陈品林
- 作品数：7 被引量：21H指数：3
- 供职机构：海南大学农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金海南省教育厅高等学校科学研究项目海南省重点科技项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 基因Ⅳ型猪戊型肝炎病毒重组ORF3蛋白抗原间接ELISA诊断方法的建立被引量：6
- 2009年
- 为建立检测猪戊型肝炎病毒(HEV)抗体的间接ELISA诊断方法,将HEV ORF3片段克隆至大肠杆菌表达载体pET42a(+)中,构建了原核表达载体pET42a-ORF3,将其转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达,并对表达的融合蛋白进行Ni2+-NTA柱纯化及SDS-PAGE、Western-blot鉴定,用纯化的融合蛋白作为包被抗原建立了间接ELISA检测方法。结果显示,GST-ORF3在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达,表达的蛋白质分子质量约为45.5 ku,具有良好的抗原性。用建立的间接ELISA检测190份猪血清样品,阳性率为84.7%,与试剂盒检测结果相比,阳性符合率为91.5%。表明,建立的间接ELISA方法具有较好的特异性和灵敏性,可用于猪血清HEV抗体的检测。
- 刘涛杜丽王凤阳雷明崔克成鹰陈品林王轶林杰材满初日嘎
- 关键词：猪戊型肝炎病毒ORF3原核表达间接酶联免疫吸附试验
- 海南原鸡PDCD10的克隆、表达及其蛋白的生物信息学分析被引量：5
- 2010年
- 通过克隆、表达海南原鸡程序性细胞死亡分子10(Programmed cell death10,PDCD10)基因,对其蛋白进行生物信息学分析。采用RT-PCR方法克隆得到海南原鸡PDCD10基因CDS区,将扩增产物与原核表达载体pET42a连接,构建pET42a-PDCD10重组质粒,经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE和Western blot分析;运用生物信息学软件对所获得基因的核苷酸序列进行分析,并预测其编码蛋白的理化性质及二级结构等。克隆获得了PDCD10639bp的CDS区核苷酸序列,融合蛋白分子量约为57ku,生物信息学分析发现,PDCD10CDS区包括1个639bp的开放读码框,编码212个氨基酸。该蛋白不含信号肽,无跨膜区,二级结构中存在大量α-螺旋。研究结果为进一步开展海南原鸡PDCD10的功能研究奠定了坚实的基础。
- 陈欢陈品林杜丽曹献英成鹰刘涛雷明吴科榜王学梅胡日查王凤阳
- 关键词：克隆生物信息学分析
- JAK2结构及其功能研究进展被引量：8
- 2009年
- JAK2作为JAK家族的一个成员，有JH1～JH7七个结构域，分为FERM区（JH3～JH7）、V617F假激酶区（JH2）和激酶区（JH1）3个部分．JAK2与STATs所构成的信号途径在肾小管上皮细胞转分化、骨髓增殖性疾病的发生、白血病的发生和创伤脓毒症等方面都有重要的影响．但是其具体的作用机理还有待进一步的研究．AG490等JAK2特异性抑制剂和姜黄素等非特异性抑制剂能有效地调节JAK2的异常活性，控制与JAKs／STATs信号途径相关的疾病的发生．
- 张巍陈品林杜丽王凤阳祁超
- 关键词：JAK2
- 水牛CD14的克隆与表达
- 目的：本研究旨在克隆、表达水牛CD14基因，并对其蛋白进行纯化及Western Blot鉴定。方法：采用RT-PCR方法从水牛外周血白细胞中扩增得到水牛白细胞分化抗原14(Buffalo cluster of diffe...
- 陈品林
- 关键词：水牛革兰氏阴性菌CD14基因基因克隆
- 五指山小型猪APEX1基因cDNA的克隆及生物信息学分析被引量：1
- 2009年
- [目的]对五指山小型猪脱嘌呤嘧啶核酸内切酶cDNA进行克隆和生物信息学分析。[方法]以构建的五指山小型猪外周血白细胞cDNA文库为材料,采用菌落PCR方法,克隆得到APEX1基因全长cDNA,并运用生物信息学软件对该基因核苷酸序列及其编码蛋白的理化性质及二级结构等进行分析和预测。[结果]生物信息学分析表明,该cDNA全长1392bp,5′非翻译区长132bp,3′非翻译区长303bp,含有一个957bp的完整开放阅读框,编码318个氨基酸。该蛋白的分子量为35kD,等电点为8.05。比对分析表明,五指山小型猪APEX1基因的核酸序列及其氨基酸序列与人、小鼠、黑猩猩等哺乳动物具有较高的相似性。[结论]成功克隆了五指山小型猪A-PEX1基因cDNA,为进一步研究APEX1在动物体内的作用机制奠定了基础。
- 李治深杜丽刘涛申明霞王凤阳成鹰陈品林林杰材满初日嘎祁超
- 关键词：五指山小型猪CDNA文库克隆
- 海南坡鹿CDC42 cDNA的克隆、原核表达及纯化被引量：1
- 2011年
- 应用RT-PCR方法对海南坡鹿细胞分裂周期蛋白42(Cell division cycle 42,CDC42)编码区进行扩增,将扩增产物与PET-42a载体连接,重组质粒鉴定正确后,进行生物信息学分析;构建pET42a-hdCDC42表达载体,经IPTG诱导表达,将表达产物进行SDS-PAGE、可溶性分析、纯化及Western blot分析。结果表明,海南坡鹿CDC42含有1个576 bp的开放阅读框,编码191个氨基酸。经IPTG诱导表达后,得到一个带有His-tag和GST的约54 kD的融合蛋白,用抗His单克隆抗体进行Western blot,得到一条约54 kD的特异性抗体结合带,表明海南坡鹿CDC42原核表达载体成功构建并表达。
- 张巍陈品林雷明成鹰陈欢曹献英杜丽张冬琳刘涛许世英符运南祁超王凤阳
- 关键词：海南坡鹿CDC42克隆原核表达
- 水牛CD14 cDNA的克隆、表达及鉴定
- 2011年
- 目的:克隆水牛白细胞分化抗原14(buffalo cluster of differentiation antigen14,bCD14)基因,表达bCD14蛋白,并进行Western Blot鉴定。方法:采用RT-PCR方法从水牛外周血白细胞中扩增bCD14基因,构建重组质粒pET28a-bCD14,转化入Ecoli BL21,IPTG诱导表达,对表达蛋白进行可溶性分析及Western blot鉴定。结果:bCD14基因含有一个1 122bp的开放阅读框,编码373个氨基酸;与印度水牛、挪威大鼠和人CD14的cDNA序列同源性分别为97.95%、68.78%、78.60%,氨基酸同源性分别为96.78%、61.27%、72.34%;主要以包涵体形式表达,表达蛋白经Western Blot鉴定,得到了一条约46 kD的特异性条带。结论:该文成功克隆了bCD14基因,表达了bCD14蛋白,为进一步揭示水牛抵抗革兰氏阴性菌感染的免疫机制奠定了基础。
- 陈品林杜丽雷明成鹰陈兴生莫蘼刘涛张冬琳崔森王凤阳
- 关键词：水牛CD14克隆纯化
