甄诚
- 作品数：13 被引量：15H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院国家生物医学分析中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
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- 表皮生长因子效应评价细胞模型的建立
- 2011年
- 为了筛选表皮生长因子(EGF)信号通路的未知调控分子,利用人正常乳腺上皮细胞系MCF10A建立了EGF效应评价模型,包括细胞增殖、迁移以及细胞周期的进程等。结果显示,EGF能有效促进MCF10A细胞的增殖。饥饿同步化后,EGF能促进细胞从G1期进入S期,开始DNA的合成。此外,Transwell实验显示EGF能明显促进MCF10A细胞的迁移。
- 陈亮穆蕊甄诚高彦飞李腾于鸣巩伟丽李爱玲
- 关键词：表皮生长因子细胞周期
- ROCK1与CD40相互作用的质谱分析及在CD40信号通路中功能的初探
- 2010年
- 为鉴定和验证ROCK1和CD40的相互作用,探索ROCK1在CD40通路中可能发挥的作用,应用HD质谱分析ROCK1和CD40的相互作用,用免疫共沉淀实验验证其相互作用,用ROCK1抑制剂研究ROCK1对CD40通路的影响。结果ROCK1与CD40存在相互作用;并参与CD40介导的信号通路。说明ROCK1能与CD40发生相互作用,为CD40信号通路的研究提供了新的线索。
- 秋昕方迪峰高彦飞甄诚满江红梁冰周涛李卫华
- 关键词：CD40质谱相互作用信号通路
- 利用Oris技术观察多种因素对人乳腺癌细胞迁移的影响被引量：2
- 2011年
- 为分析细胞生长的表面材质和细胞因子等不同刺激因素对人乳腺癌细胞二维迁移的影响,保证实验的可重复性,使用新型的Oris细胞迁移分析技术分析了Ⅰ型胶原、Matrigd和TNF-α等因素作用下运用动特征的变化,实验结果表明Ⅰ型胶原能够促进MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞的迁移,而Matrigel对细胞迁移无明显影响。同时实验证明TNF-α对MDA-MB-231细胞的迁移有明显的促进作用。上述研究结果表明表面材质和细胞因子等刺激因素均能够影响乳腺癌细胞的迁移特性。实验同时表明Oris技术稳定可靠操作简便,具有良好的应用前景。
- 甄诚陈亮穆蕊巩伟丽柏兆方王芊艺满江红
- 关键词：细胞迁移TNF-Α
- 基于GST-pull down的小G蛋白Rac1活性检测体系的建立被引量：1
- 2011年
- 目的:根据人PAK1基因的p21结合结构域(PBD)能够特异结合GTP-Rac1的特性,构建GST-PBD原核表达质粒,并利用GST-pull down方法检测真核细胞内小G蛋白Rac1的活性。方法:将人PAK1基因的PBD结构域克隆到pGEX原核表达载体上,经诱导纯化得到GST-PBD融合蛋白,并通过GST-pull down实验评估该方法的特异性和准确性。结果:pGEX-PBD质粒构建成功;纯化得到的GST-PBD融合蛋白能够特异性地与激活形式的Rac1(GTP-Rac1)结合,并且能够准确反映血小板衍生生长因子刺激下细胞内Rac1的激活过程。结论:GST-PBD融合蛋白及其整套GST-pull down检测体系能方便有效地检测细胞内Rac1的活性。
- 甄诚陈亮柏兆方王芊艺满江红
- 关键词：RAC1小G蛋白
- Gankyrin对乳腺癌转移的影响及其相关机制研究
- 乳腺癌是一种严重危害妇女健康的恶性肿瘤,每年全世界约有120万妇女患乳腺癌,占女性所有肿瘤发病数的18%。同时乳腺癌也是最易发生转移的恶性肿瘤之一,乳腺癌的转移已经成为乳腺癌患者致死的主要原因。因此研究乳腺癌转移的相关机...
- 甄诚
- 关键词：乳腺癌肿瘤转移迁移
- 文献传递
- 磷酸酶PPM1G与IKKi相互作用下调IRF的转录活性
- 2011年
- 为了研究磷酸酶PPM1G对IRF信号通路的影响,首先在真核细胞中成功表达了HA-PPM1G蛋白质。应用双荧光报告系统,研究了PPM1G对IRF信号通路的影响。结果显示,过表达PPM1G能够显著抑制IKKi激活的IRF转录活性。进一步免疫共沉淀的实验结果表明,PPM1G和IKKi在细胞内存在相互作用。
- 陈亮穆蕊甄诚高彦飞李腾周杰于鸣巩伟丽张维娜
- 关键词：IRF转录活性
- GGT1基因的真核表达载体构建及其表达定位被引量：2
- 2010年
- 构建GGT1重组真核表达载体,观察GGT1在COS7细胞中的定位。利用PCR技术扩增GGT1全长基因,经HindⅢ和EcoRⅠ酶切后连接入pEGFP-N1真核表达载体。将构建完成的重组表达质粒转染入COS7细胞,利用激光共聚焦显微镜观察GGT1在细胞中的定位。构建载体经双酶切和序列测定证实重组载体包含有正确的GGT1编码序列。激光共聚焦显微镜观察到,整个细胞内弥散绿色荧光,绿色荧光分布于COS7细胞浆中,提示GGT1定位于细胞浆中。成功构建人pEGFP-N1-GGT1真核表达载体,检测到GGT1定位于哺乳细胞的细胞浆中,为GGT1的功能研究提供了线索。
- 马骞甄诚满江红顾跃西巩伟丽李爱玲周涛
- 关键词：真核表达
- 体外反应体系中APC/C活性及相关研究
- 2011年
- 为利用体外反应体系研究纯化的细胞周期后期促进复合物(APC/C)相关的分子事件,以其底物泛素化为检测指标,分别从来源细胞裂解液浓度,不同底物间泛素化强度,以及与纺锤体检查点复合物的解离等几方面进行了研究。结果显示,由浓度高的细胞裂解液纯化出的APC/C活性高,其对底物Geminin的泛素化活性较Cyclin B高,在APC/C活性由被抑制到释放过程中,APC/C与Mad2,BubR1结合减少且Cdc20泛素化增强。
- 高彦飞李腾常艳王玉博穆蕊陈亮甄诚韩秋影于鸣巩伟丽张维娜李慧艳
- 关键词：底物活性解离
- 高内涵筛选NF-κB信号通路的技术体系建立被引量：7
- 2011年
- NF-κB是参与免疫调节、炎症反应、肿瘤发生等过程重要的转录因子,在TNFα、IL-1β、LPS等因子诱导下NF-κB发生核转位并激活其转录活性。尝试利用高内涵筛选(High Content Screening,HCS)和RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术建立NF-κB核转位高通量筛选体系,该体系的应用将有助于发现新的NF-κB信号通路调节因子,为免疫与肿瘤的机制研究提供线索。
- 穆蕊李腾高彦飞甄诚陈亮于鸣巩伟丽李慧艳
- AWP1抑制TNFα诱导的NF-κB转录活性
- 2011年
- AWP1含有A20样锌指蛋白结构域。在人乳腺文库中克隆了AWP1 cDNA序列。双荧光报告基因检测系统证明过表达AWP1抑制TNFα诱导的NF-κB转录激活,并且AWP1与TNFα受体复合物中的TRAF2、IKKγ存在外源相互作用,为AWP1抑制TNFα信号通路的机制研究提供线索。
- 穆蕊高彦飞陈亮李腾甄诚于鸣巩伟丽潘欣夏晴
- 关键词：TNFΑNF-ΚB
