspase-9活性增加（P〈0．05），而Caspase-8活性未见明显改变（P〉0．05）。结论无论p53表型如何，PUMA均可抑制胶质瘤细胞增殖，促进其凋亡，其机制可能是通过线粒体凋亡途径即上调Bax，抑制bcl-2表达，进而激活Caspase-9实现的，Ad—PUMA有望成为胶质瘤基因治疗的新靶点。
- 王新星苗旺王宏勤刘晓东范益民
- 关键词：神经胶质瘤P53细胞增殖细胞凋亡
- MiR-195对人脑胶质瘤细胞U251和SHG-44增殖的抑制作用被引量：5
- 2013年
- 目的探讨miR-195过表达对体外培养的人脑胶质瘤细胞U251和SHG-44增殖的影响。方法通过脂质体将miR-195 mimics转染至U251和SHG-44细胞,同时设立空白对照组和阴性对照组,实时荧光定量PCR检测转染前后miR-195的表达水平;用CCK-8法评价细胞的增殖能力;流式细胞仪分析细胞周期。结果胶质瘤细胞转染miR-195 mimics后,发现U251细胞和SHG-44细胞中miR-195的表达分别为5.93±0.43和6.43±0.48,较空白对照组和阴性对照组均增高约6倍左右。与空白对照组和阴性对照组相比,转染miR-195 mimics后的胶质瘤细胞的增殖能力明显受到抑制,细胞周期阻滞于G0/G1期,S期细胞减少。结论过表达miR-195可以阻滞胶质瘤细胞周期进展,从而抑制其增殖,为胶质瘤的基因治疗提供新的策略。
- 慕伟苗旺刘晓东范益民王新星王宏勤李晋虎
- 关键词：神经胶质瘤细胞增殖细胞周期
- 上调及下调MicroRNA-195对人脑胶质瘤影响的初步研究被引量：2
- 2014年
- 目的观察上调及下调microRNA-195(miR-195)对裸鼠皮下荷SHG-44人脑胶质瘤生长的影响并探讨其机制。方法使用脂质体瞬时转染法将miR-195 mimics和inhibitor分别转入人脑胶质瘤细胞系SHG-44,同时设立空白对照组和阴性对照组;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测转染前后miR-195的含量变化;流式细胞法检测各组细胞周期分布;裸鼠成瘤实验观察miR-195对体内胶质瘤增殖的影响;肿瘤组织HE染色观察病理学改变;Western blot、免疫组织化学染色检测肿瘤组织周期相关蛋白P21、Cyclin D1的表达变化。结果 qRT-PCR测得转染mimics后miR-195的表达水平提高19倍左右,而转染inhibitor后miR-195的表达水平降低为空白对照组的42%;与空白对照和阴性对照组相比,miR-195mimics组细胞阻滞于G0/G1期(P<0.05);而miR-195 inhibitor组则相反(P<0.05);裸鼠成瘤实验显示,miR-195 mimics组与空白对照组和阴性对照组相比,肿瘤生长速度减慢,体积减小(P<0.05),而miR-195 inhibitor组则结果相反(P<0.05);HE染色结果显示miR-195mimics组肿瘤组织异型性下降,新生血管数减少,而miR-195 inhibitor组则相反;Western blot检测示与空白对照组和阴性对照组比较,miR-195 mimics组P21表达上调,而Cyclin D1表达下调,miR-195inhibitor组结果相反(P均<0.05);免疫组化染色检测显示,与空白对照组和阴性对照组比较,miR-195mimics组中P21表达阳性率较高,而Cyclin D1的表达阳性率较低(P均<0.05),miR-195 inhibitor组情况则相反(P均<0.05)。结论 MiR-195可使P21表达升高,下调Cyclin D1的表达,阻滞G0/G1期向S期转换,从而抑制人脑胶质瘤细胞SHG-44的增殖能力。
- 李晋虎苗旺刘晓东王宏勤慕伟王新星范益民
- 关键词：神经胶质瘤P21CYCLIND1
- miRNAs与胶质瘤干细胞耐药性研究进展被引量：2
- 2014年
- 脑胶质瘤是最常见的颅内肿瘤,其预后差,死亡率高,极大地威胁着患者的生命.研究表明恶性胶质瘤患者在接受常规综合治疗（手术、放疗、化疗）后,中位生存期也仅一年左右[1,2].2003年Singh等[3]基于肿瘤细胞和干细胞自我更新能力、无限增殖能力和多向分化潜能的相似性,以CD133为标志物,采用免疫磁珠法从胶质瘤标本中分离出与神经干细胞（neural stem cells,NSCs）相似的脑肿瘤干细胞（brain tumor stem cells,BTSCs）
- 张程王新星郭庚张鹏郝解贺
- 关键词：微小RNA胶质瘤干细胞耐药
