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吕沁风: 作品数：67 被引量：202H指数：7; 供职机构：浙江国际旅行卫生保健中心更多>>; 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金国家质检总局科技计划项目质检公益性行业科研专项项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

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新的HLA-B* 4061等位基因的核苷酸序列分析被引量：1: 2006年; 本研究探讨HLA新的等位基因HLA-B* 4061的分子基础。采用盐析法抽提样本DNA,利用PCR方法扩增先证者HLA-B基因的第1-8外显子,PCR产物直接经TOPO克隆到质粒载体中得到单链,对所得克隆进行HLA-B基因第2、3、4外显子双向测序分析。应用PCR-SSP方法证实测序所发现的突变。结果表明先证者样本克隆测序得到2个等位基因,其中1个等位基因为B* 4601,另1个经blast验证其为新的等位基因,新的等位基因序列已递交GenBank(DQ089628,DQ089629,DQ089630)。与最接近的B* 400101等位基因序列相比,新的等位基因仅在第2外显子上有1个核苷酸不同,即第272位C→A,导致第67位氨基酸Ser→Tyr。结论HLA-B* 4061等位基因为新的HLA-B等位基因,已荣获世界卫生组织HLA因子命名委员会正式命名。; 章伟吕沁风王炜韩浙东朱发明严力行; 关键词：HLA-B 等位基因

三重LAMP法检测食品中沙门氏菌、单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌被引量：34: 2013年; 为能一步快速检测沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌3种食源性致病菌,建立了三重环介导等温扩增(LAMP)检测方法。针对沙门氏菌的侵袭蛋白(invA)基因、金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶(nuc)基因、单增李斯特菌(hly)基因3个高度保守的基因,设计出3套LAMP引物。以8株代表目标菌株,三重LAMP反应体系中Mg2+浓度4.6mmol/L、扩增温度61℃。通过电泳检测、离心观察沉淀和荧光检测证明该方法能够在90min内一次性检出以上3种致病菌。3种菌的检测灵敏度均约为10fg/μL,是PCR检测灵敏度(10pg/μL)的1000倍。以无害李斯特菌等常见的20株非目标菌株为对照,证明了此方法的特异性。LAMP产物DNA测序结果与预期一致,证明了该方法的正确性。该三重LAMP检测方法具有快速、特异、灵敏度高的优点,适用于食品中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌的快速检测。; 姜侃吕沁风汪新夏琳张峥陈小珍; 关键词：LAMP 沙门氏菌金黄色葡萄球菌单增李斯特菌

浙江汉族人群细胞因子基因多态性分析被引量：7: 2007年; 为了探讨浙江汉族人群13种细胞因子基因多态性的分布情况,采用PCR-SSP对100名汉族人群的IL-1α(T/C-889)、IL-1β(C/T-511,T/C+3962)、IL-1R(C/TPst-I1970)、IL-1RA(T/CMspa1-I1100)、IL-2(T/G-330,G/T+166)、IL-4(T/G-1098,T/C-590,T/C-33)、IL-4Rα(G/A+1902)、IL-6(G/C-174,G/Ant565)、IL-10(G/A-1082,C/T-819,C/A-592)、IL-12(C/A-1188)、γIFN(A/TUTR5644)、TGFβ(C/Tcodon10,G/Ccodon25)、TNFα(G/A-308,G/A-238)等细胞因子基因多态性进行分型。结果显示,(1)在检测的13种细胞因子中,TGF(Gcodon25)等位基因频率为1.00,未检测到TGF(Ccodon25)等位基因;(2)细胞因子等位基因频率大于0.95的有IL-1α(C-889)、IL-1β(C+3962)、IL-4(T–1098)、IL-6(G-174)、IL-6(Gnt565)、IL-10(A–1082)和TNFα(G-238);频率低于0.05的有IL-1α(T-889)、IL-1β(T+3962)、IL-4(G–1098)、IL-6(A-174)、IL-6(Ant565)、IL-10(G–1082)和TNFα(A-238);(3)IL-10高表达单倍型GCC频率为0.05,低表达单倍型ATA频率为0.735;TGFβ高表达单倍型TG频率为0.49,低表达单倍型CC频率为0;TNFα高表达单倍型AG和AA频率为0.055,低表达单倍型GG和GA频率为0.945。结果表明,浙江汉族人群细胞因子基因多态性较为丰富,具有地区性遗传特征。; 章伟祝宏吕沁风王炜韩浙东朱发明严力行; 关键词：细胞因子基因型单倍型汉族人群

用于检测猴痘病毒的NASBA试剂盒及其应用: 本发明公开了一种用于检测猴痘病毒的NASBA试剂盒及其应用。本发明所提供的NASBA试剂盒中含有用于检测猴痘病毒的组合物，所述组合物由一个引物对和一个探针组成；所述引物对由序列表中序列1和序列2所示的两条单链DNA分子组...; 吕沁风郑伟吴忠华罗鹏徐琦何蕾李禾; 文献传递

Delta模块HLA配型检测方法的建立: 2006年; 为了建立delta模块配型的检测方法,采用盐析法提取DNA,PCR技术扩增delta模块,GeneScan模式检测PCR产物。结果表明,在104份随机样本中,PCR扩增出的delta模块具有高度多态性。DNA片段长度范围在81-393bp,片段数目为6-32个;片段长度集中在81-118bp,140-175bp,217-301bp,340-393bp4个区域。结论:建立的delta模块配型技术是可行的,可以用于造血干细胞移植供者的筛选。首次获得了中国汉族人群delta模块的数据资料。; 吕沁风章伟朱发明严力行; 关键词：HLA配型

两种进口第4代HIV检测试剂检测性能评价被引量：5: 2013年; 目的:评价BioMerieux公司的HIV抗原/抗体联合检测快速法(VIDAS HIV DUO QUICK)和Vironostika HIV Uniform II Ag-Ab ELISA法检测HIV抗体和P24抗原的特异性及敏感性。方法:用上述两种试剂分别检测HIV抗体阴性样品1184例、HIV抗体阳性样品128例、BBI阳转血清盘(PRB929 01-07)和7种不同稀释度的P24抗原阳性对照血清等,对其进行敏感性和特异性分析。结果:两种试剂检测HIV抗体均具有较高特异性,但快速法检测特异性较高(为98.6%),而ELISA法检测特异性较低(为96.0%)。两种试剂检测HIV抗体和抗原的敏感性一样。另外,从检测BBI阳转血清盘的结果可知,两种4代抗原/抗体联合检测试剂检测BBI阳转血清盘AD第18 d结果即为阳性,而3代HIV抗体检测试剂在第21 d结果为阳性,4代检测试剂敏感性比3代检测试剂高,进一步缩短了HIV感染检测的窗口期,可以检出窗口期的样品。结论:这2种4代检测试剂在增加HIV P24抗原检测的情况下,不影响其检测HIV抗体的特异性和敏感性,并进一步缩短了HIV感染窗口期。建议HIV抗体初筛检测使用第4代HIV抗原/抗体联合检测试剂,可检出更多艾滋病早期感染者。; 吴忠华郑伟吕沁风罗鹏李禾; 关键词：HIV抗体 P24抗原 ELISA 性能评价

HLA-B无效等位基因B*5408N的核苷酸序列分析被引量：4: 2007年; 本研究探讨HLA新的等位基因HLA-B*5408N的分子基础。采用商用抽提试剂盒抽提样本DNA,利用单链特异性引物PCR方法扩增先证者HLA-B基因的第2-4外显子,对PCR扩增产物直接进行第2、3、4外显子双向测序分析。结果表明:先证者样本测序得到两个等位基因,其中一个等位基因为HLA-B*1527,另一个经blast验证其为新的等位基因,新的等位基因序列已递交GenBank(DQ295998,DQ295999,DQ296000)。与最接近的HLA-B*5401等位基因序列相比,新的等位基因仅在第3外显子上有1个核苷酸不同,即第553位G→T,这导致第161位氨基酸Glu(GAG)→终止密码(TAG),蛋白质的翻译提前终止。血清学方法未能检出HLA-B54抗原。结论:该等位基因为HLA-B无效表达等位基因,已被世界卫生组织HLA因子命名委员会正式命名为HLA-B*5408N。; 吕沁风朱发明章伟何俊俊王炜韩浙东严力行; 关键词：HLA-B 等位基因测序

α_(1,2)岩藻糖基转移酶基因复合突变引起类孟买型血型一例被引量：2: 2005年; 朱发明吕沁风洪小珍许先国严力行; 关键词：糖基转移酶基因基因突变

甲型H1N1流感病毒FAST-LAMP检测方法的建立被引量：4: 2015年; 建立一种新型等温扩增检测方法,用于提高等温扩增反应的检测速度,应用于甲型H1N1流感病毒检测。根据HA基因设计一组引物,包括外引物、内引物、环引物及套内引物,套内引物的加入增加了引物与模板的接触位点,提高扩增效率,缩短检测时间。结果显示,FAST-LAMP检测法比普通LAMP检测法时间缩短45 min左右,比加入环引物的LAMP检测方法缩短20 min,大大缩短了反应的检测时间。检测灵敏度可达到1×102拷贝。FAST-LAMP是一种高效、更快的检测方法。; 吕沁风罗鹏何蕾杨永耀郑伟李莉吴忠华; 关键词：甲型H1N1流感病毒

血液处理过程中的红细胞溶血被引量：9: 2003年; 输注的红细胞制品中红细胞发生溶血已有报道,这对于需要输血的病人具有重要的临床意义。因为游离血红蛋白将裂解成二聚体与结合珠蛋白结合,进而通过网状内皮系统清除,一旦超出结合珠蛋白的结合能力,将会发生血红蛋白血症。溶血是指红细胞破坏后释放出血红蛋白并引起血浆颜色改变。红细胞异常溶血由许多因素引起,包括在血液处理过程中操作不当、保存条件不当、细菌性溶血、抗体激活补体的溶血、红细胞膜的缺陷及献血者异常等。溶血的程度常用红细胞比容校正后的整个血红蛋白中游离血红蛋白的百分率来表示。北美尚未建立可被接受的溶血范围,但是1％溶血标准目前用于评估血液贮存材料的生物相容性,而欧洲委员会将标准定为0.8％。本文强调要对全血制备红细胞的全程进行充分的监控,从而减少溶血的发生。仔细评估血液制备过程将降低因溶血而废弃的红细胞量。; Samuel O.Sowemimo Coker张海琴吕沁风; 关键词：红细胞溶血输血血液保存

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