董彦君
- 作品数:2 被引量:9H指数:1
- 供职机构:中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金:辽宁省教育厅高等学校科学研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- CLD鼠肺成纤维细胞的原代培养及生物学行为研究被引量:8
- 2009年
- 目的建立一套可靠的CLD鼠肺成纤维细胞(lung fibroblasts,LFs)分离、纯化和培养技术,并对其生物学行为进行研究,为高氧致肺间质纤维化体外研究提供平台。方法足月新生Wister大鼠生后即分别持续吸入85%氧或空气,于7d、14d、21d分别进行鼠肺LFs原代培养。绘制细胞生长曲线、计算细胞分裂指数、流式细胞术检测细胞周期。结果与空气组相比,高氧组LFs增殖速度增快,处于分裂期的细胞数增多,细胞周期中处于G1期细胞的比率逐渐减少,S期细胞比率增加,且呈时间依赖关系。结论本方法培养的LFs可用于CLD肺间质纤维化发病机制的体外研究;高氧可诱发LFs细胞周期紊乱,细胞异常增生。
- 赵诗萌吴红敏刘雪雁董彦君
- 关键词:早产儿慢性肺疾病肺成纤维细胞原代培养生物学行为
- 新生大鼠在高氧环境下肺成纤维细胞P16-RB-E_2F_1通路的改变被引量:1
- 2011年
- 目的探讨新生大鼠在高氧环境下肺成纤维细胞(lungfibroblasts,LF)P16-RB-E2F1蛋白信号传导通路的改变。方法足月新生SD大鼠于生后12h内分别持续吸入85%高氧和空气,于3、7、14和21d随机处死动物,无菌条件下采集肺组织,进行LF细胞的原代培养,应用免疫组织化学、Westernblotting法检测P16、RB、E2F1蛋白表达;Real-timePCR法检测其mRNA含量。免疫组织化学法检测磷酸化RB蛋白(p-RBser-795)表达。结果高氧组与空气组相比,生后7d时高氧组P16蛋白及mRNA表达开始减少,E2F1表达增加(P<0.05),14d和21d时P16蛋白及mRNA表达明显减少,E2F1表达则明显增加(P<0.01);各实验组LF的总RB蛋白表达无明显差异(P>0.05),生后7d时高氧组p-RB蛋白表达增加(P<0.05),14d和21d时明显增加(P<0.01)。结论高氧可能通过肺成纤维细胞P16基因表达失活,导致RB蛋白磷酸化(Rb灭活),E2F1基因表达水平增加,LF过度增殖最终导致肺间质纤维化。
- 赵诗萌韩丹吴红敏曹美玲董彦君薛辛东
- 关键词:高氧早产儿慢性肺疾病肺成纤维细胞