祝昊丹
- 作品数：75 被引量：64H指数：5
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金江苏省农业科技自主创新基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 重组蛋白和猪流行性腹泻疫苗组合物
- 本发明提供一种重组蛋白和猪流行性腹泻疫苗组合物。重组蛋白是由来自猪流行性腹泻病毒S蛋白(Spike，纤突蛋白)的截短片段与猪IgG的Fc片段串联而成的融合蛋白，S蛋白的截短片段优选选自S蛋白的S1亚基中具有唾液酸结合活性...
- 李彬范宝超时丹怡周金柱郭容利何孔旺赵永祥朱雪蛟李澧汪伟王丹丹祝昊丹
- 文献传递
- 猪链球菌2型丝氨酸/苏氨酸磷酸酶的鉴定和特性分析被引量：2
- 2014年
- 利用PCR扩增猪链球菌2型强毒株SS2-1丝氨酸/苏氨酸磷酸酶(STP)的编码基因,克隆到表达载体pET-30a(+),在大肠杆菌BL21中进行原核表达,获得重组蛋白质rSsSTP。重组蛋白质经His蛋白质层析柱纯化后,利用pNPP分析rSsSTP的酶活性。结果显示rSsSTP为Mn2+依赖的磷酸酶,最适离子浓度为2 mmol/L,最佳反应温度为37℃,最佳pH值为8.0。
- 祝昊丹倪艳秀周俊明俞正玉茅爱华吕立新何孔旺
- 关键词：猪链球菌2型丝氨酸STREPTOCOCCUSSUIS
- 猪链球菌3型分离菌的生物学特性及致病性被引量：1
- 2020年
- 为研究猪链球菌3型(Ss3)分离菌的生物学特性及致病性,对疑似Ss进行培养、染色、生化试验、猪链球菌PCR鉴定、血清分型PCR鉴定、多位点序列分型(MLST型)PCR鉴定,并对小鼠和仔猪进行致病性试验。结果显示,3株分离菌(分别命名为JSHZ菌株、GD7菌株、H30菌株)均呈革兰氏阳性,Ss PCR鉴定显示为阳性,血清分型PCR结果表明分离到的菌株为Ss3,序列型(ST)分别属于ST27型(JSHZ菌株)、ST1004型(GD7菌株)和ST 117型(H30菌株);3株分离菌的生化特性与猪链球菌相符;3株分离菌经腹腔注射均可致死Balb/C小鼠,半致死量(LD50)分别为2.0×107CFU/ml、3.5×107CFU/ml和2.5×108CFU/ml。选择3株分离菌中毒力较强的JSHZ菌株进行仔猪致病性试验,感染仔猪会出现明显的关节红肿、跛行,体温多数升高至40.5~41.8℃,精神萎靡,食欲减少等症状;高剂量(每头仔猪注射JSHZ菌数6.0×109 CFU)处理可致仔猪出现食欲废绝、神经症状,甚至濒死,并在其脑组织中分离到Ss3。本研究结果为进一步开展Ss3的防控研究奠定了基础。
- 肖琦赵霞玲钱雯娴郭佳慧檀济敏俞正玉汪伟孙珂倪艳秀祝昊丹周俊明姚火春范红结牛家强索朗斯珠何孔旺
- 关键词：生物学特性
- 规模化猪场传染性胸膜肺炎放线杆菌血清5型的分离与鉴定
- 从江苏镇江某猪场出现呼吸困难、肺脏有出血性纤维渗出性病变的死猪中分离出1 株革兰阴性球杆菌,PCR 鉴定该菌为猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清5 型。小鼠毒力试验显示其有较强的致病力。药敏试验显示该分离菌株对氟哌酸、头孢噻呋...
- 俞正玉周俊明倪艳秀茅爱华祝昊丹吕立新李彬何孔旺
- 关键词：猪传染性胸膜肺炎放线杆菌
- 猪链球菌3型疫苗株及其应用
- 本发明提供猪链球菌3型疫苗株及其应用，涉及兽用疫苗领域。猪链球菌3型疫苗株，分类命名为猪链球菌3型JSHZ，保藏编号为CCTCC NO:M 2019687。本发明还提供含有所述猪链球菌3型疫苗株的疫苗及该菌株在制备治疗或...
- 肖琦何孔旺俞正玉汪伟倪艳秀祝昊丹周俊明王丹丹温立斌
- SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测类猪圆环病毒P1的引物
- 本发明涉及一种利用SYBR Green I实时荧光定量PCR检测类猪圆环病毒P1的方法，属于分子生物学领域。本发明方法包括特异性引物的设计、标准质粒的构建、实时荧光定量PCR扩增方法的建立和优化、样本DNA提取及结果检测...
- 温立斌何孔旺高晓静王小敏李彬郭容利俞正玉茅爱华倪艳秀张雪寒吕立新周俊明胡屹屹汪伟叶青祝昊丹于洋沈江萍周萍
- 文献传递
- 猪链球菌2型江苏分离株菌毛相关基因特点及菌株毒力鉴定被引量：1
- 2012年
- 利用PCR技术对猪链球菌2型(SS2)江苏分离株的菌毛相关基因进行扩增,根据菌毛相关基因分布特点对菌株分型,并进行动物试验评估。结果 24株SS2中A型占70.8%,B型占29.2%。其中从病猪分离的13株SS2均为A型;而从健康猪扁桃体中分离的11株SS2 A型占36.3%,B型占63.7%。动物试验结果表明A型菌株的毒力强于B型。以上结论说明猪链球菌2型江苏分离株可以根据菌毛相关基因特点进行分型,并利用分型结果来评估菌株的毒力强弱及潜在危害性。
- 虞凤何孔旺肖琦倪艳秀周俊明茅爱华祝昊丹汪伟吕立新俞正玉温立斌张雪寒李彬郭容利王小敏范红结
- 关键词：猪链球菌2型毒力
- 猪链球菌4型GalR蛋白的生物信息学分析及原核表达
- 2021年
- 试验旨在了解猪链球菌4型(Streptococcus suis serotype 4,SS4)转录调控因子GalR蛋白生物学信息并对其进行原核表达。使用相关生物信息学分析网站对SS4 SH1510菌株GalR蛋白进行序列同源性和功能结构域检索,并对信号肽、跨膜区和等电点进行预测;同时,对SS4 SH1510菌株GalR基因进行扩增、原核表达、纯化,并用SDS-PAGE分析重组蛋白的可溶性,用Western blotting鉴定重组蛋白的反应原性。氨基酸序列比对显示,SH1510菌株GalR蛋白与变形链球菌、无乳链球菌、绿脓杆菌、马链球菌兽疫亚种、肺炎链球菌、口腔链球菌及李斯特菌的GalR家族蛋白的氨基酸序列分别具有57%、56%、55%、55%、52%、52%和49%的同源性;结构域检索发现GalR蛋白N-末端具有螺旋-转角-螺旋(helix-turn-helix,HTH)基序的小DNA结合结构域,C-末端具有Ⅰ型周质结合蛋白折叠的调节配体结合域,在这两个功能结构域的中间含有一个约18-氨基酸的连接子;GalR蛋白无信号肽,无跨膜区,等电点为5.10。SDS-PAGE分析显示,GalR蛋白绝大部分表达在上清,分子质量为56 ku;Western blotting鉴定结果显示,His单克隆抗体和粗制SS4多克隆抗体兔血清能特异性识别可溶性GalR蛋白。本研究对GalR蛋白进行了生物信息学分析并成功地表达和纯化了GalR蛋白,为进一步研究GalR蛋白在SS4中的作用奠定了基础。
- 孙珂祝昊丹周俊明王丹丹俞正玉吕立新何孔旺李彬倪艳秀
- 关键词：原核表达
- 胞内劳森氏菌间接ELISA抗体检测方法的建立及应用被引量：1
- 2022年
- 为建立胞内劳森氏菌(LI)抗体的间接ELISA检测方法,本研究构建了含有LI外膜蛋白基因的重组质粒pET32-LI1022并进行原核表达。结果显示LI1022基因在BL21(DE3)宿主菌内以可溶性表达重组LI1022蛋白(rLI1022),western blot结果显示rLI1022具有较好的反应原性,可作为建立间接ELISA检测方法的包被抗原。进一步经Ni柱纯化获得纯化r LI1102,以其为包被抗原,对ELISA条件进行优化,结果显示纯化的rLI1022以4.69 ng/孔4℃过夜包被最佳;血清最佳反应条件为1:100稀释,37℃作用1 h;羊抗猪IgG-HRP最佳反应条件为1:10000稀释,37℃作用1 h;25℃TMB底物显色15 min。对建立的间接ELISA方法的特异性、敏感性、重复性进行分析,结果显示包被抗原与PRRSV、PRV、FMDV、PEDV等阳性血清均无交叉反应,仅可特异性检测LI抗体;当LI阳性血清稀释倍数为1:400时仍为阳性,表明该方法敏感性较好;批内、批间重复性试验变异系数均小于10%。与国外商品化ELISA检测试剂盒对比,二者的符合率达94.44%;利用所建立的间接ELISA方法对江苏部分地区319份临床猪血清样品进行检测,其中LI阳性检出率为87.77%,表明LI在江苏猪群中普遍存在。本研究首次建立了检测LI的间接ELISA方法,为临床LI血清流行病学调查提供了可行技术手段。
- 王丹丹周俊明倪艳秀祝昊丹朱雪蛟周金柱李彬
- 关键词：胞内劳森氏菌间接ELISA抗体检测
- 一种口蹄疫疫苗粘膜免疫增强剂、灭活疫苗及其制备方法
- 本发明提供一种口蹄疫疫苗粘膜免疫增强剂、灭活疫苗及其制备方法，属于生物制药领域。该粘膜免疫增强剂含有质量比为（0.2‑4）:1的非致病性大肠杆菌鞭毛蛋白和不耐热肠毒素B亚基，所述非致病性大肠杆菌鞭毛蛋白、不耐热肠毒素B亚...
- 张雪寒孙小涵张碧成郭芸芸俞正玉祝昊丹汪伟何孔旺
- 文献传递
