田厚文
- 作品数：76 被引量：213H指数：7
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HPV 16型E7E6融合蛋白基因、表达载体、方法、细胞和用途
- 本发明提供一种编码HPV 16型E7E6融合蛋白的基因、表达载体、方法、细胞和用途。本发明利用重组腺病毒，将经修饰失去转化活性的E6、E7蛋白基因融合，并根据融合蛋白的氨基酸序列进行哺乳细胞密码子优化改造，使之在哺乳细胞...
- 田厚文任皎赵莉高见冯靖庞正吴小兵阮力
- 文献传递
- HPV6型L2N120E7E6融合蛋白基因、表达载体、方法、菌株和用途
- 本发明提供一种编码HPV 6型L2N120E7E6融合蛋白的基因、表达载体、方法、菌株和用途。本发明利用原核表达载体，将人乳头瘤病毒(HPV)6型L2N端120个氨基酸、E7蛋白、E6蛋白融合，并根据融合蛋白的氨基酸序列...
- 田厚文赵莉任皎庞正冯靖张忠献阮力谭文杰
- 密码子优化的HPV16 L2E7基因在大肠杆菌中高效表达被引量：4
- 2007年
- 目的提高HPV16L2E7融合基因在大肠杆菌中的表达水平,为中试研究提供高表达量的疫苗候选株。方法根据大肠杆菌偏爱密码子,利用Synthetic Gene Designer软件对L2E7全基因进行密码子优化,将分段合成的基因分部插入到pET9a中,经酶切和测序鉴定无误后转化BL21(DE3+)中,用异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。表达的融合蛋白进行SDS-PAGE胶和Western blot鉴定。同时还进行梯度实验分别对诱导的温度、时间和IPTG诱导时菌体浓度进行优化,并对蛋白的纯化方案进行摸索。结果优化后的pET9aSL2E7AB在大肠杆菌中得到高效表达,诱导条件优化后的目的蛋白占全菌60%左右。结论成功得到了具有较高表达水平的疫苗候选株。
- 高见赵莉任皎张卉阮力田厚文
- 关键词：人乳头瘤病毒密码子优化大肠杆菌
- HPV16型E7复制型DNA疫苗诱发的抗肿瘤免疫反应被引量：11
- 2003年
- 为了研制有效的疫苗 ,用于HPV16型重度感染和与其感染相关的宫颈癌晚期病人手术后的免疫治疗 ,用复制型DAN疫苗载体 pSCA1,在其CMVIE启动子之下插入修饰的HPV16型E7基因mE7- 3( 2 4G、2 6G、6 7R) ,构建成 pSCA1mE7- 3复制型DNA疫苗。以重组质粒免疫C5 7BL/ 6小鼠 ,检测诱发的特异性CTL活性 ;将免疫后的小鼠用TC - 1肿瘤细胞攻击 ,观察免疫保护效果。实验结果显示 :pSCA1mE7- 3复制型DNA疫苗能诱导小鼠产生针对TC - 1肿瘤细胞的特异性CTL反应 ;复制型DNA疫苗免疫后的小鼠能耐受 1× 10 4 TC - 1细胞的攻击 ,成瘤时间推迟 ,并且成瘤率明显下降 ,部分小鼠得到保护能免受肿瘤攻击。因此pSCA1mE7- 3复制型DNA疫苗可作为HPV16相关肿瘤的癌前病变及中晚期病人术后免疫治疗的候选疫苗。
- 田厚文韩立群任皎骆卫峰陆振华阮力
- 关键词：人乳头瘤病毒DNA疫苗免疫治疗
- 表达HPV16 L1、L2和E7蛋白的非复制重组痘苗病毒的构建
- 2008年
- 目的构建防治宫颈癌的表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1,L2E7蛋白的非复制重组痘苗病毒疫苗株。方法以痘苗病毒为载体,利用同源重组技术筛选共表达HPV16L1,L2E7蛋白的重组痘苗病毒,用PCR和Western blot技术进行鉴定。结果该病毒在鸡胚成纤维细胞(CEF)中连续传代15代,经PCR检测证实病毒基因组中有HPV16L1,L2E7目的基因插入,Western blot检测证实病毒可以稳定表达L1和L2E7蛋白。结论构建的病毒NTVJL1L2E7可以在真核细胞中表达HPV16L1和L2E7蛋白,可以作为治疗和预防HPV16相关疾病的候选疫苗。
- 范江涛陈心秋黄薇田厚文
- 关键词：人乳头瘤病毒痘苗病毒
- 表达野生型和突变型HPV16-E7重组痘苗病毒诱发的抗肿瘤免疫反应被引量：5
- 2001年
- 目的 选出适合于治疗性疫苗研制的HPV16E7突变基因。方法 对表达野生型和突变型E7蛋白的重组痘苗病毒所诱发的细胞免疫反应和抗肿瘤活性进行比较研究。结果 表达突变型ME7 1(2 4G2 6G)的重组痘苗病毒VmE7 1与表达野生型E7的VwE7相同 ,可诱发特异性抗体和CTL的产生 ,明显推迟成瘤时间并且保护部分小鼠抵抗肿瘤细胞的攻击 ;而表达突变型ME7 2(2 4G2 6G91G)的重组痘苗病毒VmE7 2免疫小鼠后难以有效的激发细胞免疫反应 ,在抗肿瘤移植实验中也不具明显的免疫保护作用。结论 E7突变基因ME7 1可作为候选基因用于HPV16治疗性疫苗的研制。
- 职慧军韩立群任皎田厚文骆卫锋梁雨阮力
- 关键词：乳头状瘤病毒宫颈肿瘤
- HPV16型L2N120E7E6融合蛋白、基因、制备方法及用途
- 本发明涉及一种在大肠杆菌中高效表达的人乳头瘤病毒16型L2N120E7E6重组蛋白的密码子优化基因，将其插入原核表达载体pET9a，优化基因获得高效表达，表达水平占全菌的50％，表达蛋白经纯化后免疫小鼠，实验结果表明该蛋...
- 田厚文赵莉毛子安庄昉成任皎高见冯靖庞正姜云水阮力
- 二代人乳头瘤病毒预防性疫苗的研究进展
- 2011年
- 人乳头瘤病毒（Human papillomavirus,HPV）是一种嗜黏膜和皮肤上皮的双链DNA病毒,与多种疾病的发生相关.根据致病性将其分为高危型和低危型2种,高危型感染与宫颈癌及癌前病变的发生密切相关,有：HPV-16、-18、-45、-31、-33、-52、-58等;其中70%的宫颈癌与HPV-16/18型有关.低危型感染与生殖器疣和宫颈低级鳞状上皮增生病变的发生密切相关,有：HPV-6、-11、-40、-42等,其中6和11型的感染与90%以上的生殖器疣和宫颈低级鳞状上皮增生病变的发生密切相关.
- 张忠献田厚文
- 关键词：人乳头瘤病毒预防性疫苗双链DNA病毒鳞状上皮增生病变生殖器疣
- 不同佐剂对人乳头瘤病毒16型L2E7E6蛋白免疫效果的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:研究CpG佐剂、弗氏佐剂、聚肌胞苷酸佐剂及左旋咪唑、西米替丁作为佐剂对人乳头瘤病毒16型L2E7E6融合蛋白在小鼠体内产生的免疫效果的影响。方法:以单独蛋白组、蛋白加各佐剂组分别肌肉注射免疫C57BL/6小鼠,检测不同佐剂诱发小鼠产生的体液免疫和细胞免疫应答水平,并观察其对小鼠肿瘤生长的抑制作用。结果:各免疫组均能检测到高滴度的抗L2、E7、E6蛋白IgG抗体(以IgG1为主),其中弗氏佐剂能显著提高E6蛋白的IgG和IgG1抗体水平和E7蛋白的IgG1抗体水平(P<0.05),CpG佐剂明显提高了E7蛋白的IgG2a抗体水平(P<0.01);而西米替丁佐剂则降低了E7抗原的IgG抗体水平(P<0.05);同时可以检测到CpG佐剂组能诱发小鼠产生针对E7、E6较强的细胞免疫反应,且能抑制70%的荷瘤小鼠肿瘤生长;此外弗氏佐剂与聚肌胞苷酸佐剂可产生较弱的针对E7肽的细胞免疫反应,能延缓荷瘤小鼠肿瘤形成时间,与单纯蛋白组相比差异显著(P<0.05)。结论:CpG佐剂、弗氏佐剂和聚肌胞苷酸佐剂都能提高人乳头瘤病毒16型L2E7E6融合蛋白的细胞免疫反应水平和抑制肿瘤生长能力,其中CpG佐剂效果较好,为促进该蛋白作为疫苗的研发提供了实验依据。
- 任皎赵莉高孟姜云水郝明强谭文杰田厚文阮力
- 关键词：人乳头瘤病毒佐剂治疗性疫苗
- 人乳头瘤病毒16型治疗性疫苗联合免疫效果研究被引量：1
- 2013年
- 目的:探索联合免疫策略对人乳头瘤病毒16型(HPV16)治疗疫苗L2E7E6和rAdE7E6的免疫效果的影响。方法:用L2E7E6融合蛋白和重组腺病毒rAd5E7E6以不同的联合免疫程序分别免疫C57BL/6小鼠,通过检测其诱发的体液免疫和细胞免疫反应,以及观察其在HPV16小鼠治疗模型中的抑瘤效果,比较分析联合免疫对小鼠免疫反应及治疗肿瘤效果的影响。结果:异源性联合免疫组均可检测到较高水平的体液免疫,该2组针对E6、E7特异性的T细胞免疫反应与同源性联合免疫2组相比明显提高,并在小鼠肿瘤治疗模型中能抑制肿瘤生长。结论:异源性联合免疫策略可明显提高HPV16 L2E7E6及rAd5E7E6疫苗的T细胞免疫反应,且有效治疗HPV16相关肿瘤,为HPV16L2E7E6及rAd5E7E6疫苗的应用提供了实验基础。
- 任皎姜云水高孟赵莉庄昉成谭文杰阮力毛子安田厚文
- 关键词：人乳头瘤病毒宫颈癌免疫治疗联合免疫
