钟铠泽
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
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- 发文基金：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肿瘤细胞中KIF4A磷酸化状太的研究
- KIF4A属于驱动蛋白家族4(kinesinfamilymember4，KIF4)，该蛋白分子在细胞内能以微管为轨道向微管的正极运动，同时又可以结合细胞内许多蛋白分子，在细胞有丝分裂、DNA损伤修复、肿瘤发生发展以及脑神...
- 钟铠泽
- 关键词：肿瘤细胞磷酸化蛋白质谱肺癌
- 染色体驱动蛋白KIF4A稳定低表达胃癌细胞系的构建及鉴定被引量：3
- 2014年
- 目的 构建稳定低表达染色体驱动蛋白KIF4A的胃癌细胞系,观察KIF4A低表达细胞的有丝分裂期纺锤体中央区的形成.方法 针对人类驱动蛋白KIF4A mRNA的编码区设计特异性siRNA序列,构建KIF4A短发夹RNA（shRNA）表达质粒pGPU-GFP-KIF4A.将质粒转染胃癌细胞SGC-7901,经过G418筛选获得稳定低表达KIF4A的细胞株.使用蛋白免疫印迹方法鉴定细胞株内KIF4A蛋白的敲降效果,并通过细胞免疫荧光染色法观察细胞纺锤体中央区的形成.结果 成功获得了3株不同水平稳定低表达KIF4A的SGC-7901细胞株（SGC-shKIF4A）和稳定表达无意义shRNA的对照细胞（SGC-shNC）;同时,与对照细胞SGC-shNC相比,SGC-shKIF4A细胞中有丝分裂纺锤体中央区延长,并随KIF4A蛋白表达水平的降低而增加.结论 成功构建了不同水平稳定低表达KIF4A蛋白的胃癌细胞SGC-shKIF4A,为进一步研究驱动蛋白分子KIF4A的功能及其在胃癌发生发展过程中的作用奠定基础.
- 钟铠泽赵健李陪陈蔚文朱长军董智雄
- 关键词：有丝分裂小分子干扰RNA胃癌细胞
- 人miR-147a真核表达载体的构建及其对肺癌细胞增殖和侵袭的影响被引量：7
- 2012年
- 目的构建人miR-147a真核表达载体,检测其在肺腺癌细胞A549中的表达及对细胞增殖和侵袭能力的影响。方法以A549细胞总RNA为模板,RT-PCR扩增miR-147a的前体序列(pri-mir-147a),插入表达载体pSi-lencer4.1-CMV neo,构建pSilencer4.1-147a重组载体,转染A549细胞,qRT-PCR和报告基因分析检测miR-147a的表达;MTT分析检测外源性miR-147a过表达对A549细胞增殖能力的影响;Matrigel侵袭实验检测外源性miR-147a过表达对A549细胞侵袭能力的影响;报告基因分析检测miR-147a对常见肿瘤信号途径的影响。结果限制性酶切和DNA测序证实pSilencer4.1-147a构建正确;pSilencer4.1-147a转染A549细胞后,qRT-PCR和报告基因分析检测到明显的外源性miR-147a表达;MTT分析和Matrigel侵袭实验结果显示,miR-147a过表达可明显抑制A549细胞的增殖和侵袭能力;报告基因分析结果显示,miR-147a过表达可显著下调pGL4.23-AP1、pGL4.23-ELK1、pGL4.23-cMYC的相对荧光素酶活性。结论成功构建的人miR-147a真核表达载体能够在肺腺癌细胞A549中有效表达,并对A549细胞的增殖和侵袭产生抑制作用,该作用可能与miR-147a对EGFR-RAS-MAPK途径的抑制有关。
- 于洋赵健钟铠泽刘春艳李艺史婧陈蔚文姜安丽
- 关键词：MICRORNA肺肿瘤增殖
- 人中心体的纯化提取及蛋白质谱分析
- 2014年
- 目的提取人类细胞中的中心体,结合蛋白质谱分析,鉴定中心体蛋白组成。方法采用密度梯度离心方法提取K562细胞内中心体。经蛋白免疫印迹鉴定后,对样品进行蛋白质谱分析检测。对已检测出的中心体蛋白分子,应用基因本体(GO)进行系统分析。结果成功提取纯化了人类细胞的中心体,检测出中心体相关蛋白分子γ-Tubulin集聚在特定密度梯度离心分离的细胞裂解液组分中,该组分中无线粒体蛋白VDAC1和核糖体蛋白RPL15。经蛋白质谱分析,发现中心体蛋白组分包括多种细胞质物质运输蛋白、细胞骨架蛋白、膜结合蛋白、蛋白激酶等蛋白分子,涵盖多种细胞内生物信号途径。结论成功提取人细胞内中心体,可为提取纯化不同生长时期细胞中的中心体奠定实验技术基础,结合蛋白质谱分析有助于理解中心体的基本结构和各种功能。
- 钟铠泽赵健袁首道王庐宇荆艳洁郝彤陈健行詹启敏姜伟朱长军潘丽娜
- 关键词：中心体蛋白组学
- 肿瘤细胞中KIF4A磷酸化状态的研究
- KIF4A属于驱动蛋白家族4(kinesin family member4,KIF4),该蛋白分子在细胞内能以微管为轨道向微管的正极运动,同时又可以结合细胞内许多蛋白分子,在细胞有丝分裂、DNA损伤修复、肿瘤发生发展以及...
- 钟铠泽
- 关键词：磷酸化蛋白质谱肺癌
- 文献传递
