王锋超
- 作品数：42 被引量：106H指数：7
- 供职机构：第三军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 大剂量辐射诱导IEC-6细胞差异表达基因消减cDNA文库的构建被引量：1
- 2004年
- 目的 克隆和鉴定大剂量辐射前后大鼠空肠上皮细胞IEC 6差异表达基因 ,为探索肠上皮细胞辐射损伤修复的分子机制提供线索。方法 IEC 6细胞经 3 5Gyγ射线照射后由抑制性消减杂交 (SSH)方法和T/A克隆技术进行差异表达基因消减cDNA文库的构建 ,用反向Northern杂交法对库中的EST序列进行筛选 ,挑取阳性克隆测序 ,和GenBank比对后挑选有限克隆进行正向Northern杂交进行验证。结果 扩增消减杂交cDNA文库得到约 2 0 0 0个克隆 ,随机选取 96个白色克隆进行PCR扩增 ,用反向Northern杂交法对库中的EST片段进行筛选得到 15个阳性克隆 ,代表 12个基因的转录产物 ,部分基因功能已经明确 ,涉及细胞骨架、细胞应激、细胞周期、信号转导等多方面 ,另外还获得一新的cDNA序列。结论 SSH法建立了IEC 6细胞差异表达基因消减cDNA文库 ,一次获得多条差异显示EST片段 ,基因种类涉及细胞骨架 ,细胞应激、细胞周期、信号转导等多方面 。
- 王锋超高京生粟永萍徐辉王军平艾国平苑晓燕楼淑芬刘晓宏章波黄跃生蒋建新
- 关键词：IEC-6抑制性消减杂交基因文库
- 电离辐射对肠上皮细胞NF-κB p65和Akt表达的影响被引量：3
- 2006年
- 目的观察电离辐射对肠上皮细胞PI3K/Akt通路和NF-κB通路的激活模式。方法将对数生长期的IEC-6细胞用无血清培养基培养24h后进行60Coγ射线12Gy照射,检测IEC-6细胞辐照前后不同时间Akt磷酸化水平和胞浆、胞核NF-κB P65蛋白水平变化。结果辐射可使肠上皮细胞受照20min后迅速诱导p65的核转位,但检测不到明显的Akt磷酸化;肠上皮细胞Akt磷酸化的高峰于受照后1h才出现。结论电离辐射诱导的NF-κB p65快速核转位早于辐射诱导Akt的磷酸化。
- 王锋超冉新泽杜智勇艾国平王军平粟永萍
- 关键词：IEC-6PI3K/AKTNF-ΚBP65
- 电离辐射与内毒素致小肠上皮细胞损伤机制的实验研究
- 正常状态下，小肠隐窝上皮细胞可不断增殖，并向绒毛上皮移行，同时伴随分化、成熟和衰老，最终在绒毛顶端生理性脱落。这种细胞动态更新对维持肠粘膜正常的结构和功能有重要意义。多种因素打破肠上皮这种固有的动态更新平衡，造成胃肠道损...
- 王锋超
- 关键词：电离辐射内毒素休克复合伤MAPK
- 文献传递
- Lewis肺腺癌对小鼠肠道干细胞及其微环境的影响被引量：4
- 2020年
- 目的探讨Lewis肺腺癌(Lewis lung cancer,LLC)对小鼠肠道干细胞及其微环境的影响。方法比较不同接种方式(皮下接种和静脉移植)在C57BL/6J小鼠肺部形成肺腺癌的能力差异。通过HE、BrdU免疫染色和qPCR检测LLC对肠道形态、增殖动力学、肠道干细胞及其微环境相关基因、肠上皮细胞紧密连接及炎症因子表达的影响。使用EdU染色评价LLC条件培养基(LLC-CM)对IEC-6细胞增殖的影响。使用LLC细胞和LLC-CM观察肺腺癌对肠类器官生长的影响。结果静脉移植LLC细胞较皮下接种荷瘤更易在小鼠肺部形成肺腺癌。肺腺癌导致绒毛和隐窝长度较对照组显著增加(P<0.01),BrdU阳性细胞数量和Ki67基因mRNA水平显著高于对照组(P<0.05)。LLC-CM可增加EdU阳性IEC-6细胞数量(P<0.05)。肺腺癌小鼠肠组织中肠道干细胞标志物基因(Lgr5、Olfm4、Axin2)表达水平显著下降,微环境相关基因(Wnt3)表达水平降低(P<0.05)。肺腺癌引起肠上皮ZO-1免疫染色以及ZO-1和OCLN mRNA表达显著降低,IL-1β和TNF-α的mRNA含量显著增加(P<0.05)。LLC细胞和LLC-CM均抑制肠类器官生长。结论Lewis肺腺癌能够破坏肠道干细胞及其微环境,为肺癌与肠道交互作用提供了新的实验依据。
- 徐珍妮欧静王钰雷旭丹黄灵潇王涛王锋超高继宁王军平粟永萍刘登群
- 关键词：肠道干细胞微环境肿瘤
- 供体骨髓来源干细胞在骨髓嵌合小鼠肠上皮中定植和分化研究被引量：7
- 2008年
- 目的观察骨髓移植后供体骨髓来源干细胞(bone marrowderived stem cells,BMDSCs)是否能够在受体肠上皮中定植并分化为肠上皮细胞。方法使用密度为1.073 g/mL的Percoll分离GFP转基因小鼠的骨髓有核细胞。利用60Co放射源对C57BL/6小鼠进行10 Gy致死剂量照射,照射后4 h经尾静脉移植绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)转基因小鼠骨髓细胞建立嵌合小鼠模型,移植后1月和6月取小肠标本石蜡包埋。使用GFP抗体鉴定GFP阳性供体细胞在小肠上皮的表达情况,并使用GFP抗体和细胞角蛋白(PCK)抗体进行双标以判断BMDSCs是否分化上皮细胞,同时结合绒毛蛋白(Villin)和GFP的免疫荧光双标及连续切片染色肠道特异转录因子CDX2和GFP来分析骨髓来源细胞是否分化为肠道功能性上皮细胞。结果供体骨髓来源细胞在嵌合鼠的骨髓和小肠上皮层中均有定植,且小肠上皮中GFP阳性细胞能够同时表达PCK、Villin和CDX2。结论供体骨髓来源干细胞可以在骨髓嵌合小鼠的肠上皮定植,并分化为具有正常功能的小肠上皮细胞。
- 刘登群王锋超董世武王连友徐辉冉新泽粟永萍
- 关键词：肠上皮细胞转分化
- 供体骨髓细胞在放射损伤肠道中的迁移定植和促修复作用研究
- 2017年
- 目的研究供体骨髓细胞(donor bone marrow cells,d BMCs)在全身放射损伤小鼠肠道内的迁移定植规律和对肠道放射损伤的促修复作用。方法将60只6~8周龄C57BL/6小鼠进行10 Gy全身照射后随机分为移植组和对照组。比较两组小鼠的存活率,免疫组化分析d BMCs在骨髓和肠道内的定植规律,免疫荧光双染鉴定早期植入肠道内的d BMCs表型。HE染色和Brdu免疫组化分析d BMCs对放射损伤肠道的促修复作用。结果实验后第14天,移植组小鼠的存活率为95%。d BMCs同时向受体骨髓和肠道迁移定植。移植早期d BMCs首先定植于肠道固有层底部并向上迁移,最终填充全部固有层。早期植入的骨髓细胞中含有Sca-1阳性造血干细胞。d BMCs可缓解放射所致肠黏膜固有层水肿,促进肠道干细胞增殖并增加肠隐窝密度。移植早期d BMCs不形成肠上皮细胞,稳定嵌合后可形成骨髓来源肠上皮细胞。结论 d BMCs在移植后早期即向肠道迁移定植并促进放射所致肠道损伤的修复重建过程。
- 刘登群王锋超王军平史春梦李蓉冉新泽粟永萍
- 关键词：肠道骨髓移植干细胞
- 研究生助教参加防原医学实验教学的实践与思考被引量：9
- 2009年
- 实验教学是防原医学教学的重要组成部分，加强实验教学有利于培养学员实际操作能力、综合分析能力和创新性思维能力。当前研究生担任实验助教在高校正逐步开展，但存在很多问题。从研究生的角度，对实验教学设立研究生助教的作用和意义，存在的问题及对策作初步探讨。
- 王明科邹仲敏罗成基王锋超
- 关键词：防原医学实验教学
- 新基因RS1在辐射损伤小鼠的组织表达谱研究
- 2003年
- 目的 探讨新基因RS1在辐射损伤小鼠的组织表达谱情况 ,为RS1的克隆和功能研究提供更多的线索。方法 利用半定量RT PCR的方法研究RS1在辐射损伤小鼠肠上皮、肝、肾、脾脏的表达情况 ,利用原位杂交的方法观察RS1在辐射损伤小鼠肝、肾、脾脏和心肌的表达情况。结果 RS1在辐射损伤小鼠除在肠上皮表达以外 ,在肾、肝、脾等多处表达 ,其中脾脏和肾脏的表达较高。结论 RS1具有广泛的组织表达谱。可以利用肾脏和肝脏来源的 。
- 王锋超高京生粟永萍王军平闫国和刘晓宏章波
- 关键词：组织表达谱
- 细胞分化程度决定小鼠小肠上皮细胞及分子水平的电离辐射应答
- 本文研究观察了电离辐射诱导的小鼠小肠上皮DNA损伤和修复情况，旨在阐明在不同分化阶段的细胞受到电离辐射损伤后在细胞水平和分子水平的应答及其生物学意义。
- 程晋王锋超陈俊杰赵吉清粟永萍邹仲敏
- 关键词：细胞分化脱氧核糖核酸
- 文献传递
- 阿伐他汀对辐射致血管内皮细胞损伤的保护作用研究
- 2009年
- 目的观察阿伐他汀对血管内皮细胞（VEC）血栓调节素（TM）表达的影响和辐射损伤的防护作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞和主动脉内皮细胞，用阿伐他汀10μmol／ml作用于生长期内皮细胞1h，分别经γ射线照射2和25Gy，24h后检测VEC的TM表达、蛋白C含量及细胞形态学变化。结果阿伐他汀处理后24h，正常对照组VEC表面TM表达水平迅速提高了77％（t=27．395，P=0．000），2和25Gy照射组分别提高59％（t=26．420，P=0．000）和61％（t=58．065，P=0．000）。2和25Gy照射后，蛋白C含量比正常VEC组下降23％和34％，但阿伐他汀处理后分别比各自对照组增加79％和76％。照后24h，阿伐他汀处理可使2和25Gy照射组VEC凋亡率分别降低6％和16％（t=4．178，P：0．006；t=17．863，P=0．000）。结论阿伐他汀可显著增强VEC的TM表达，激活蛋白C的形成，从而增强内皮细胞抗凝血与抗炎功能，并有效减轻辐射所致的内皮细胞损伤。
- 冉新泽郑怀恩王锋超冉曦王艾平韩京张彦琦陈军
- 关键词：血管内皮细胞阿伐他汀血栓调节素蛋白C
