程刚
- 作品数：7 被引量：48H指数：3
- 供职机构：中山大学达安基因诊断中心更多>>
- 发文基金：广东省科技攻关计划广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 鸡胚低分子提取物对D-半乳糖拟衰老小鼠抗氧化系统的影响被引量：2
- 2008年
- 目的研究鸡胚低分子提取物对D-半乳糖诱导的衰老小鼠抗氧化系统的影响。方法以孵化16 d的鸡胚为原料经酸碱水解、反复酶解、超滤等精制鸡胚低分子提取物。实验小鼠(BALB/C)随机分为正常对照组、模型组、低及高剂量用药组,每组12只。小鼠皮下注射D-半乳糖造成亚急性衰老模型,同时在低、高两种剂量用药组分别给予模型鼠鸡胚低分子提取物。检测各组小鼠红细胞与肝、脑组织内SOD与GSH-Px酶活性及MDA含量。结果模型组红细胞与肝、脑组织内的SOD与GSH-Px酶活性较正常对照组均明显降低(P均<0.01),而MDA含量显著升高(P均<0.01)。鸡胚低分子提取物给药组与模型组比较,可增强红细胞与肝、脑组织内SOD与GSH-Px酶活性(P均<0.05),减少MDA含量(P均<0.05)。结论鸡胚低分子提取物有增强D-半乳糖拟衰老小鼠体内抗氧化酶的活性,抑制过氧化脂质的作用。
- 陈姝何蕴韶程刚高劲松
- 关键词：鸡胚D-半乳糖衰老抗氧化
- 食品中副溶血弧菌荧光定量PCR方法快速检测被引量：31
- 2005年
- 目的利用荧光定量PCR技术,建立食品中副溶血弧菌污染的快速、准确的定量检测方法。方法根据副溶血弧菌gyrase基因序列设计合成副溶血弧菌FQ-PCR诊断试剂盒,研究其灵敏度、特异性,并应用于模拟食品样本检测。结果在31株不同菌株的检测中,8株副溶血弧菌结果均为阳性,而其他23株弧菌科及其他菌属的菌株均为阴性;纯菌条件下定量检测低限10 cfu/ml;对模拟样本直接进行,检测低限为103cfu/g,经培养增菌后,检测低限则达到2 cfu/g。结论该方法特异性强、敏感性高,操作简便快速,检验周期仅需36 h,扩增与检测在封闭单管进行,可避免常规PCR方法易污染缺陷,具有很好的推广应用前景。
- 翁文川焦红王方金程刚王伟毅谢钧宪
- 关键词：荧光定量PCR副溶血弧菌
- 食品中副溶血弧菌FQ-PCR快速检测方法的研究被引量：7
- 2005年
- 目的利用荧光定量PCR技术,研制适合各层次实验室使用的,快速、准确地检测鉴定食品中副溶血弧菌污染的定性、定量方法。方法根据副溶血弧菌gyrase基因序列,设计并合成特异性引物和荧光标记探针,将扩增后的特异片断制成阳性模板,绘制标准曲线。以副溶血弧菌菌株8株及同源、非同源参考菌株24株,做特异性检测;将阳性污染菌按梯度加入阴性样品为模拟样本,做敏感性检测。同时使用PE7000型定量PCR仪和国产DA620微量荧光检测仪检测。结果该方法有良好的特异性:8株副溶血弧菌结果均为阳性,而其它24株菌株均为阴性(其中8株是弧菌科,16株分别来自不同的菌属);该方法有良好的敏感性:阳性模板浓度与定量曲线循环阈值之间相关系数达到0.9871。在纯培养的条件下,其检测低限为10cfuml。对32个模拟样本直接进行定量检测,则检测低限在102cfug;经过24小时增菌培养,检测低限可达2cfug。结论该方法特异性强、敏感性高,操作简便快速,能避免常规PCR方法易污染的缺陷,在国产仪器上测试同样取得较好的敏感性和特异性,便于基层实验室使用,具有很好的推广应用前景。
- 焦红翁文川王方金程刚王伟毅谢钧宪
- 关键词：定量检测试剂盒
- 鸡胚低分子提取物对D-半乳糖拟衰老小鼠线粒体DNA缺失突变的影响
- 2008年
- 目的探讨鸡胚低分子提取物对D-半乳糖诱导的衰老小鼠线粒体DNA（mtDNA）缺失突变的影响。方法采用D-半乳糖诱导制备衰老小鼠模型并用鸡胚低分子提取物处理。用聚合酶链反应技术和琼脂糖凝胶电泳检测mtDNA缺失片段，密度扫描技术对扩增片段进行相对定量。缺失片段构建质粒后，直接测序进行鉴定。结果全部小鼠的肝、大脑皮质与海马组织内均存在4239bp的mtDNA缺失片段。衰老模型鼠不同组织mtDNA缺失的相对百分含量均明显高于正常对照组（均为P〈0．01），而鸡胚低分子提取物可明显降低模型鼠肝、大脑皮质与海马组织内mtDNA缺失的比例（均为P〈0．05）。肝组织中mtDNA缺失的比例较大脑皮质和海马组织更高。结论4239bp的mtDNA缺失片段普遍存在于小鼠中，鸡胚的低分子提取物可以明显减少D-半乳糖拟衰老小鼠4239bp的mtDNA缺失的发生。
- 陈姝何蕴韶程刚高劲松
- 关键词：半乳糖衰老突变
- 用FQ-PCR方法快速检测水产品中副溶血弧菌被引量：7
- 2004年
- 〔目的〕采用荧光定量PCR技术 ,研制适合各层次实验室使用的 ,快速、准确地检测与鉴定食品中副溶血弧菌污染的定性、定量检测试剂盒。〔方法〕根据副溶血弧菌gyrase基因序列 ,设计并合成特异性引物和荧光标记探针 ,将扩增后的特异片断制成阳性模板 ,绘制标准曲线。以副溶血弧菌菌株 8株及同源及非同源参考菌株 2 4株 ,做特异性检测 ;将阳性污染菌按梯度加入阴性样品为模拟样本 ,做敏感性检测。同时使用PE70 0 0型定量PCR仪和国产DA6 2 0微量荧光检测仪检测。〔结果〕该方法有良好的特异性 :8株副溶血弧菌结果均为阳性 ,而其他 2 4株菌株均为阴性 (其中 8株是弧菌科 ,其它 15株分别来自不同的菌属 ) ;该方法有良好的敏感性 :阳性模板浓度与定量曲线循环阈值之间具有良好的线性关系 ,相关系数达到 0 .9871。直接进行定量检测 ,则检测低限在 10 2cfu/g;经过 2 4小时增菌培养 ,检测低限可达 2cfu/g。〔结论〕该方法特异性强、敏感性高 ,操作简便快速 ,能避免常规PCR方法易污染的缺陷 ,在国产仪器上测试同样取得较好的敏感性和特异性 ,便于基层实验室使用 ,具有很好的推广应用前景。
- 焦红王方金程刚翁文川王伟毅谢钧宪
- 关键词：水产品副溶血弧菌食品标准
- 鸡胚低分子多肽对D-半乳糖拟衰老小鼠学习记忆的影响被引量：2
- 2008年
- 目的探讨鸡胚低分子多肽对D-半乳糖(Gal)诱导的衰老小鼠学习记忆的影响。方法以孵化16d的鸡胚为原料经酸碱水解、反复酶解、超滤等过程制备鸡胚低分子多肽(LMP)。BALB/c小鼠48只,随机分为对照组、模型组、低分子多肽低剂量、和高剂量干预组,每组12只。模型组及两个干预组颈背部皮下注射80mg/(kgbw.d)Gal诱导衰老模型;对照组皮下注射8ml/(kgbw·d)生理盐水。前两组灌胃20ml/(kgbw·d)生理盐水;后两组分别灌胃10ml/(kgbw·d)和20ml/(kgbw·d)的鸡胚低分子多肽。采用Morris水迷宫观察小鼠学习记忆的行为学变化。结果模型组潜伏期比对照组明显延长(P<0.01),在平台象限游泳距离的百分比明显降低(P<0.01)。鸡胚LMP干预组与模型组比较,可明显缩短潜伏期(P<0.01),提高在平台象限游泳距离的百分比(P<0.01)。结论鸡胚低分子多肽有改善D-半乳糖拟衰老小鼠学习记忆的功效。
- 陈姝何蕴韶程刚高劲松
- 关键词：鸡胚D-半乳糖衰老学习记忆
- Alzheimer病患者外周血HO-1基因表达水平的改变
- 2006年
- 目的建立荧光定量PCR方法检测A lzheim er病(AD)患者外周血中血红素加氧酶1(HO-1)基因的表达水平,并探讨其表达水平的改变与AD发病的关系。方法在HO-1的基因高保守区设计并合成特异性引物和荧光标记探针。将PCR扩增目的片段用AT克隆的方法克隆入T载体,重组质粒经筛选、鉴定后,作为阳性模板,用于标准曲线的制备和样品检测,并用该方法检测30例AD患者和23例正常老年人对照组外周血HO-1基因mRNA水平。结果应用重组质粒制作的定量曲线循环阈值与模板浓度具有良好的线性关系。AD组HO-1基因平均表达水平(7.04×105±5.96×105)cop ies/μg RNA高于对照组(1.62×105±3.31×105)cop ies/μg RNA(P<0.001)。结论建立了荧光定量PCR方法用于检测AD患者外周血HO-1基因的表达水平,具有较好的检测灵敏度和重复性。HO-1在AD患者外周血中的表达有所增加。
- 陈辉刘明杰汪华侨程刚何蕴绍
- 关键词：荧光定量PCRALZHEIMER病血红素加氧酶1基因表达
