袁慧君
- 作品数:24 被引量:70H指数:5
- 供职机构:解放军军需大学军事兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划河南省杰出青年科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- 旋毛虫ES抗原结构基因TSPG Ⅱ 重组表达质粒构建被引量:2
- 1999年
- 用限制性内切酶EcoRⅠ和HindⅢ,从克隆载体pUTSⅡ中切出一个0.988kbTSPGⅡ基因,经EcoRI和BstXI酶切鉴定,同时表达载体也用相同的酶进行酶切,经琼脂糖凝胶电泳,分别回收TSPGⅡ基因和pSV·SPORTⅠ表达载体,用T4DNA连接酶定向连接,转化大肠杆菌感受态细胞,挑取重组子,经EcoRⅠ,BstXⅠ和HindⅢ酶切鉴定,构建了重组表达质粒pSV·TSⅡ.
- 袁慧君阎玉河张改平李健强
- 关键词:旋毛虫结构基因重组表达质粒
- 狂犬病病毒糖/核蛋白基因疫苗和IL-18在犬的免疫试验研究
- 狂犬病(Rabies)是由狂犬病病毒(Rabies virus,RV)引起的一种重要的人畜共患传染病,一旦发病即引起100%死亡。疫苗接种可有效预防本病的发生。目前用于预防狂犬病的弱毒活疫苗均存在一定的残存毒力。在北美地...
- 袁慧君扈荣良包世俊张守峰
- 文献传递
- 表达狂犬病毒糖蛋白抗原的重组犬2型腺病毒的构建及鉴定
- 通过常规分子生物学方法,先将狂犬病毒糖蛋白(Rgp)基因从含有狂犬病毒SRV<,9>株糖蛋白基因的pGT质粒克隆至pVAX1,再通过E3缺失穿梭质粒pVAXΔE3,构建成pVAXΔE3Rgp,然后再通过酶切连接将其克隆入...
- 赵忠鹏夏咸柱扈荣良张守峰袁慧君谢之景闫芳黄耕杨松涛
- 关键词:狂犬病毒犬2型腺病毒基因测序重组病毒
- 文献传递
- 狂犬病病毒糖、核蛋白基因疫苗的构建及在小鼠的免疫试验被引量:5
- 2004年
- 分别以 p IRES1neo和 p VAX1为载体 ,构建了以狂犬病病毒糖蛋白和核蛋白为目的基因的基因疫苗单或双基因表达载体。以司苯 -甘油作为包裹剂 ,按 1μg DNA用 0 .5μL司苯 -甘油比例混合 ,将各表达载体制成 DNA疫苗 ,进行小鼠免疫试验。免疫共分 p IRES1neo、p IG- neo、p IN- neo、p IGN、p IG- neo+p IN- neo、p VAX1、p VG、p VN和 p VGN9个试验组 ,每只小鼠于后肢胫前肌每侧接种基因疫苗 5 0μL (0 .5 g/ L ) ,共免疫 3次 ,间隔 14 d。通过间接 EL ISA和细胞中和指数测定分别检测免疫应答水平。结果显示 ,1免疫 3次后 ,所有试验组抗体阳转率 10 0 % ;2第 3次免疫后 14 d检测 ,抗体水平显著上升 ;3以 p IRES1neo为载体构建的基因疫苗免疫效果普遍优于以 p VAX1为载体构建的基因疫苗 ,其中含有糖蛋白 /核蛋白双基因共表达载体 p IGN免疫组的抗体水平均高于其他试验组 ;4以 7.5个 L D50 的 CVS强毒肌肉攻毒 ,保护率达 89%。通过以上试验证明 ,p IGN是用于本动物免疫试验的最佳 DNA疫苗。
- 袁慧君扈荣良包世俊张守峰殷震
- 关键词:狂犬病病毒糖蛋白核蛋白基因疫苗小鼠免疫
- IBV3株分离株的血清中和试验及S1基因同源性分析被引量:8
- 2006年
- 通过血清中和试验、RT-PCR、核酸序列分析和S1基因的同源性分析,表明鸡传染性支气管炎病毒(IBV)BJ9601、HN9604与M41株的血清中和效价最高,其次为H120,TJ9602与试验毒株的血清中和效价较低。BJ9601、HN9604的S1基因与H120和H52的同源性很高,与H120和H52同在一个分支,其来源与H120或H52有密切关系。TJ9602的S1基因只与LDT3的同源性达到93%,共同形成一个分支,与其他毒株的同源性均在88%以下。血清中和试验和S1基因同源性之间存在较高的相关性,但并不能达到完全的吻合,即血清中和效价最高的毒株之间S1基因的同源性并不是最高的。在GenBank中登记的IBV中国大陆分离株的S1基因可分为3个基因群,其中Ⅰ群和Ⅱ群是主要的流行毒株,共有38个分离毒株,占90.48%。
- 刘兴友袁慧君李淑梅姚四新何宏轩陈溥言
- 关键词:鸡传染性支气管炎病毒S1基因同源性
- 狂犬病病毒糖/核蛋白基因疫苗和IL-18在犬的免疫试验研究
- 本试验拟在糖、核蛋白'二价'DNA疫苗在小鼠免疫试验的基础上,对双基因共表达载体pIGN及不同因素对其免疫应答的影响作进一步探索,旨在为狂犬病病毒DNA疫苗的实际应用提供参考数据.
- 袁慧君扈荣良包世俊张守峰
- 关键词:狂犬病病毒糖蛋白核蛋白基因疫苗免疫
- 文献传递
- 狂犬病病毒新型疫苗研究进展被引量:1
- 2004年
- 王三虎袁慧君
- 关键词:狂犬病病毒减毒活疫苗暴露后兽用疫苗新型疫苗人畜共患传染病
- 旋毛虫肌幼虫ES抗原的结构基因在cos7细胞中的表达
- 表达载体pSV.SPORTI中,SV<,40>启动子cos7细胞中,对旋毛虫肌肉虫ES抗原的TSPGⅡ基因进行表达,用限制性内切酶EcoRI和HindⅢ从克隆载体pUTSⅡ中切出一个0.988kbTSPGⅡ基...
- 袁慧君闰玉河张改平李健强
- 关键词:寄生虫细胞生物学旋毛虫结构基因
- 狂犬病病毒糖/核蛋白基因疫苗和IL-18在犬的免疫试验研究被引量:3
- 2004年
- 目的 检测狂犬病病毒糖 /核蛋白“二价”基因疫苗及IL - 18在犬体内的免疫效果 ,并确定不同包裹剂对基因疫苗免疫效果的影响。方法 本试验以 pIRES1neo和人用灭活苗分别作为阴、阳性对照 ,以糖 /核蛋白双基因共表达载体 pIGN单独或与IL - 18的真核表达载体pIIL18混合 ,以司苯 -甘油混合或以生理盐水溶液形式 ,按每条犬 2 0 0 μgDNA/ml,接种 3次 (其中 1组第 3次加强免疫时采用浓缩的狂犬病灭活苗 ) ,间隔 2周的免疫程序 ,经股四头肌进行注射免疫。通过间接ELISA、细胞中和试验及淋巴细胞转化试验分别检测体液和细胞免疫水平。结果与结论 结果显示 ,1.所有试验组在第 3次加强免疫后特异性抗体和中和抗体水平显著高于阴性对照组 ;pIGN pIIL18组诱导的细胞免疫水平高于无 pIIL18的 pIGN免疫组 ;2 .以司苯 -甘油作为包裹剂的基因疫苗诱导产生的免疫应答水平与裸质粒 (生理盐水溶液 )形式的基因疫苗间无显著差异 ;3.以糖 /核蛋白二价基因疫苗pIGN作为基础免疫 ,再以狂犬病浓缩灭活苗加强免疫后 ,能迅速诱导较高的体液免疫应答水平。以上结果说明 ,狂犬病病毒糖 /核蛋白“二价”DNA疫苗具有实际应用于免疫预防的潜力。
- 袁慧君扈荣良张守峰包世俊涂长春
- 关键词:狂犬病病毒IL-18免疫
- 表达狂犬病毒糖蛋白抗原的重组犬2型腺病毒的构建及鉴定
- 通过常规分子生物学方法,先将狂犬病毒糖蛋白(Rgp)基因从含有狂犬病毒SRV9株糖蛋白基因的pGT质粒克隆至pVAX1,再通过E3缺失穿梭质粒pVAX△E3,构建成pVAX△E3Rgp,然后再通过酶切连接将其克隆入犬2型...
- 赵忠鹏夏咸柱扈荣良张守峰袁慧君谢之景闫芳黄耕杨松涛
- 关键词:狂犬病毒犬2型腺病毒
- 文献传递