谢萍
- 作品数：18 被引量：33H指数：3
- 供职机构：首都医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市科技新星计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 泛素连接酶Smurf1促进Smurf2的Nedd化修饰
- 2017年
- 目的探讨泛素连接酶Smad泛素化相关因子2(Smad ubiquitination-related factor 2,Smurf2)Nedd化修饰的机制。方法梯度过表达Nedd8检测Smuff2的蛋白水平变化,免疫共沉淀(IP)和Western印迹分析Smurf2的Nedd化修饰,GST融合蛋白沉降技术(GST-pulldown)验证相互作用,分析Smurf1 C426A基因敲入(knock in)小鼠体内Smurf2在淋巴、脾、肝和肺组织的蛋白表达水平。结果 Smurf2可发生Nedd化修饰,过表达Nedd8可导致Smurf2蛋白水平下调,Smurf1和Smurf2能相互作用,且Smurf1可使Smurf2的Nedd化修饰增强。在Smurf1 C426A基因敲入小鼠的组织细胞中Smurf2蛋白水平上调。结论 Smurf1能促进Smurf2的Nedd化修饰。
- 刘超李海文韦荣飞谢萍张令强
- 关键词：泛素免疫沉淀法SMURF2
- PTEN Nedd8修饰作为乳腺癌新型标志物及其特异性抗体的发明与应用
- 本发明公开了PTEN Nedd8修饰作为乳腺癌新型标志物以及其特异性抗体的发明与应用。本发明提供了PTEN蛋白K402位点的Nedd8修饰作为标志物在制备用于评判乳腺癌分级分期的产品中的应用，以及在制备用于预测乳腺癌预后...
- 张令强谢萍彭志强陈玉娇杜梦鸽
- 黄鳝血清、肠黏液免疫球蛋白的分离纯化及部分特性分析被引量：7
- 2007年
- 采用硫酸铵盐析、Sephadex G-200凝胶层析等方法从黄鳝血清和肠道黏液中分离纯化出黄鳝血清和黄鳝肠黏液免疫球蛋白。SDS-PAGE分析表明,二者的理化性质相同;经β-巯基乙醇处理后解离形成重链和轻链两个亚单位,分子量分别为74 kD和29 kD。试验结果表明,黄鳝血清和肠黏液中存在免疫球蛋白,二者具有相同的层析和SDS-PAGE电泳特性。
- 张静安利国张福淼谢萍杨桂文
- 关键词：黄鳝血清免疫球蛋白
- 小鼠CKIP-1基因敲除对非酒精性脂肪性肝病的影响及其机制
- 目的探讨小鼠CKIP-1(casein kinase 2 interaction protein 1)基因缺陷对非酒精性脂肪性肝病中的影响及其可能机制。方法 1.实验动物分组及处理:分为CKIP-1基因敲除(CKIP-1...
- 展玉涛李冬念谢萍李莉陈婧张令强张川
- 文献传递
- 二氢硫酰胺-S-琥珀酰转移酶在HER2阳性乳腺癌中的功能初探
- 2023年
- 目的:分析人类表皮生长因子受体2(HER2)阳性乳腺癌患者中二氢硫酰胺-S-琥珀酰转移酶(DLST)的表达水平,评估其对患者生存预后的影响,同时探讨DLST在HER2阳性乳腺癌发生发展中的潜在机制。方法:(1)使用CancerSEA数据库进行筛选,分析乳腺癌中DLST表达的特异性,再通过Kaplan-Meier Plotter数据库研究DLST对不同分型乳腺癌患者预后的影响。(2)采用CancerSEA数据库探索和验证DLST相关的信号通路。通过免疫沉淀、GST-pull down实验确定在HER2阳性乳腺癌中与DLST相互作用的蛋白。(3)利用TIMER 2.0数据库对DLST与免疫细胞浸润的相关性进行分析。结果:DLST在乳腺癌患者中表达升高,DLST表达越高,HER2阳性乳腺癌患者的预后就会越差并且其生存期也会越短;DLST抑制HER2阳性乳腺癌细胞的凋亡;DLST在HER2阳性乳腺癌的M2巨噬细胞中升高。Neddylation修饰后的PTEN蛋白与DLST存在相互作用。结论:DLST在HER2阳性乳腺癌患者中高表达,与其恶性进程呈正相关,且不利于HER2阳性乳腺癌患者的总体生存预后,初步的机制研究认为DLST与Neddylation修饰后的PTEN蛋白具有相互作用。除此之外,DLST会抑制肿瘤细胞凋亡,并且促进M2型巨噬细胞的浸润。因此,DLST可能成为HER2阳性乳腺癌患者的一种潜在治疗靶标和预后指标。
- 凌思惠彭志强佟建蒙谭雅文谢萍
- CUL4A-DDB1细胞稳定株筛选及DNA双链断裂模型构建被引量：1
- 2012年
- 目的为了鉴定并验证CUL4A-DDB1泛素连接酶复合体中参与DNA损伤修复反应过程的1～2种关键成分在损伤识别、早期及晚期修复中的动态变化,拟构建含有串联亲和纯化(TAP)标签载体并筛选高表达CUL4A/DDB1的细胞株,建立DNA双链断裂模型。方法利用PCR获得CUL4A/DDB1基因,构建重组表达载体pNTAP-A-CUL4A/DDB1;使用顺铂和电离辐射刺激等外界刺激建立合适的DNA双链断裂细胞模型,使用G418筛选稳定表达CUL4A/DDB1的细胞株。结果与结论成功构建pNTAP-A-CUL4A/DDB1表达载体,建立合适的DNA双链断裂细胞模型,筛选得到稳定表达CUL4A/DDB1的细胞稳定株,为下一步质谱分析CUL4A-DDB1泛素连接酶在DNA损伤修复过程中的新功能打下基础。
- 黄思斯焦杨谢萍王青张令强
- 关键词：DNA损伤串联亲和纯化
- RBBP6敲除小鼠胚胎致死原因的探讨被引量：1
- 2012年
- 目的探索成视网膜细胞瘤基因结合蛋白6(Rb binding protein 6,RBBP6)基因敲除小鼠胚胎致死的原因。方法敲低细胞内源性RBBP6后检测磷酸化组蛋白H2AX(phosphorylated histone H2AX,γH2AX)的蛋白水平,利用免疫组化检测RBBP6-/-小鼠胚胎中γH2AX的蛋白水平,由此分析两者的相关性。结果 RBBP6敲低的细胞中γH2AX蛋白水平显著上调,RBBP6-/-小鼠胚胎中γH2AX的蛋白水平也明显上调。结论 RBBP6-/-小鼠胚胎中γH2AX蛋白水平显著升高,从而引发基因组的不稳定性,是RBBP6-/-小鼠胚胎致死的原因之一,并提示RBBP6可能参与DNA损伤应答。
- 徐亮李大虎谢萍王少霞李杨彭瑞云张令强汪思应
- 关键词：DNA损伤免疫组化
- 微管结合蛋白NuSAP的组织表达谱分析被引量：9
- 2010年
- 目的探讨微管结合蛋白NuSAP的组织分布特征。方法利用组织斑点杂交和Northern杂交分析NuSAP在多种组织中的分布情况,RT-PCR分析NuSAP在多种肿瘤细胞系中的mRNA水平,Western印迹分析NuSAP在多种肿瘤细胞系中的蛋白水平。结果 NuSAP的组织表达谱分析表明该基因在胸腺、胎肝、骨髓中高表达,提示NuSAP在造血免疫中可能发挥重要功能;在多数肿瘤细胞中均可检测到NuSAP的表达,为分析该基因的功能提供了线索。结论本研究揭示了NuSAP是一种组织特异性的微管结合蛋白,可能在造血/免疫组织中发挥重要功能,研究结果对肿瘤、免疫等疾病的防治具有一定的科学意义。
- 谢萍李璐张令强贺福初
- 关键词：微管结合蛋白组织表达谱RT-PCR
- 他莫昔芬体外促进HepG2细胞脂肪变性观察被引量：1
- 2014年
- 目的：研究他莫昔芬（TAM）对体外培养的HepG2细胞脂肪变性以及脂类代谢调控关键因子表达的影响。方法应用油酸（50μmol/L）处理HepG2细胞，诱导细胞脂肪变性体外模型，同时给予不同浓度的TAM （5～20μmol/L）干预72 h；采用油红O染色和甘油三酯含量测定检测HepG2细胞内脂质聚集情况；应用蛋白印迹法检测固醇调节元件结合蛋白-1c（SREBP-1c）、脂肪酸合成酶（FAS）、硬脂酰辅酶A去饱和酶（SCD）、肉酯软脂酰基转移酶（CPT1）和微粒体甘油三酯转移蛋白（MTP）的表达；采用细胞活性检测试剂盒测定细胞活性。结果在干预72 h后，模型组细胞内甘油三酯含量为（16.53＆#177;0.17） mg/100 mg蛋白质，在5μmol/L TAM处理细胞内甘油三酯含量为（17.77＆#177;0.05） mg/100mg蛋白质，与模型组无显著性差异，但在10μmol/L和20μmol/L TAM处理组较模型组分别增加了31%[（21.57＆#177;0.16） mg/100 mg蛋白质]和44%[（23.82＆#177;0.44） mg/100 mg蛋白质]，（P＆lt;0.05）；TAM上调细胞内SREBP-1c、FAS、SCD和MTP蛋白表达，但并不改变CPT1蛋白表达；TAM在5～20μmol/L范围内不影响HepG2细胞活性。结论 TAM可促进油酸诱导的HepG2细胞脂肪变性，其主要机制可能是通过上调SREBP-1c及其下游基因，如FAS和SCD的表达而增加了脂肪酸的合成。
- 赵斐谢萍姜佳丽张令强安威展玉涛
- 关键词：HEPG2细胞他莫昔芬脂肪变甘油三酯
- PTEN Nedd8修饰作为乳腺癌新型标志物及其特异性抗体的发明与应用
- 本发明公开了PTEN Nedd8修饰作为乳腺癌新型标志物以及其特异性抗体的发明与应用。本发明提供了PTEN蛋白K402位点的Nedd8修饰作为标志物在制备用于评判乳腺癌分级分期的产品中的应用，以及在制备用于预测乳腺癌预后...
- 张令强谢萍彭志强陈玉娇杜梦鸽
- 文献传递
