公共文化服务平台

张爱联: 作品数：69 被引量：47H指数：3; 供职机构：中国热带农业科学院热带生物技术研究所更多>>; 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项海南省重点科技计划项目国家自然科学基金更多>>; 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>

合作作者

一种用于治疗眼睛血管增生的蛋白质: 本发明涉及一种用于治疗眼睛血管增生的蛋白质，是以人脐带静脉基因组DNA作为模板，设计基因片段特异引物，用反转录PCR方法扩增血管能抑素的N端1～89氨基酸基因片段，并在其序列的C末端加上his纯化标签；然后再重组于Pic...; 张爱联罗进贤张添元尹慧祥; 文献传递

一种应用淀粉生产乙醇的方法: 本发明公开了一种应用淀粉生产乙醇的方法，属于生物技术领域，首先从大麦基因组中扩增α淀粉酶基因，从黑曲霉菌基因组中扩增糖化酶基因，从解淀粉假单胞杆菌基因组中扩增异淀粉酶基因；利用α淀粉酶基因、糖化酶基因和异淀粉酶基因构建成...; 张爱联罗进贤张添元刘振旺易小平谭燕华张泽华; 文献传递

用GAP启动子在毕节酵母中组成型表达人血管抑制素(英文)被引量：16: 2004年; 为探索用GAP启动子 (PGAP)取代AOX1启动子 (PAOX1) ,在毕节酵母 (P .pastoris)中组成型表达外源蛋白的可能性 ,应用PCR方法从P .pastoris染色体中扩增了GAP启动子 ,以其取代诱导型表达载体 pPIC9K上的PAOX1,构建了组成型表达载体 pGAP9K。将人血管抑制素 (AS)基因重组于pGAP9K的多克隆位点 ,获得含AS基因的重组质粒 pGAP9K AS。转化P .pastorisGS115 ,对获得的高拷贝转化子P .pastorisGS115 (pGAP9K AS)进行组成型表达 ,同时以诱导型转化子P .pastorisGS115 (pPIC9K AS)作为对照。SDS PAGE结果显示 :组成型转化子于培养 4d后AS的表达水平已达到高峰 ,分泌量为 5 8mg/L ;而诱导型转化子诱导 4d后表达的AS仅是组成型表达的 70 % ,诱导 6d后达到高峰 ,表达量也只是组成型表达系统表达高峰时 (4d)的 86 %。CAM分析和抗癌实验结果显示 :P .pastorisGS115 (pGAP9K AS)和P .pastorisGS115 (pPIC9K AS)表达的AS均具有抑制血管生成和C5 7BL/ 6J实验小鼠的B16黑色素瘤的生长 ,其平均瘤重抑制率分别达到 90 6 1%和 90 5 4 %。以上结果表明 ,以GAP启动子构建的组成型表达系统具有发酵时间较短、表达水平较高、不用甲醇诱导、操作系统比较简单等优点 ,PGAP可以取代PAOX1在P .pastoris中表达AS及其他外源蛋白。; 张爱联罗进贤张添元陈守才官文俊; 关键词：组成型表达毕节酵母 GAP启动子抗血管生成抗肿瘤

血管生成抑制素治疗血管瘤的研究被引量：1: 2015年; 目的观察血管生成抑制素治疗血管瘤的效果。方法发酵毕赤酵母工程菌组成型表达重组血管生成抑制素,用SP-Sepharose Fast Flow(阳离子交换剂)柱进行蛋白纯化;通过抑制鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成试验和诱发血管内皮细胞凋亡试验,分析重组血管生成抑制素的生物学活性,在血管瘤模型(公鸡肉垂)中注射血管生成抑制素,分析血管生成抑制素对血管瘤的药效。结果血管生成抑制素在毕赤酵母中高效表达,经过纯化,收获达98%的重组血管生成抑制素;重组血管生成抑制素具有抑制CAM血管生成和诱发血管内皮细胞凋亡的活性;重组血管生成抑制素与血管瘤模型作用14 d后,瘤体血管生长抑制率为51%(P<0.01),血管瘤增殖抑制率为39%(P<0.05)。结论成功制备重组血管生成抑制素药物,血管生成抑制素对于血管瘤模型具有显著的药效。; 符策奕张泽华张爱联罗进贤; 关键词：血管生成抑制素血管瘤

用pGAP启动子在P.pastoris中组成型表达cbhⅡ基因: 2010年; 用套叠PCR法扩增木霉的cbh Ⅱ基因,以EcoR I和Not I双酶切将其克隆进P.pastoris表达载体pGAP9K,获得重组表达质粒pGAP-cbh Ⅱ。通过电转法将其cbhⅡ基因重组于P.pastoris基因组,筛选高G418抗性的克隆作为工程菌。用葡萄糖作为碳源摇瓶发酵3 d,分泌的重组蛋白CBHⅡ达到50 mg/L。用CMC酶活法测定发酵液中的CMC酶活力为2.05 U/mL。; 易国辉屠发志张爱联张添元屈直罗进贤; 关键词：毕赤酵母基因表达酶活力

一种生产木糖异构酶的方法: 本发明公开了一种生产木糖异构酶的方法。属生物技术领域。首先克隆栖热菌、链霉菌和大肠杆菌的木糖异构酶基因；构建含以上三种木糖异构酶基因表达框架的毕赤酵母表达载体、酿酒酵母表达载体和枯草芽孢杆菌表达载体，并将载体分别转化相对...; 张爱联尹慧祥易国辉; 文献传递

应用基因工程藻治理联苯和多氯联苯污染的水体的方法: 本发明公开了一种应用基因工程藻治理联苯和多氯联苯污染的水体的方法。属生物技术领域。克隆联苯2，3‑双加氧酶大亚基基因、联苯2，3‑双加氧酶小亚基基因、脱氢酶基因、2，3‑二羟基联苯1，2‑双加氧酶基因和2羟基‑6‑氧‑6...; 张爱联符仙彭明张添元郭虹易国辉; 文献传递

钙网蛋白-N58在毕赤酵母中的表达及活性分析: 2008年; 目的:利用毕赤酵母表达系统表达Calreticulin-N58蛋白。方法:利用重叠延伸PCR方法合成Calreticulin-N58基因,构建成分泌型的重组表达载体pPIC9K-CRT-N58。该重组表达载体经SacⅠ线性化后,电激转化入毕赤酵母GS115,经MD板和不同浓度G418筛选得到多拷贝重组菌株。经甲醇诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达情况,在鸡胚中进行活性分析。结果:重组质粒pPIC9K-CRT-N58在毕赤酵母中经甲醇诱导能分泌表达CRT-N58蛋白,摇瓶表达量大约为60mg/L,纯化的目的蛋白有显著的血管生成抑制作用。结论:实验成功地在毕赤酵母表达系统中实现了Calreticulin-N58的分泌表达。为Cal-reticulin-N58蛋白的进一步药用研究奠定了基础。; 周细南苏东晓潘英文张添元张爱联; 关键词：毕赤酵母分泌表达生物活性

以甘油为碳源发酵Pichia pastoris组成型表达人血管生成抑制素被引量：8: 2007年; 在Pichia pastoris组成型表达外源蛋白中碳源起着重要的调控作用。分别以葡萄糖、甘油、甲醇和油酸为碳源研究它们对摇瓶发酵GS115(pGAP9K-AS)表达hAS的影响。结果如下:油酸(163mg/L),甘油(83mg/L),葡萄糖(76mg/L),甲醇(57mg/L)。根据以上结果,以甘油为碳源在30L生物反应器中进行GS115(pGAP9K-AS)工程菌的高密度发酵。48h后测得hAS的产量为169mg/L。产物hAS具有免疫活性并能抑制bFGF诱导的CAM血管生成和实验小鼠黑色素瘤的生长。治疗12d后,抑瘤率达到90%,统计学分析结果表明hAS治疗组和PBS治疗组小鼠的肿瘤体积呈现显著性差异(P<0.01)。; 屠发志符策奕张添元罗进贤张爱联; 关键词：血管生成抑制素组成型表达 PICHIA PASTORIS 甘油

用毕赤酵母pGAP调控表达L-阿拉伯糖异构酶的方法: 本发明公开了一种用毕赤酵母pGAP调控表达L-阿拉伯糖异构酶的方法，属生物技术领域，首先从毕赤酵母中扩增pGAP启动子；构建由pGAP调控L-阿拉伯糖异构酶基因的毕赤酵母表达载体，并将这一载体转化毕赤酵母基因组；根据载体...; 张爱联崔艳艳罗进贤张添元; 文献传递

张爱联

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

张爱联

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈