邓龙文
- 作品数：11 被引量：126H指数：7
- 供职机构：湖南医科大学肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 应用代表性差异分析法筛选人癌候选抑癌基因被引量：7
- 1999年
- 运用ｃＤＮＡ代表性差异分析法（ｃＤＮＡｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎａｌｄｉｆｅｒｅｎｃｅａｎａｌｙｓｉｓ，ｃＤＮＡＲＤＡ），以正常人鼻咽上皮细胞及鼻咽癌ＨＮＥ１细胞作为比较的样品来源，分离了四个在鼻咽癌中缺失的ｃＤＮＡ片段．以此四个片段作探针，分别进行ＤＮＡ杂交、ＲＮＡ杂交，结果显示，这些差异性的ｃＤＮＡ序列确实来自正常人鼻咽上皮且只在其中表达和／或在鼻咽癌ＨＮＥ１中表达降低，并在鼻咽癌病人中存在不同程度的缺失．序列分析结果表明这些差异性表达的基因为具有相当抑癌基因功能的已知基因和可能与鼻咽癌相关的抑癌基因的新基因．从而说明ｃＤＮＡＲＤＡ是一种高效、敏感。
- 湛凤凰江宁曹利邓龙文周鸣谢奕曾朝阳李桂源
- 关键词：鼻咽癌抑癌基因
- 精细定位和克隆9p21-22区域内鼻咽癌候选抑瘤基因被引量：48
- 2000年
- 目的：进一步精细限定鼻咽癌９ｐ２１－２２区域等位基因杂合性丢失的频率和范围，筛选和克隆其共同缺失区内鼻咽癌相关的候选抑瘤基因。方法：应用１１个定位于 ９ｐ２１－２２区域的高密度微卫星位点，检测 ２５例低分化鼻咽癌患者的杂合性丢失，确定其共同缺失区；用ＲＴ－ＰＣＲ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ筛出在鼻咽癌细胞株ＨＮＥ１和鼻咽癌活检组织中表达下调的、定位于共同缺失区内的 ３’末端ＥＳＴｓ（Ｅｘｐｒｅｓｓ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ｔａｇｓ）；采用 ＲＡＣＥ技术和生物信息学资源克隆出候选ＥＳＴ的全长ｃＤＮＡ。结果： ２５例患者中有１７例（６８％）存在一个或多个位点的杂合性丢失，其中Ｄ９ｓ１６１（３５．０％，７／２０），Ｄ９Ｓ１６７８（３１．５％，６／１９），Ｄ９Ｓ２６３（３．３％，６／１８）和Ｄ９Ｓ１８５３（３３．３％，７／２１）四个紧邻位点的丢失频率相对较高，并发现六位患者在该四个位点表现为连续性缺失；筛选Ｄ９Ｓ１６１－Ｄ９Ｓ１８５３区域内２５个代表新基因的３’末端ＥＳＴｓ序列，发现一个ＥＳＴ（ｄｂＥＳＴ：２０８８２５）在鼻咽癌细胞株ＨＮＥ１及７３％（１１／１５）的活检组织中表达降低， Ｍｕｌｔｉｐｌｅ Ｔｉｓｓｕｅ Ｎｏｒｔ
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- 关键词：鼻咽肿瘤染色体杂合性丢失克隆
- 鼻咽癌染色体7q32区域微缺失的研究被引量：7
- 2000年
- 目的 进一步明确鼻咽癌染色体 7q32的 D7S5 0 0 - D7S495附近区域高频率等位基因缺失的范围。方法 采用更高密度的微卫星标记位点 ,分析 30个鼻咽癌病例等位基因杂合性缺失的情况。结果30例患者中有 19例 (6 3.3% )存在杂合性缺失 ;D7S5 0 0 - D7S5 0 9- D7S495是高频率缺失集中的区域 ,共同缺失区在 D7S5 0 9附近。结论 D7S5 0
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- 关键词：鼻咽癌等位基因缺失抑癌基因
- 构建7q32区域鼻咽癌和正常鼻咽上皮细胞部分基因的表达图谱被引量：13
- 1998年
- 目的构建７ｑ３２区域鼻咽癌细胞和组织及原代培养人正常鼻咽上皮细胞的部分基因表达图谱。方法通过差异ＲＴ－ＰＣＲ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交的方法检测定位于７ｑ３２区域的２０个ＥＳＴ在鼻咽癌细胞和鼻咽癌组织及原代培养人正常鼻咽上皮细胞ｍＲＮＡ的表达水平。结果８个ＥＳＴ在鼻咽癌细胞ＨＮＥ１和原代培养人正常鼻咽上皮细胞中表达量较一致，７个ＥＳＴ在两种细胞中均无表达，３个ＥＳＴ（Ｗ７２６８８、Ｈ１９８３０、ＡＡ１３０６３０）在鼻咽癌细胞株中表达上调，而２个ＥＳＴ（ＡＡ０７０４３７、Ｈ９０８８２）在原代培养人鼻咽上皮细胞中表达上调。在１３例鼻咽癌活检组织中３０．７％（４／１３）的ＡＡ０７０４３７表达下调，７７％（１０／１３）的Ｗ７２６８８和７７％（１０／１３）的Ｈ１９８３０表达上升。结论构建了７ｑ３２区域鼻咽癌细胞和组织及原代培养人正常鼻咽上皮细胞部分基因表达图谱，并初步认为Ａ０７０４３７的表达下调和Ｗ７２６８８、Ｈ１９８３０的过表达与鼻咽癌的发生有关。
- 江宁湛凤凰谢奕曾朝阳周鸣邓龙文李桂源
- 关键词：鼻咽肿瘤
- cDNA代表性差异分析法分离鼻咽癌上皮细胞株HNE_1表达差异cDNA序列的初步研究被引量：31
- 1998年
- 目的寻找鼻咽癌中差异性表达基因，包括与鼻咽癌发病相关的候选抑瘤基因。方法应用ｃＤＮＡ代表性差异分析法（ＲＤＡ），分离原代培养的正常人鼻咽上皮细胞与鼻咽癌细胞株ＨＮＥ１中差异表达的ｃＤＮＡ序列，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交被用来分析差异性表达产物的来源，最后，将这些序列克隆到ｐＧＥＭ－Ｔｅａｓｙ载体中，并用链终止法测序。结果在第４轮杂交及扩增反应后，获得４条差异性条带。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交证明，这些差异性片段来自作为“检测”扩增子的正常人鼻咽上皮，在鼻咽癌细胞株ＨＮＥ１中不表达或表达降低。序列分析这些差异性片段的克隆，发现一些序列是与已知基因高度同源的基因，包括一些看家基因；另有一些基因则为新基因序列。结论鼻咽癌的发生是一个多基因参与的过程，所获得的差异性片段中，与之同源的一些已知基因具有抑瘤功能。
- 湛凤凰江宁曹利邓龙文谭国林周鸣谢奕李桂源
- 关键词：鼻咽癌抑瘤基因CDNA
- 鼻咽癌染色体3p21-26的等位基因杂合性丢失研究被引量：10
- 1998年
- 目的细胞遗传学研究表明，３号染色体缺失是鼻咽癌常见的染色体异常之一。分子生物学研究表明，染色体３ｐ在鼻咽癌中出现高频率的等位基因杂合性丢失（ＬＯＨ）。本研究将进一步确定鼻咽癌３ｐ等位基因杂合性丢失的频率及范围。方法应用位于３ｐ２１２６区域１６个微卫星多态性位点，对２４例低分化鼻咽癌患者进行了ＬＯＨ分析。结果２４例患者中有１６例存在杂合性丢失（６６．７％）。丢失频率最高的两个位点是Ｄ３Ｓ１５６０（５０％，１１／２１）和Ｄ３Ｓ１６２０（５０％，９／１８）。在具有丢失的１６例患者中，８例显示为１个连续的多个相邻位点的杂合性丢失区域，５例患者存在２个或２个以上的杂合性丢失区。病例１，３，４，７，８，１０，１６，１７，１８，１９和２２在Ｄ３Ｓ１５９７和Ｄ３Ｓ１２９７之间，表现为一个不同大小的杂合性丢失区。结论最小共同丢失区位于Ｄ３Ｓ１５６０Ｄ３Ｓ１６２０（３ｐ２５．３２６．２）之间，提示该区域有一个尚未克隆的、与晚期鼻咽癌明显相关的抑癌基因。
- 邓龙文江宁谭国林周鸣湛凤凰谢奕曹莉李桂源
- 关键词：鼻咽肿瘤染色体3P等位基因杂合性丢失
- 一个定位在7q32染色体区域的鼻咽癌负相关EST被引量：3
- 1999年
- 为了分离和克隆定位于7q32染色体区域的与鼻咽癌发病有关的抑瘤基因，检测了鼻咽癌活检组织及配对外周血标本中7q32微卫星DNA多态性位点的基因型，发现在7q32区域存在30％左右的杂合性丢失。从Internet中查询到定位于7q32区域的所有EST，对其中20个EST进行分析。RT－PCR和Northern杂交发现AA070437EST在鼻咽癌细胞株HNE1中表达微弱，而在正常鼻咽上皮原代培养细胞中表达强烈。差异RTMCR结果显示，鼻咽癌活检组织中有30．7％存在该EST表达下调或不表达。差异PCR和Southern杂交结果显示鼻咽癌活检组织DNA中存在该EST的29．1％等位基因丢失情况。与GeneBank等数据库比较表明该EST所代表的基因是一个新基因。结果表明AA070437EST在鼻咽癌发病中有明显负相关，是一个定位于7q32的鼻咽癌抑瘤基因候选者。
- 江宁邓龙文谭国林湛凤凰周鸣曹莉邱元正谢奕李桂源
- 关键词：鼻咽癌杂合性丢失EST基因表达
- 一个定位于染色体3p25.3的新基因及在鼻咽癌中的表达分析被引量：11
- 2000年
- 目的 分离位于染色体 3p2 4- 2 6区域中鼻咽癌相关的新基因。方法 在染色体 3p2 4- 2 6鼻咽癌杂合性丢失 (loss of heterozygosity,L OH)高频区 ,用 RT- PCR及 Northern杂交 ,检测了 2 0个表达序列标记 (expressed sequence tag,EST)在鼻咽癌细胞株 HNE1和原代培养的正常鼻咽上皮细胞中的表达水平 ,并对其中一个在鼻咽癌细胞株 HNE1中表达下调的 EST,在 7个正常鼻咽活检组织和 19例鼻咽癌活检组织中的表达进行了检测。用 c DNA文库筛选方法获得其全长 c DNA序列 ,对该序列进行了初步分析。结果 获得了一个位于染色体 3p2 5 .3的新基因 ,命名为 NAG- 7基因 (Gen Bank收录编号 :AF0 86 70 9)。该基因在 2 6 .3% (5 / 19)的鼻咽癌活检组织中表达下调 ,全长 16 6 7bp,其开放阅读框 (open reading frame,ORF)编码一个含 94个氨基酸的碱性蛋白质 ,相对分子质量为 110 2 3870 ,预测为一跨膜蛋白质。它含有一个蛋白激酶 C磷酸化位点和肉豆蔻基位点。迄今为止 ,NAG- 7基因序列在基因库中未见任何同源性基因。结论 NAG- 7基因是一个在鼻咽癌中表达下调的新基因 ,它的改变可能参与了鼻咽癌的发生发展。
- 谢奕邓龙文江宁湛凤凰曹莉邱元正唐湘娜李桂源
- 关键词：鼻咽肿瘤染色体3P基因克隆
- 人鼻咽上皮细胞株HNE-1染色体高分辨显带的研究被引量：9
- 1993年
- 作者首次采用高分辨染色体G显带技术,对本室建立的人鼻咽癌上皮细胞株“湖南一号”(HNE-1)进行了细胞遗传学研究。HNE-1细胞株在第15代时,染色体数目变异在68—78之间,众数为74。所检细胞均含有结构异常的染色体。出现频率比较高的标记染色体15条,其中某些标记染色体只有在高分辨染色体上才清楚地显示出结构重排。此外还发现少数细胞内存在双微体和核内复制。与其它鼻咽癌上皮细胞株比较,发现7号染色体部分缺失del(7)(q32)在CNE、HNE-1及鼻咽癌活检组织中同时存在,这一标记染色体可能与鼻咽癌的发生有重要联系。
- 邓龙文姚开泰
- 关键词：上皮细胞株染色体鼻咽肿瘤
- 人鼻咽癌上皮细胞株HNE-2细胞遗传学研究被引量：7
- 1993年
- 对一株低分化鼻咽癌上皮细胞株HNE-2进行了细胞遗传学研究,这是第6株迄今已报道的鼻咽癌上皮细胞株染色体G显带核型资料。发现7号染色体长臂部分缺失不仅在所有5株鼻咽癌上皮细胞株中均存在,而且在鼻咽癌活检组织中也检测到。其缺失的共同区域为7q32→qter。另一标记染色体3q^+亦经常在鼻咽癌上皮细胞株及活检组织中检测到,但其断裂点及增加的染色体部分表现出很大的异质性。
- 邓龙文祝和成李桂源姚开泰
- 关键词：肿瘤上皮细胞株染色体
