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罗鹏: 作品数：30 被引量：69H指数：5; 供职机构：浙江国际旅行卫生保健中心更多>>; 发文基金：国家质检总局科技计划项目浙江出入境检验检疫局科研基金浙江省重点科技创新团队项目更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学生物学理学更多>>

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西尼罗病毒的逆转录重组酶介导扩增检测方法被引量：4: 2020年; 【背景】随着西尼罗热在全球范围内广泛流行,西尼罗热传入我国的风险加大。研究西尼罗病毒的快速检测方法,为西尼罗病毒检测建立方法储备。【目的】建立西尼罗病毒逆转录重组酶介导扩增(reverse transcription recombinase aided amplification,RT-RAA)检测方法。【方法】根据西尼罗病毒基因保守区序列设计引物和探针,建立西尼罗病毒RT-RAA检测方法,并评价该方法的重复性、特异性和灵敏度。【结果】RT-RAA方法的整个扩增反应过程温度恒定,反应温度为39°C,检测时间较短(20 min内),并且检测限可达10 copies,与基孔肯雅病毒、登革病毒、乙型脑炎病毒、黄热病毒等蚊媒病毒无交叉反应,具有良好的特异性,样本检测符合预期。【结论】建立的西尼罗病毒RT-RAA方法具有快速、特异以及灵敏的特点,可用于西尼罗病毒的口岸快速检测和流行病学监测。; 吕沁风廖静罗鹏郑伟刘建礼郭利川应清界; 关键词：西尼罗病毒

逆转录重组酶介导扩增技术快速检测基孔肯雅热病毒被引量：1: 2017年; 本研究通过使用逆转录酶,将基孔肯雅热病毒RNA首先逆转录为cDNA。选取基孔肯雅热病毒保守序列设计引物及探针,建立基孔肯雅热病毒重组酶介导一步法等温核酸扩增RT-RAA(Reverse transcription recombinase aided amplification,RT-RAA)快速检测法,并分析其灵敏度及特异性。结果显示,该方法整个过程在39℃进行,检测时间短(<20 min),检测下限可达100 copy,并与黄热病毒、日本乙型脑炎病毒、西尼罗病毒、登革病毒I型等蚊媒病毒不存在交叉反应。本文建立的基孔肯雅热病毒RT-RAA检测法,灵敏度高、特异性强、操作简便,适应于口岸基层基孔肯雅热病毒的快速检测。; 罗鹏姜梓凡郑伟吴忠华吕沁风郭利川应清界王刚; 关键词：分子检测

复合探针荧光定量PCR检测土拉弗朗西斯菌: 2011年; 目的:建立检测土拉弗朗西斯菌复合探针荧光定量PCR方法。方法:对土拉弗朗西斯菌的FopA基因设计引物和探针,用荧光定量PCR检测,并对特异性、灵敏度和重复性进行评价。结果:本方法对所试验的土拉弗朗西斯菌纯培养物的最低检测浓度为100 CFU/ml,定量的检测变异系数小于5%。在模拟的污染血液样品中的检出限为1×103 CFU/ml。结论:本文建立的复合探针荧光定量PCR方法能高效、敏感、特异地检测土拉弗朗西斯菌。; 吕沁风郑伟吴忠华罗鹏何蕾孟军李禾; 关键词：土拉弗朗西斯菌荧光定量PCR

重组酶介导扩增方法快速检测黄热病毒被引量：8: 2016年; 目的本研究采用重组酶介导的等温核酸扩增方法(RAA),通过使用逆转录酶,建立黄热病毒的一步法等温核酸扩增(RT-RAA)方法。方法根据黄热病毒基因组保守序列设计引物和探针,建立并分析RT-RAA的重复性、特异性、灵敏度;以所建立方法对黄热病毒样本进行检测,同时以基因测序进行验证。结果黄热病毒RT-RAA扩增,体系中加入40 U的逆转录酶扩增效果最佳。该方法检测时间短(<20 min),并且灵敏度高,检测下限可达100 copy,与登革病毒、西尼罗病毒、日本乙型脑炎病毒、基孔肯雅热病毒等蚊媒病毒无交叉反应,具有良好的特异性。结论构建的黄热病毒RT-RAA方法具有快速、特异以及灵敏的特点,适应于黄热病毒的口岸快速检测。; 郑伟徐琦罗鹏冯娟郭利川应清界; 关键词：黄热病毒分子检测

嗜肺军团菌环介导等温扩增检测法的建立被引量：6: 2010年; 目的:建立一种快速简便的嗜肺军团菌分子检测方法。方法:运用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),设计一套引物特异性识别嗜肺军团菌毒力基因——mip基因的6个特殊区域,在恒温条件下,对8株嗜肺军团菌和5株其它细菌进行检测,并与普通PCR方法进行比对,验证该方法的特异性和灵敏度。结果:所有嗜肺军团菌扩增产物均产生肉眼可见的白色沉淀,而其它不同菌株均不产生沉淀;加入荧光染料smart green后,嗜肺军团菌扩增产物均产生强绿色荧光,其它菌株呈弱荧光。与普通PCR(检出限约为57.6 pg,)比,LAMP扩增反应的灵敏度大100倍左右,基因组DNA检出限为576 fg,阳性水样检出限为8 cfu/ml。结论:LAMP技术可在简易的实验环境中快速、特异、灵敏地检测嗜肺军团菌。; 吕沁风郑伟罗鹏吴忠华李禾沈建根; 关键词：基因扩增

登革病毒检测技术研究进展被引量：4: 2013年; 登革病毒可导致登革热、登革出血热和登革休克综合征,准确快速的早期诊断对其预后非常关键,因此登革病毒检测技术的发展势在必行。在此,我们简要综述目前的登革病毒分离、血清学检测、分子生物学检测技术进展。; 吴忠华罗鹏徐琦何蕾吕沁风; 关键词：登革病毒血清学检测分子生物学检测

一种体外新型快速环介导等温扩增方法、体外检测甲型H1N1流感病毒的试剂及方法: 本发明提供了一种体外新型快速环介导等温扩增方法、体外检测甲型H1N1流感病毒的试剂及方法，它包括外引物F3、外引物B3、内引物FIP、内引物BIP、环引物Loop-f、环引物Loop-r，套引物FNP、套引物BNP。本发...; 吕沁风何蕾罗鹏白颉; 文献传递

抗结核菌糖脂抗原抗体及抗阿拉伯甘露糖抗原抗体并联检测在口岸肺结核病快速诊断中的应用: 2010年; 〔目的〕研究抗结核菌糖脂抗原(TBGL)抗体及抗阿拉伯甘露糖抗原(LAM)抗体并联检测在结核病血清学诊断中的价值。〔方法〕采集结核病患者及健康对照者血清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗TBGL抗体,用胶体金法检测抗LAM抗体。〔结果〕91例结核患者TBGL抗体、LAM抗体总阳性率均为62.6%,其中活动性肺结核病人的TBGL阳性率为65.3%,LAM阳性率为69.4%;非活动性结核病人TBGL阳性率为59.5%,LAM阳性率为54.8%,两组间差异不明显。肺结核病人两抗体并联检测阳性率为89.0%,明显高于单独抗体检测阳性率(P<0.05),特异性达85.7%。〔结论〕抗TBGL、LAM抗体并联检测敏感性、特异性高,方法快速简便,对口岸结核病预防控制有较高的实用价值。; 郑伟李禾吴忠华吕沁风罗鹏孟军; 关键词：血清结核

等温扩增检测猴痘病毒的试剂及等温扩增检测猴痘病毒的方法: 本发明提供了一种等温扩增检测猴痘病毒的试剂。它包括：（1）检测猴痘病毒的标准品，所述标准品为采用人工合成的基因片段，克隆入pGSI质粒，得到的重组质粒载体；所述基因片段的碱基序列如SEQ ID NO：1所示；（2）引物，...; 吕沁风郑伟吴忠华徐琦罗鹏何蕾

一种用于检测恶性疟原虫的双环引物环介导等温扩增方法: 2015年; 目的:设计一种快速环介导等温扩增(LAMP)检测方法,用于恶性疟原虫的检测。方法:根据恶性疟原虫18S r RNA基因设计一组引物,包括外引物、内引物、环引物及第二对环引物,用于恶性疟原虫的LAMP检测。结果:双环引物LAMP检测法灵敏度可达10拷贝DNA模板/μL,可特异地检测出恶性疟原虫DNA,3次重复试验Ct值的CV小于5%,比普通加环引物LAMP检测法时间缩短10 min左右,提高了反应的检测效率。结论:建立的双环引物LAMP方法是一种高效、快速的检测方法。; 吕沁风姜侃杨永耀何蕾罗鹏吴忠华; 关键词：环介导等温扩增恶性疟原虫

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