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TPX2通过PI3K/Akt信号通路调控肝癌细胞增殖及凋亡被引量：8: 2019年; 目的:探讨爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白(targeting protein for Xenopus kinesin-like protein 2,TPX2)在肝癌细胞中表达及对肝癌细胞增殖和凋亡的调控作用,以及可能的作用机制。方法:应用实时荧光定量PCR法及蛋白质印迹法分别检测正常肝细胞L-02及肝癌Huh7、Hep3B、HepG2和MHCC97-H细胞中TPX2 mRNA及蛋白表达。将靶向TPX 2的重组质粒pMagic4.1-shRNA-TPX2分别转染肝癌Huh7和Hep3B细胞后,应用MTT法检测肝癌细胞的增殖能力,FCM法检测肝癌细胞周期及细胞凋亡率。应用实时荧光定量PCR法检测靶向沉默TPX 2后,肝癌细胞中TPX2、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称Akt)、p21、Bcl-2、c-Myc和Cyclin D1 mRNA表达,及蛋白质印迹法检测TPX2、PI3K、磷酸化-Akt(phosphorylation-Akt,p-Akt)、Akt、p21和Bcl-2蛋白表达。结果:肝癌Huh7、Hep3B、HepG2和MHCC97-H细胞中TPX2 mRNA及蛋白表达水平均明显高于正常肝细胞L-02(P值均<0.01)。重组质粒pMagic4.1-shRNA-TPX2成功转染后,肝癌Huh7和Hep3B细胞中TPX2mRNA及蛋白表达水平均明显下调(P值均<0.01)。靶向沉默TPX 2后,Huh7和Hep3B细胞增殖能力均明显下降(P值均<0.01),细胞周期被阻滞于G0/G1期(P值均<0.01),细胞凋亡率明显增加(P值均<0.01);Huh7和Hep3B细胞中PI3K、Bcl-2、c-Myc和Cyclin D1 mRNA表达水平明显下调(P值均<0.05),PI3K、p-Akt和Bcl-2蛋白表达水平明显下调(P值均<0.05),p21 mRNA及蛋白表达水平均明显上调(P值均<0.01)。结论:TPX2通过PI3K/Akt信号通路调控肝癌细胞增殖及凋亡,有望成为肝癌治疗的潜在靶点。; 黄丹红吴建兵简捷张岩刘利珍; 关键词：肝肿瘤 PI3K/AKT信号通路 TPX2

人参皂苷Rg3对人肝癌细胞Pim-3及Bad凋亡蛋白表达的影响被引量：14: 2008年; 目的:研究人参皂苷Rg3对人肝癌细胞SMMC-7721中Pim-3及磷酸化Bad蛋白pBad(Ser112),pBad(Ser136)表达的影响.方法:用浓度为0、5、10、20、40和80μmol/L的人参皂苷Rg3处理SMMC-7721细胞24h后.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测人参皂苷Rg3对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用,倒置显微镜和流式细胞术观察人参皂苷Rg3对SMMC-7721细胞凋亡的诱导作用,Westernblot方法检测不同浓度人参皂苷Rg3处理后SMMC-7721细胞中Pim-3,pBad(Ser112)和pBad(Ser136)的表达情况.结果:5、10、20、40和80μmol/L的人参皂苷Rg3对SMMC-7721细胞增殖的抑制率分别为4.69%、15.53%、22.17%、50.97%、61.65%.5-80μmol/L的人参皂苷Rg3处理细胞呈现明显的凋亡形态学改变,80μmol/L人参皂苷Rg3处理SMMC-7721细胞24h后,处理组比正常对照组凋亡明显增加,差异有统计意义(16.5%±4.3%vs0.4%±1.3%,P<0.01).人参皂苷Rg3对细胞中Bad总蛋白的表达没有明显影响.Pim-3的表达随人参皂苷Rg3浓度的增加而逐渐减弱,而pBad(Ser112)的表达随人参皂苷Rg3浓度的增加而逐渐增强;pBad(Ser136)不表达.结论:人参皂苷Rg3的抗癌活性与其促进磷酸化Bad蛋白表达有关.; 简捷刘利珍李小燕胡志方王稻黄缘; 关键词：人参皂苷RG3 肝癌凋亡

人参皂苷Rg3对胃癌细胞体外迁移、侵袭及Occludin、ICAM-1的影响: 简捷方念邓峰甘丽红么玲秦健斌李宾

Nimesulide联合奥沙利铂对人肝癌细胞增殖与凋亡的影响被引量：6: 2008年; 目的:探讨选择性环氧合酶-2(cyclooxy-genase-2,COX-2)抑制剂Nimesulide联合奥沙利铂(Oxaliplatin,L-OHP)对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖与凋亡的影响,为肝癌的药物治疗提供依据.方法:预实验筛选Nimesulide有效终浓度与不同浓度L-OHP(0.5、1.0、2.0、5.0mg/L)联合处理肝癌细胞48h;另外选取L-OHP有效终浓度与Nimesulide筛选的浓度单独或联合处理肝癌细胞24h、48h、72h;采用倒置显微镜观察细胞形态学改变,四氮唑盐比色法(MTT法)观察细胞增殖活力的改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果:不同浓度Nimesulide及L-OHP对SMMC-7721表现出一定程度的生长抑制作用,并呈剂量依赖性.Nimesulide(50mmol/L)或L-OHP(1mg/L)单用时可显著抑制SMMC-7721细胞的增殖,选用Nimesulide 50mmol/L与L-OHP(0.5、1.0、2.0、5.0mg/L)联合使用时,联合抑制作用呈现协同作用(Q>1.15).L-OHP 1mg/L、Nimesulide 50mmol/L及两药联合处理SMMC-7721细胞24h、48h、72h,各处理组各时间点对肝癌细胞的抑制作用随着时间的延长而增大,并且两药联合作用有协同作用(Q>1.15).流式细胞仪检测分析发现两种药物均可有效诱导SMMC-7721细胞的凋亡,且在上述浓度联合应用时具协同效应.结论:Nimesulide与L-OHP对人肝癌细胞株SMMC-7721均有抑制增殖和促进凋亡作用,而且两者联合应用有协同作用.; 刘利珍简捷吴建兵黄龙璋史芳; 关键词：NIMESULIDE 奥沙利铂细胞增殖凋亡

含奥曲肽方案对出血性十二指肠球部溃疡患者幽门螺杆菌根除的疗效被引量：16: 2018年; 目的探讨含奥曲肽方案对幽门螺杆菌(Hp)感染的出血性十二指肠球部溃疡(DU)患者的Hp根除效果,以降低Hp感染率及DU再出血率。方法选取2014年01月至2016年12月132例Hp阳性的出血性十二指肠溃疡住院患者为研究对象,将患者按照不同治疗方案分为标准三联组、铋剂组及奥曲肽组,标准三联组患者口服奥美拉唑、克拉霉素、阿莫西林,铋剂组、奥曲肽组分别在标准三联组方案基础上增加枸橼酸铋钾、奥曲肽,14 d的疗程结束后,各组继续口服奥美拉唑4周,治疗结束后4周复查胃镜检查及H.pylori检测,比较各组患者的Hp根除率、DU愈合率和再出血率。结果 126例患者按方案完成治疗;标准三联组、铋剂组、奥曲肽组ITT根除率分别为72.7%、88.1%和89.1%,PP根除率分别为78.0%、92.5%和91.1%,奥曲肽组和铋剂组的ITT和PP根除率显著高于标准三联组,差异有统计学意义(P <0.05),奥曲肽组和铋剂组间的ITT和PP根除率差异无统计学意义(P> 0.05)。奥曲肽组和铋剂组的DU愈合总有效率显著高于标准三联组,差异有统计学意义(P <0.05),奥曲肽组和铋剂组间的DU愈合率差异无统计学意义(P> 0.05)。标准三联组和铋剂组溃疡再出血率高于奥曲肽组,差异有统计学意义(P <0.05)。标准三联组、铋剂组、奥曲肽组的不良反应发生率分别为14.6%、20%和15.6%,铋剂组显著高于标准三联组和奥曲肽组,但差异无统计学意义(P> 0.05)。结论含奥曲肽方案可以提高十二指肠球部溃疡的Hp根除率,疗效与铋剂四联方案相当,且溃疡再出血率低、不良反应少,适合于消化性溃疡伴出血的住院患者。; 程飞甘厦郑丽简捷; 关键词：奥曲肽幽门螺杆菌十二指肠球部溃疡

着色性干皮病D组蛋白对胰腺癌PANC-1细胞紫杉醇敏感性的影响: 2016年; 目的研究表明化疗药物耐药和与消化道肿瘤相关的一系列基因分子突变密切相关。文章研究野生型人剪切修复基因XPD转染人胰腺癌PANC-1细胞后对结合型紫杉醇敏感性的影响。方法将空载质粒p EGFP-N_2及重组质粒p EGFP-N_2/XPD通过瞬时转染于人胰腺癌PANC-1细胞。设正常对照组(不作任何处理)、空载质粒转染组(空载质粒p EGFPN_2转染)、重组质粒XPD转染组(重组质粒p EGFP-N_2/XPD转染)。使用RT-PCR和Western blot方法检验转染后XPD mRNA及蛋白表达;MTT实验检测结合型紫杉醇对XPD转染后PANC-1细胞增殖活性的变化;流式细胞仪检测XPD转染后PANC-1细胞在结合型紫杉醇作用下凋亡反应的差异。结果重组质粒XPD转染组中XPD mRNA表达量(9.572±0.345)和蛋白表达量(1.055±0.012)较正常对照组(1.125±0.043,0.302±0.002)及空载质粒转染组(1.273±0.057,0.378±0.004)明显升高(P<0.01);正常对照组与空载质粒转染组XPD mRNA和蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05)。MTT结果显示不同浓度结合型紫杉醇作用PANC-1细胞24 h后,重组质粒XPD转染组的A值均明显低于正常对照组、空载质粒转染组,差异均有统计学意义(P<0.05);正常对照组与空载质粒转染组差异无统计学意义(P>0.05)。流式细胞仪检测结果显示不同浓度结合型紫杉醇作用PANC-1细胞24 h后,重组质粒XPD转染组细胞凋亡率均明显高于正常对照组、空载质粒转染组,差异均有统计学意义(P<0.01);正常对照组与空载质粒转染组差异无统计学意义(P>0.05)。结论通过XPD转染PANC-1细胞可明显增强PANC-1细胞对结合型紫杉醇的化疗敏感性。; 简捷刘利珍邓峰黄缘秦健斌李双; 关键词：紫杉醇凋亡

丝/苏氨酸激酶Pim家族研究相关进展被引量：3: 2008年; 简捷黄缘; 关键词：增殖分化凋亡

人参皂苷Rg3对胃癌细胞SGC-7901体外迁移、侵袭的影响及相关机制被引量：1: 2019年; 体外培养人胃癌细胞株SGC-7901,分别加入浓度为0、80、160、320μmol/L的人参皂苷Rg3进行干预.划痕愈合实验和体外侵袭实验显示80、160、320μmol/L人参皂苷Rg3干预组细胞迁移和侵袭能力均明显下降,RT-PCR和蛋白质印迹法分析结果显示80、160、320μmol/L人参皂苷Rg3干预组细胞闭合蛋白表达均升高,细胞间黏附分子1表达均降低.提示人参皂苷Rg3可能通过上调闭合蛋白表达、下调细胞间黏附因子1表达从而抑制人胃癌细胞SGC-7901体外迁移及侵袭.; 黄思付简捷房太勇; 关键词：皂苷蛋白人参细胞胃癌

XPD抑制食管癌细胞EC9706细胞增殖、侵袭及其相关机制: 简捷方念邓峰甘丽红么玲秦健斌李宾

Pim-3异常表达在胃癌中的意义被引量：13: 2008年; 目的:探讨Pim-3的异常表达在胃癌发展过程中的作用.方法:使用半定量RT-PCR法和免疫组化法检测40例胃癌组织及20例癌旁正常组织标本Pim-3的表达,并比较Pim-3的表达与胃癌临床病理参数的关系.结果:与正常胃黏膜相比,Pim-3mRNA的表达量在胃癌组织中更高(0.287±0.058 vs 0.053±0.055,P<0.001).中分化腺癌中Pim-3蛋白的表达高于低分化腺癌组织中的表达,两者比较差异显著(50%vs20%,P<0.05).Pim-3的表达与淋巴转移、静脉转移密切相关(r=0.385,0.412,P=0.014,0.008).结论:Pim-3可作为胃癌早期的生物标志物,并可预示肿瘤的预后.; 胡志方黄缘钟琼简捷; 关键词：PIM-3 胃癌免疫组化法

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