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周鸣: 作品数：19 被引量：163H指数：9; 供职机构：湖南医科大学肿瘤研究所更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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一个定位在7q32染色体区域的鼻咽癌负相关EST被引量：3: 1999年; 为了分离和克隆定位于7q32染色体区域的与鼻咽癌发病有关的抑瘤基因，检测了鼻咽癌活检组织及配对外周血标本中7q32微卫星DNA多态性位点的基因型，发现在7q32区域存在30％左右的杂合性丢失。从Internet中查询到定位于7q32区域的所有EST，对其中20个EST进行分析。RT－PCR和Northern杂交发现AA070437EST在鼻咽癌细胞株HNE1中表达微弱，而在正常鼻咽上皮原代培养细胞中表达强烈。差异RTMCR结果显示，鼻咽癌活检组织中有30．7％存在该EST表达下调或不表达。差异PCR和Southern杂交结果显示鼻咽癌活检组织DNA中存在该EST的29．1％等位基因丢失情况。与GeneBank等数据库比较表明该EST所代表的基因是一个新基因。结果表明AA070437EST在鼻咽癌发病中有明显负相关，是一个定位于7q32的鼻咽癌抑瘤基因候选者。; 江宁邓龙文谭国林湛凤凰周鸣曹莉邱元正谢奕李桂源; 关键词：鼻咽癌杂合性丢失 EST 基因表达

pcDNA3.1表达载体转染对细胞生长的影响被引量：6: 2001年; 为了探讨真核表达载体转染对细胞生长的影响，通过脂质体介导将ｐｃＤＮＡ３．１（＋）表达载体ＤＮＡ转染鼻咽癌细胞系ＨＮＥ１，Ｇ４１８筛选后，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交鉴定稳定表达细胞株，以ＨＮＥ１细胞为对照，观察ｐｃＮＡ３．１（＋）／ＨＮＥ１克隆细胞的生物学特性；结果显示，在ｐｃＤＮＡ３．１（＋）／ＨＮＥ１阳性克隆中，一株细胞克隆培养过程中发生自溶性死亡，一株细胞生长明显受到抑制，另一株细胞生长无明显影响，揭示在宿主细胞中ｐｃＤＮＡ３.１（＋）ＤＮＡ与宿主基因组ＤＮＡ发生了随机整合，从而表现不同的细胞生物学改变。; 余鹰周鸣曹利唐珂李伟芳李桂源; 关键词：真核表达系统哺乳动物细胞

9p21-22区域鼻咽癌候选抑瘤基因的克隆及其功能的初步研究: 染色体9p21-22区域高频率的等位基因杂合性丢失（Loss of Heterozygosity,LOH）是肺癌、乳腺癌、膀胱癌和鼻咽癌等多种肿瘤中的常见事件。David Sidransky 等检测了大量原发性非浸润型和...; 阳剑波宾亮华李忠花张小慧李江钱骏张必成周鸣谢奕李桂源; 关键词：鼻咽癌杂合性丢失抑瘤基因克隆; 文献传递

连接蛋白基因Cx26的一个可能的新启动区: 2000年; 目的　探讨人类连接蛋白基因 2 6 (connexin2 6 ,Cx2 6 )的调控机理。方法　对 Cx2 6基因转译起始点上游的一个 DNase- 1超敏区片段 1.6 kb进行序列分析和 CAT报告基因分析。结果　 Cx2 6 - 1.6 kb片段具有启动子功能。结论　 Cx2 6 - 1.6 kb中含有 2个 GT盒 (分别位于 - 6 15 8bp和 - 6 2 13bp) ,1个TTAAAA盒位于 - 6 2 37bp,这是在人类 Cx2 6基因中新发现的第 2个启动区。; 彭白露张洵周鸣曾朝阳李桂源; 关键词：连接蛋白基因 CX26 乳腺癌

鼻咽癌染色体7q32区域微缺失的研究被引量：7: 2000年; 目的　进一步明确鼻咽癌染色体 7q32的 D7S5 0 0 - D7S495附近区域高频率等位基因缺失的范围。方法　采用更高密度的微卫星标记位点 ,分析 30个鼻咽癌病例等位基因杂合性缺失的情况。结果30例患者中有 19例 (6 3.3% )存在杂合性缺失 ;D7S5 0 0 - D7S5 0 9- D7S495是高频率缺失集中的区域 ,共同缺失区在 D7S5 0 9附近。结论　 D7S5 0; 唐湘娜阳剑波邓龙文江宁周鸣曾朝阳谢奕谭国林邱元正李桂源; 关键词：鼻咽癌等位基因缺失抑癌基因

构建7q32区域鼻咽癌和正常鼻咽上皮细胞部分基因的表达图谱被引量：13: 1998年; 目的构建７ｑ３２区域鼻咽癌细胞和组织及原代培养人正常鼻咽上皮细胞的部分基因表达图谱。方法通过差异ＲＴ－ＰＣＲ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交的方法检测定位于７ｑ３２区域的２０个ＥＳＴ在鼻咽癌细胞和鼻咽癌组织及原代培养人正常鼻咽上皮细胞ｍＲＮＡ的表达水平。结果８个ＥＳＴ在鼻咽癌细胞ＨＮＥ１和原代培养人正常鼻咽上皮细胞中表达量较一致，７个ＥＳＴ在两种细胞中均无表达，３个ＥＳＴ（Ｗ７２６８８、Ｈ１９８３０、ＡＡ１３０６３０）在鼻咽癌细胞株中表达上调，而２个ＥＳＴ（ＡＡ０７０４３７、Ｈ９０８８２）在原代培养人鼻咽上皮细胞中表达上调。在１３例鼻咽癌活检组织中３０．７％（４／１３）的ＡＡ０７０４３７表达下调，７７％（１０／１３）的Ｗ７２６８８和７７％（１０／１３）的Ｈ１９８３０表达上升。结论构建了７ｑ３２区域鼻咽癌细胞和组织及原代培养人正常鼻咽上皮细胞部分基因表达图谱，并初步认为Ａ０７０４３７的表达下调和Ｗ７２６８８、Ｈ１９８３０的过表达与鼻咽癌的发生有关。; 江宁湛凤凰谢奕曾朝阳周鸣邓龙文李桂源; 关键词：鼻咽肿瘤

应用混合探针文库筛选法克隆多个肿瘤差异表达基因被引量：12: 2000年; 目的：进一步分离在鼻咽癌组织中表达下调／缺失的候选抑瘤基因。方法：采用PCR方法对有差异表达的cDNA序列（AF152605和AF091517）进行探针标记，Northern杂交确定其mRNA转录本大小，进而混合两种PCR探针对骨骼肌cDNA文库进行筛选，阳性克隆经PCR鉴定后直接测序。结果：克隆了转录本为2．2Kb、1．1Kb和1．4Kb三个基因，GenBank登录号分别为AF179285、AF170307和AF194971。结论：混合探针文库筛选法是同时、快速获得多个cDNA片段其全长序列的可借鉴实验手段。; 余鹰谢奕朱诗国周鸣张必成李桂源public.cs.hn.cn; 关键词：鼻咽肿瘤文库筛选抑瘤基因基因克隆

cDNA代表性差异分析法分离鼻咽癌上皮细胞株HNE_1表达差异cDNA序列的初步研究被引量：31: 1998年; 目的寻找鼻咽癌中差异性表达基因，包括与鼻咽癌发病相关的候选抑瘤基因。方法应用ｃＤＮＡ代表性差异分析法（ＲＤＡ），分离原代培养的正常人鼻咽上皮细胞与鼻咽癌细胞株ＨＮＥ１中差异表达的ｃＤＮＡ序列，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交被用来分析差异性表达产物的来源，最后，将这些序列克隆到ｐＧＥＭ－Ｔｅａｓｙ载体中，并用链终止法测序。结果在第４轮杂交及扩增反应后，获得４条差异性条带。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交证明，这些差异性片段来自作为“检测”扩增子的正常人鼻咽上皮，在鼻咽癌细胞株ＨＮＥ１中不表达或表达降低。序列分析这些差异性片段的克隆，发现一些序列是与已知基因高度同源的基因，包括一些看家基因；另有一些基因则为新基因序列。结论鼻咽癌的发生是一个多基因参与的过程，所获得的差异性片段中，与之同源的一些已知基因具有抑瘤功能。; 湛凤凰江宁曹利邓龙文谭国林周鸣谢奕李桂源; 关键词：鼻咽癌抑瘤基因 CDNA

鼻咽癌染色体3p21-26的等位基因杂合性丢失研究被引量：10: 1998年; 目的细胞遗传学研究表明，３号染色体缺失是鼻咽癌常见的染色体异常之一。分子生物学研究表明，染色体３ｐ在鼻咽癌中出现高频率的等位基因杂合性丢失（ＬＯＨ）。本研究将进一步确定鼻咽癌３ｐ等位基因杂合性丢失的频率及范围。方法应用位于３ｐ２１２６区域１６个微卫星多态性位点，对２４例低分化鼻咽癌患者进行了ＬＯＨ分析。结果２４例患者中有１６例存在杂合性丢失（６６．７％）。丢失频率最高的两个位点是Ｄ３Ｓ１５６０（５０％，１１／２１）和Ｄ３Ｓ１６２０（５０％，９／１８）。在具有丢失的１６例患者中，８例显示为１个连续的多个相邻位点的杂合性丢失区域，５例患者存在２个或２个以上的杂合性丢失区。病例１，３，４，７，８，１０，１６，１７，１８，１９和２２在Ｄ３Ｓ１５９７和Ｄ３Ｓ１２９７之间，表现为一个不同大小的杂合性丢失区。结论最小共同丢失区位于Ｄ３Ｓ１５６０Ｄ３Ｓ１６２０（３ｐ２５．３２６．２）之间，提示该区域有一个尚未克隆的、与晚期鼻咽癌明显相关的抑癌基因。; 邓龙文江宁谭国林周鸣湛凤凰谢奕曹莉李桂源; 关键词：鼻咽肿瘤染色体3P 等位基因杂合性丢失

人类连接蛋白基因Cx26的上游调控部位: 1999年; 人类连接蛋白２６（Ｃｏｎｎｅｘｉｎ２６，Ｃｘ２６）已被看作乳腺癌上皮细胞中的抑瘤基因候选者．为了阐明此基因的调控机理，对其转译起始点上游的一个具有启动功能的１．６ｋｂ片段采用ｅｘｏ Ⅲ构建１０个单向删除重组体后进行了ＣＡＴ报告基因分析．结果表明，此１．６ｋｂ片段其启动子功能部位位于５′端２００ｂｐ范围内．其中含有－ＴＧＴ盒（位于１８２～１８７ｂｐ），一个ＴＴＡＡＡＡ盒位于１５８～１６３ｂｐ，这是人类Ｃｘ２６基因的又一启动区，这些发现无疑地对了解和阐明Ｃｘ２６基因在乳腺发育过程中及其病理生理作用的复杂调控具有特别重要的意义．; 彭白露周鸣曾朝阳李桂源; 关键词：基因调控 CAT 乳腺发育

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