罗进贤
- 作品数：129 被引量：334H指数：10
- 供职机构：中国热带农业科学院热带生物技术研究所更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 钙网蛋白122～180片段基因克隆、表达和活性分析被引量：5
- 2004年
- 钙网蛋白是高等动物细胞中普遍存在的一种钙结合蛋白 ,近年发现它及其N端 1～ 180位氨基酸能抑制内皮细胞生长和血管生成 .为了寻找高效和小分子质量的血管生成抑制因子 ,用PCR技术扩增出钙网蛋白N端12 2～ 180位氨基酸的DNA序列 ,克隆进原核表达载体pET 3c ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,经IPTG诱导后 ,该片段以包涵体形式表达 ,表达量约占菌体总蛋白的 35 4 % .包涵体经变性溶解、复性和初步纯化后 ,纯化产物可以抑制人脐静脉内皮细胞的生长 ,鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成和小鼠原位黑色素瘤的生长 .
- 陈宏张添元罗进贤胡志上
- 关键词：钙网蛋白内皮细胞血管血管生成抑制因子抗药性
- 人内皮细胞抑制素基因的克隆、表达和功能研究
- 罗进贤罗学斌张添元
- 关键词：基因克隆基因表达
- 地衣杆菌α-淀粉酶基因在酿酒酵母中的表达被引量：1
- 1993年
- 利用酵母MF-α1因子的启动子和信号序列构建载体并将缺失了启动子和信号序列的地衣杆菌α-淀粉酶基因重组进该载体上信号序列的下游,组建含α-淀粉酶基因的表达载体,经校正读码框架后实现α-淀粉酶基因在酿酒酵母中的表达和产物的分泌;比较了酵母分泌的酶与在枯草杆菌中表达产生的酶的某些性质;讨论了基因表达和分泌的机制。
- 罗进贤黎杨李文清张添元何鸣
- 关键词：Α-淀粉酶基因酵母
- a-淀粉酶和糖化酶基因表达及可分解淀粉和生产酒精的酵母工程菌的构建
- 罗进贤李文清张添元何鸣吴晓萍叶若邻后茂立
- 本研究由国家重点科技攻关项目、广东省自然科学基金和广州市重点科学攻关项目资助，经国家和省市有关部门验收鉴定。其技术原理是采用基因工程技术，将淀粉水解酶基因引入酿酒酵母，表达和分泌淀粉水解酶类获得可分解淀粉的酵母工程菌，用...
- 关键词：
- 关键词：酒精
- 黑曲霉葡萄糖淀粉酶基因在酿酒酵母中的表达和分泌被引量：10
- 1994年
- 将黑曲霉葡萄糖淀粉酶GAI的cDNA插入到质粒pMA91的酵母PGK基因的启动子和终止序列之间,构成含葡萄糖淀粉酶基因的表达载体pMAG69。用原生质体转化法引入酿酒酵母GRF18,实现黑曲霉葡萄糖淀粉酶基因在酿酒酵母中的表达,利用基因本身的信号序列使99％以上的酶蛋白分泌至胞外,构建的酵母菌株在含10％淀粉的培养基中2天内能水解87％的淀粉,对酵母转化子的稳定性检测显示,重组质粒pMAG69可在酿酒酵母中较稳定地存在。
- 李文清何鸣罗进贤
- 关键词：黑曲霉葡萄糖淀粉酶基因表达
- 固定化“双功能”酵母基因工程菌载体及在酒精工业生产中的应用
- 吴淑魁罗进贤黄树华周玲李文清叶若邻程少菊陈海滨韦小荣张添元刘业清欧家军
- 该项目是针对目前中国酒精生产中需大量加糖化酶、工艺复杂，物耗高，成本高的技术现状而开发的一项新技术，该技术将从黑曲霉中获得的糖化酶基因转入优选的酵母菌种，获得具有极强淀粉水解能力和产酒能力的基因工程酵母（京龙克隆1号），...
- 关键词：
- 关键词：基因工程菌酿造酵母酵母发酵乙醇生产
- 可分解淀粉的酵母工程菌的构建及其在酒精生产中的应用
- ＜正＞酿酒酵母是传统的酒精生产菌,但由于其缺乏水解淀粉的酶类,用玉米,木薯等淀粉质原料生产酒精的过程中要经过蒸煮,液化,糖化等复杂工序,添加淀粉酶,糖化酶等酶制剂方能使淀粉转化为葡萄糖为酵母所利用.近年来先后有将α-淀粉...
- 罗进贤程少菊张添元
- 关键词：酿酒酵母酒精生产基因整合
- 文献传递
- 可降解淀粉和产生酒精的酵母工程菌的构建被引量：13
- 2000年
- 采用基因重组技术将黑曲酶糖化酶GAIcDNA与MF α1因子的启动子 信号序列及PGK基因的转录终止位点重组进大肠杆菌 酵母穿梭质粒构建酵母表达载体YepMGT2 0 ,用原生质体转化法引入酿酒酵母GRF1 8,在酵母MF α1启动子 信号序列及PGK终止位点的调控下 ,实现糖化酶的高表达 ,99%的酶活力分泌至胞外 ,构建的酿酒酵母GRF1 8(YEpMGT2 0 )在 1 0 %淀粉的培养基中培养 48h ,淀粉水解率达 96.1 % ;在 1 0 %淀粉的YPS培养基中发酵 96h可产生 5 .6% (v/v)的酒精 (在2 0 %淀粉培养基中酒精产量达 8.4% ) ,在无选择压力的SC培养基中培养 5d ,重组质粒的丢失率只有 1 .9%。
- 罗进贤吴晓萍张添元李文清后茂立林资诚黄劲彪
- 关键词：淀粉水解酒精生产
- 人纤溶酶原kringle5功能区基因在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 1999年
- 将人纤溶酶原kringle5功能区基因插入融合基因表达载体pET17bBamHⅠ位点,构建成重组质粒pETK23,转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下,纤溶酶原kringle5功能区基因在重组转化菌株BL21(DE3,pETK23)中获得高效表达,表达产物以可溶性蛋白形式存在,表达量占菌体总蛋白的528%.
- 陈广南罗进贤卢文菊张添元
- 关键词：人纤溶酶原基因表达大肠杆菌
- 人血管生成抑制素基因的克隆、序列分析及其在大肠杆菌中的表达被引量：5
- 2000年
- 血管生成抑制素是新发现的一种血管生成抑制因子,能抑制肿瘤的生长和转移,有临床应用前景。根据血管生成抑制素是纤溶酶原的一个内片段的特点,以人纤溶酶原cDNA为模板,用PCR扩增出人血管生成抑制素基因,经序列分析后克隆至质粒pBV220转化大肠杆菌DH5α,在温度诱导下获得高效表达。SDS-PAGE及Western印迹分析显示:表达产物占菌体总蛋白的38％,相当于212mg/L,并具有免疫活性。生物活性分析结果表明,重组人血管生成抑制素能抑制bFGF诱导的CAM血管生成、抑制C57BL/6小鼠皮下原位B16黑色素瘤生长。
- 罗进贤卢文菊李文清张添元罗学斌
- 关键词：血管生成抑制素基因克隆肿瘤基因表达
- 全文增补中
