邢海燕
- 作品数：48 被引量：165H指数：8
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 急性淋巴系白血病微小残留病的动态监测被引量：3
- 2011年
- 本研究旨在建立免疫球蛋白重链基因重排的实时定量PCR(RQ-PCR)检测方法,并探讨其在急性淋巴系白血病(ALL)微小残留病(MRD)动态监测中的应用价值。采用多重PCR筛选初诊ALL患者的IgH基因单克隆重排,PCR产物测序并进行序列比对,据其连接区序列设计等位基因特异性寡核苷酸(ASO)前向引物,联合下游保守JH引物和保守JH探针,用Taqman探针法RQ-PCR监测ALL患者治疗过程中各时间点的MRD水平,分析其敏感性和特异性。结果表明,在51例ALL患者中鉴定出21例单克隆IgH重排,其中有条件定量的为15例,标准曲线的斜率在-3.1～-3.9,相关系数均>0.98,敏感性在10-4-10-5,仅1例敏感性为10-3,定量范围多在10-4以下,背景的非特异性扩增均在低水平,不影响定量。7例MRD水平在10-3以下的患者一直持续缓解,8例MRD水平>10-3,复发率较高。结论:RQ-PCR方法定量IgH基因单克隆重排用于监测ALL患者的MRD水平,具有敏感性高、特异性强、定量结果可靠的优点。IgH重排水平与ALL患者预后高度相关。
- 单士龙邢海燕田征唐克晶饶青王敏王建祥
- 关键词：免疫球蛋白重链基因重排微小残留病
- 组成活化型Rac1 GTP酶通过上调促血小板血成素受体的表达促进白血病细胞的静息被引量：1
- 2017年
- 目的:研究Rac1 GTP酶的活化对白血病细胞静息的影响,并探索其机制。方法:构建Rac1组成活化型慢病毒载体,以此感染急性髓系白血病KG-1a细胞,比较感染了组成活化型Rac1的KG-1a(Rac1-V12-KG-1a)细胞和感染空载体的KG-1a(pCDH-KG-1a)细胞在G0期的比例差异。以Rac1特异性抑制剂NSC23766处理感染后KG-1a细胞,4 d后检测两组细胞G0期比例的变化。实时定量PCR检测两组细胞中与细胞周期和细胞静息相关分子的表达。流式细胞术检测小鼠Rac1GTP酶高度活化的AMLI-ETO9a白血病细胞模型中促血小板生成素受体(myeloproliferative leukemia MPL)-和MPL+细胞群在G0期的比例。结果:感染了组成活化型Rac1的Rac1-V12-KG-1a细胞的G0期细胞比例显著高于感染空载体的p CDH-KG-1a细胞的比例[(15.30±0.60)%vs(11.50±0.17)%,P<0.05];抑制剂处理KG-1a细胞后,随着抑制剂浓度的增加G0期细胞比例显著下降(P<0.05)。实时定量PCR检测结果显示,周期抑制因子P21、P27、P57的mRNA表达水平在Rac1-V12-KG-1a细胞表达均有不同程度的上调,静息相关调节分子N-Cadherin和MPL m RNA表达水平均显著升高(P<0.05);流式检测结果显示,MPL+白血病细胞群的比例在G0期显著高于MPL-组[(40.3±3.5)%vs(19.05±7.65)%,P<0.05]。结论:白血病细胞中Rac1 GTP酶的活化通过上调MPL等细胞外在调节因子的表达增加休眠期细胞的比例,从而促进白血病细胞维持静息状态。
- 李欢王继英于沛陈树英邢海燕田征唐克晶王敏饶青
- 关键词：RAC1GTP酶白血病细胞静息微环境
- 凋亡抑制蛋白c-FLIP高表达与白血病细胞耐药的关系被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨抗凋亡蛋白c-FLIP的表达对于白血病细胞系Kasumi-1细胞耐药的作用及其机制。方法:应用Tet-on系统,通过强力霉素(doxycycline,Dox)调控c-FLIP的条件性表达;将c-FLIP基因与慢病毒目的载体p LVX-Tight-puro连接,感染Kasumi-1细胞并获得稳定表达c-FLIP蛋白的稳定克隆;应用实时荧光定量PCR和Western blot方法证实c-FLIP在mRNA和蛋白水平的过表达情况;通过流式细胞术分析Fas激动剂CH11和HDAC抑制剂苯丁酸钠处理的Kasumi-1细胞的凋亡变化,以及过表达c-FLIP蛋白后对凋亡发生的影响;应用吉姆萨染色观察细胞凋亡形态变化,Western blot检测caspase-8凋亡信号通路的激活情况。结果:CH11和苯丁酸钠能够诱导Kasumi-1细胞凋亡,在Kasumi-1细胞过表达c-FLIP蛋白后,细胞能够抵抗CH11和苯丁酸钠诱导的凋亡;Western blot显示c-FLIP过表达阻滞了caspase-8凋亡信号通路的激活。结论:c-FLIP基因高表达使白血病细胞系Kasumi-1细胞对CH11和苯丁酸钠产生耐药作用。
- 刘佳王颖李赛赛徐颖茜邢海燕唐克晶田征饶青王敏王建祥
- 关键词：C-FLIP白血病KASUMI-1细胞白血病细胞耐药
- 核受体辅助抑制因子中ETO结合结构域的确定
- 2002年
- 目的 为消除急性髓系白血病标志基因AML1/ETO的活性 ,确定核受体辅助抑制因子(nuclearreceptorco repressor,N CoR)与ETO基因相互作用的活性部位。方法 用PCR扩增不同区段的N CoR(N CoRY) ,克隆入酵母表达质粒pGADGL中 ,构建获得pGADGL/N CoRY。应用酵母双杂交技术及X gal染色确定pGADGL/N CoRY 10个区段的N CoR是否与ETO结合。结果 N CoR的 988～ 112 6氨基酸残基与 15 5 1～ 180 1氨基酸残基共存时 ,才能与ETO发生结合作用 ,是与ETO相互作用的结构域。结论 N CoR两个结构域能与ETO的两个锌指结构作用 ,保持两种蛋白之间的稳定结合。
- 王敏郝长来唐克晶唐克晶邢海燕张屹田征
- 关键词：髓系白血病
- 用于靶向结合淋巴细胞白血病细胞的抗CD19的工程抗体及其用途
- 本发明公开了一种用于靶向结合淋巴细胞白血病细胞的抗CD19的工程抗体及其应用，为下一步研制靶向治疗白血病的基因工程药物奠定了基础。本发明涉及抗CD19单克隆抗体HI19a重链和轻链可变区基因，由所述基因编码的多肽，含有所...
- 王敏王建祥陈森廖小龙饶青邢海燕田征唐克晶林冬
- 文献传递
- 5-氮杂脱氧胞苷增强苯丁酸钠对Kasumi-1细胞的诱导分化和凋亡作用被引量：8
- 2005年
- 目的 探讨组蛋白脱乙酰化酶抑制剂苯丁酸钠 (PB)联合DNA甲基化抑制剂 5 氮杂脱氧胞苷 (5 Aza CdR)阻断AML1 ETO的生物学功能 ,消除AML1 ETO的转录抑制 ,诱导t(8;2 1)急性髓系白血病细胞系Kasumi 1细胞的分化和凋亡作用。方法 应用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法观察PB单药或联合 5 Aza CdR对细胞生长的抑制作用 ;流式细胞术分析细胞周期和检测髓系分化抗原CD11b和CD13的表达 ,判断细胞分化 ;AnnexinV和碘化丙啶 (PI)双标记 ,经流式细胞术分析细胞早期凋亡。结果 (1) 5 Aza CdR可增强PB对Kasumi 1细胞的生长抑制作用 ,半数抑制浓度 (IC50 )下降为 1.95mmol/L。 (2 )PB处理使Kasumi 1细胞阻滞于G0 /G1期 ,5 Aza CdR与PB联合则使细胞阻滞于G2 /M期。 (3)低剂量 5 Aza CdR增强PB诱导Kasumi 1细胞髓系分化抗原CD11b和CD13的表达。 (4)低剂量 5 Aza CdR不能增强PB诱导的Kasumi 1细胞凋亡 ,而高剂量 5 Aza CdR增强PB诱导的Kasumi 1细胞早期凋亡。结论 DNA甲基化抑制剂 5 Aza CdR增强脱乙酰化酶抑制剂PB抑制Kasumi 1细胞生长、诱导分化和凋亡的作用。
- 郝长来唐克晶陈森邢海燕王敏王建祥
- 关键词：凋亡作用苯丁酸钠诱导分化CD13
- 转导人AML1a基因的淋巴细胞白血病小鼠模型的制备方法及应用
- 本发明公开了一种转导人AML1a基因的淋巴细胞白血病小鼠模型的制备方法及应用，包含AML1a基因的逆转录病毒载体的构建、逆转录病毒的制备、骨髓细胞的感染、小鼠骨髓移植和模型鉴定。本发明采用分子生物学、细胞生物学等方法转导...
- 王建祥刘向荣王敏饶青邢海燕
- 文献传递
- 癌基因iASPP的克隆、表达与纯化被引量：4
- 2005年
- iASPP是新近发现的高度保守的p5 3相关基因,其蛋白产物定位于细胞核内,具有结合NF κBp65亚基和p5 3功能,进而抑制NF κB的转录调节和p5 3对凋亡的调节功能。利用RT PCR方法从人白血病细胞系U 937中克隆出癌基因iASPP ,将其克隆至原核表达载体pET2 8a( + )中,成功构建iASPP表达载体PIAF ,重组质粒读码框和序列与预期一致。在IPTG诱导下,重组载体大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株,表达产物经SDS PAGE和Westernblot方法分析证实系iASPP融合蛋白。利用Ni离子鳌合层析的方法纯化iASPP融合蛋白,经SDS PAGE鉴定其纯度超过80 %。
- 刁世勇张新伟饶青邢海燕陈森王建祥王敏
- 关键词：癌基因IASPP克隆纯化P53抗体
- 重组蛋白hCD80/anti-CD19 scFv抗B细胞白血病的作用研究
- ＜正＞目的：急性淋巴细胞白血病（ALL）是一种十分常见的血液系统恶性肿瘤,以 B 细胞 ALL （B-ALL）为主。成人 ALL 的疗效较差、生存期
- 陈礼平饶青陈森田征邢海燕刘向荣王敏王建祥
- 文献传递
- 某些血管病循环白细胞自发活化作用的研究被引量：17
- 1997年
- 某些血管病循环白细胞自发活化作用的研究１金永娟２朱文云２邢海燕２吴秉权２李尚珠２由由于白细胞的抗微生物和免疫功能，传统认为白细胞对机体是有益的。但近年来的一些研究表明白细胞在一些疾病（特别是心、脑血管疾病）的早期和发展过程中起着重要作用。流行病学的研...
- 金永娟朱文云邢海燕吴秉权李尚珠
- 关键词：血管疾病活化
