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一种人工转录因子及其促进外源基因在CHO细胞中的高效表达方法: 本发明公开了一种编码人工转录因子的核苷酸序列、氨基酸序列及该人工转录因子促进外源基因在CHO细胞中的高效表达方法。涉及人工转录因子的构建、表达、具有不同数量的人工转录因子结合序列的外源基因表达载体的构建、及用表达人工转录...; 李世崇陈昭烈黄培堂叶玲玲刘红许建王启伟刘兴茂; 文献传递

肝细胞癌失调表达基因3’UTR中影响miRNA结合SNP与肝细胞癌易感性关系的研究: 目的研究肝细胞癌中失调表达基因的3’UTR中可能影响miRNA结合的SNP与肝细胞癌易感性之间的关系。方法选取nextbio网站列出的在肝细胞癌中失调表达前50位的基因,将这些基因输入Patrocles网站查找其3’UT...; 常江吴晨翟侃黄理明许建张彤雯于典科谭文林东昕; 文献传递

逆转录病毒表达系统及其在外源蛋白高效表达中的应用被引量：8: 2008年; 逆转录病毒表达系统是一种新的重组蛋白高效表达系统,它由逆转录病毒载体,包膜蛋白载体和包装细胞系构成,在基因治疗和生物制药领域有很大的应用潜力。逆转录病毒和宿主细胞基因组的重组倾向于发生在转录活性区;口炎疱疹病毒-G蛋白(vesicular stomatitis virus G,VSV-G)能有效扩大逆转录病毒感染宿主细胞的范围、提高逆转录病毒的感染效率;用高滴度的重组病毒感染细胞,经过简单的筛选即可获得高表达细胞株。就逆转录病毒表达系统的组成、感染的特点和机制及其应用前景作了概述。; 许建李世崇陈昭烈

人工转录因子促进外源基因在CHO细胞中的高效表达被引量：2: 2007年; 以酵母转录因子GALA中1-147位氨基酸序列为构建人工转录因子的DNA结合结构域，单纯疱疹病毒转录激活子VP16中12肽（DALDDFDLDMLG）的4个串联重复作为人工转录因子的功能结构域，用SV40的核定位序列（NLS）将两部分连接起来，构建了人工转录因子GVP4并将其克隆进入表达载体pcDNA3．1/Hygro（＋）中。将不同长度的人工转录因子结合序列构建在外源基因表达载体pcDNA3．1（＋）启动子CMV的上游，分别连接外源基因EGFP和tPA。用表达人工转录因子和外源基因的载体共转染CHO细胞，EGFP和tPA在含不同数量人工转录因子结合位点表达载体pcDNA3．1（＋）转染的CHO细胞中的表达水平呈现不同程度的提高。其中，以引入10个人工转录因子结合位点的表达载体的效果最明显，EGFP和t-PA的表达效率均提高2～3倍。结果表明，人工转录因子能有效地促进外源基因在哺乳动物细胞中的表达。; 李世崇叶玲玲杨海刘红许建吴本传黄培堂陈昭烈; 关键词：人工转录因子 CHO细胞 EGFP T-PA

淋巴瘤异常表达基因3’UTR中与miRNA结合SNP多态与淋巴瘤易感性关系的研究: 目的研究淋巴瘤异常表达基因3’UTR中可能与miRNA结合的SNP的多态与淋巴瘤易感性的关系。方法病例为817例淋巴瘤患者（霍奇金淋巴瘤115例,非霍奇金淋巴瘤695例和未分类7例）,对照选用2044例无肿瘤史的正常对照...; 翟侃吴晨常江黄理明许建张彤雯于典科谭文林东昕; 文献传递

一种人工转录因子及其促进外源基因在CHO细胞中的高效表达方法: 本发明公开了一种编码人工转录因子的核苷酸序列、氨基酸序列及该人工转录因子促进外源基因在CHO细胞中的高效表达方法。涉及人工转录因子的构建、表达、具有不同数量的人工转录因子结合序列的外源基因表达载体的构建、及用表达人工转录...; 李世崇陈昭烈黄培堂叶玲玲刘红许建王启伟刘兴茂; 文献传递

基于逆转录病毒载体的高效表达系统的建立和应用: 逆转录病毒表达系统是近年来新兴起的一种高效表达系统,它由逆转录病毒载体,包膜蛋白载体和包装细胞系构成。由于逆转录病毒和宿主细胞基因组的重组倾向于发生在转录活性区,口炎疱疹病毒G蛋白能有效扩大逆转录病毒感染宿主细胞的范围、...; 许建; 关键词：逆转录病毒载体细胞系; 文献传递

基于逆转录病毒载体的外源基因表达系统的评价和应用被引量：4: 2011年; 逆转录病毒表达系统是基因治疗研究和RNA干扰技术广泛采用的外源基因表达系统。文中以增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因的表达水平和稳定性为指标,比较逆转录病毒表达载体pQCXIN和pcDNA3.1（＋）表达质粒介导的外源基因在HEK293细胞和CHO-K1细胞的表达效率。病毒感染HEK293细胞和CHO-K1细胞的相对荧光强度（Relative fluorescence intensity,RFI）均约为对应的质粒转染细胞的2倍。多轮反复感染逆转录病毒表达载体能有效提高HEK293细胞表达EGFP的效率。HEK293细胞经4轮病毒感染后的RFI值较1次病毒感染的RFI值约提高2倍。此外,逆转录病毒表达载体介导的外源基因表达的稳定性优于质粒转染的外源基因表达。采用携带人重组活性蛋白C（Recombinant human activated protein C,rhAPC）基因的pQCXIN和HEK293细胞进一步验证了逆转录病毒载体介导的外源基因表达效率,构建了rhAPC表达水平为10~15μg/（106 cells.d）的HEK293细胞系。研究结果表明,逆转录病毒表达系统是有应用价值的介导外源基因在哺乳动物细胞高效表达的技术途径。; 叶玲玲许建李世崇刘红刘兴茂王启伟陈昭烈; 关键词：逆转录病毒外源基因生物技术药物

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许建