陈松华
- 作品数:22 被引量:98H指数:6
- 供职机构:中国科学院更多>>
- 发文基金:美国国立卫生研究院基金上海市科学技术委员会资助项目上海市科委医学引导类科技项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 人外周血致敏型γδ^+T细胞在体外的扩增被引量:1
- 2000年
- 目的建立一种人外周血γδ+ T细胞体外选择性扩增的模式 :即在IL 2的作用下 ,不需要γδ +TCR特异性配体(或抗原)的刺激 ,可使一类个体体外培养的外周血单个核细胞(PBMC)中的γδ+ T细胞发生优先增殖 ,逐渐成为培养细胞的主要群体。方法将10个γδ+ TCR的个体的PBMC分别在含3×105U/LIL 2培养液中培养1~2wk后 ,其中的γδ+ T细胞的比率可达38 %~78 %。结果对3个这样的个体的扩增细胞做RT PCR分析表明 ,扩增出的γδ +T细胞表达TCRVδ2 基因片段。这种γδ +T细胞体外优先扩增的性质类似于记忆性αβT细胞的体外生长特征 ,可能反映了γδ +T细胞在体内的致敏状态。结论该现象将有利于进一步了解γδ+ T细胞在免疫系统中的地位和进化上的意义。
- 陈松华大野忠夫刘伟戴慧敏车裕芳王珏葛锡锐
- 关键词:体外扩增致敏状态T细胞
- 掌叶半夏提取物的有效部位对CaSki的促凋亡作用机制研究被引量:10
- 2010年
- 目的:前期的研究已证实中药掌叶半夏提取物的有效部位(pinellia extract fraction,PE)对体外培养的宫颈癌细胞株CaSki和HeLa有促凋亡作用,通过本次研究进一步明确PE对CaSki的促凋亡作用机制。方法:采用RT-PCR方法检测0.15g/L的PE作用24h后CaSki细胞Bcl-2和Bax mRNA表达的变化,采用Western Blot检测0.15g/LPE作用24h后CaSki细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的变化。结果:0.15g/L的PE作用24h后CaSki细胞Bcl-2 mRNA和蛋白的表达均明显下降,而Bax mRNA和蛋白的表达均明显上升。结论:PE对CaSki宫颈癌细胞株促凋亡作用之一是抑制Bcl-2基因的表达、促进Bax基因的表达。这为进一步研究PE的抗宫颈癌作用机制以及新药的研制开发奠定了一定的实验基础。
- 李桂玲归绥琪夏晴陈松华葛锡锐林理根叶阳
- 关键词:凋亡宫颈癌BCL-2BAX
- 两种IL-2依赖细胞的抗肿瘤活性研究
- 在癌症的过继免疫治疗中,有两项重要的工作:监测效应细胞的体内外活性;研制更有效的新型效应细胞.该研究首先对癌症患者的外周血淋巴细胞以及从中所诱导出的LAK细 胞的活性作了群体统计检测和分析,从而证明了该实验室的LAK培养...
- 陈松华
- 关键词:抗肿瘤活性LAK细胞
- 文献传递
- 单抗-天花粉结合物在体内外对靶细胞的作用
- 低渗透析小鼠腹水以沉淀其中的IgM,经 22.000 g高速离心,沉淀以PBS溶解,上 Sephadex G-200层析柱,纯化的LC-1抗体经免疫电泳测定,其纯度为一条沉淀带,ELISA
- 王升年陈松华徐惠钧车裕芳张鸿良张素胤王珏葛锡锐
- 文献传递
- β-谷甾醇对子宫颈癌细胞微管系统的影响被引量:22
- 2006年
- 目的探讨β-谷甾醇对子宫颈癌细胞 SiHa 的生长抑制作用及对细胞内微管系统的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定β-谷甾醇对 SiHa 细胞的增殖抑制作用,并用流式细胞技术分析β-谷甾醇作用前后细胞周期的变化,应用激光共聚焦显微技术观察β-谷甾醇处理的 SiHa细胞内微管和微管相关蛋白2的表达、分布,采用蛋白免疫印迹法检测微管蛋白、微管相关蛋白2的表达,及聚合和未聚合微管蛋白含量的变化。结果 20 μmol/L 的β-谷甾醇能明显抑制 SiHa 细胞的增殖,并显著促进 S 期细胞的集聚。激光共聚焦分析表明,β-谷甾醇作用5d 的 SiHa 细胞微管网络异常,微管相关蛋白2表达显著下调,蛋白免疫印迹结果进一步证实β-谷甾醇能抑制微管蛋白α和微管相关蛋白2的表达,同时β-谷甾醇能抑制 SiHa 细胞内微管蛋白的聚合,并随着作用时间的延长而逐渐增强。结论β-谷甾醇能降低 SiHa 细胞微管蛋白α和微管相关蛋白2的表达,并抑制 SiHa 细胞内微管的聚合,提示β-谷甾醇具有一定的抗微管作用,这一作用可能是造成 SiHa 细胞生长抑制的重要原因。
- 王莉杨永杰陈松华葛锡锐徐丛剑归绥琪
- 关键词:Β-谷甾醇子宫颈癌微管微管相关蛋白2微管聚合
- 人外周血γδT细胞选择性增殖及其体内抗肿瘤的特性研究被引量:4
- 1999年
- 观察人外周血γδT细胞在裸鼠体内的抗肿瘤效应。方法用MEP和IL┐2共刺激培养方法,扩增人外周血γδT细胞,与人肠癌细胞系(LoVo)细胞混合接种于裸鼠体皮下。结果经共刺激培养10天后,细胞总数可增加100~300倍,γδT细胞的比率上升到70%以上。给裸鼠接种1×106LoVo细胞1个月后,不接种γδT细胞的对照组裸鼠皮下瘤块重量为0.4g~0.9g,瘤块病理切片显示有明显肿瘤细胞堆积;而同时接种1×107γδT细胞的实验组裸鼠瘤块重量仅为0~0.005g,瘤块病理切片显示其中除肿瘤细胞外,还伴有增生性淋巴细胞。结论人外周血γδT细胞能有效地抑制人肠癌细胞LoVo在裸鼠体内的生长。
- 许凯黎陈松华葛锡锐葛锡锐周瑾
- 关键词:ΓΔT细胞抗肿瘤活性
- 掌叶半夏提取物的有效部位对体外培养宫颈癌细胞的促凋亡作用被引量:19
- 2008年
- 目的:观察中药掌叶半夏提取物的有效部位(pinellia extract fraction,PE)对体外培养的两种宫颈癌细胞株的作用,力求寻找一种能有效防治女性宫颈病变的纯中药制剂。方法:将4种不同浓度PE分别作用于Hela和Caski细胞1-5天,用倒置相差显微镜观察细胞生长及摄影,溴化噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:PE对两种宫颈癌细胞株的生长均表现出明显的抑制作用,流式细胞术检测结果显示PE作用后两种细胞株均呈现出凋亡,且随着作用时间延长,凋亡细胞的比例明显增加。结论:PE对两种宫颈癌细胞株有明显的抑制生长和促凋亡作用;为进一步研究PE的药物作用机制和新药的研制开发奠定了初步的基础。
- 李桂玲归绥琪陈松华葛锡锐林理根叶阳
- 关键词:掌叶半夏凋亡宫颈癌
- 抗人肺癌mAbLC-1的人-鼠嵌合Fab片段基因表达质粒的构建与表达被引量:4
- 2000年
- 目的表达抗人肺癌单克隆抗体(mAb)LC 1的人 鼠嵌合基因工程抗体。方法将mAbLC 1的VL 和VH 基因插入质粒 pWS1 中 ,构建成表达mAbLC 1人 鼠嵌合Fab片段基因的质粒pLC 1 ,转化大肠杆菌TG 1并在其中表达。结果酶切鉴定表明 ,mAbLC 1的VL 和VH 基因插入方向正确 ,该载体能在大肠杆菌TG1中表达预期相对分子质量的蛋白 ,表达产物对mAb具有较强的竞争结合抗原的活性。结论成功地表达了具有较高亲和活性的人 鼠嵌合抗人肺癌的基因工程抗体。
- 陈良谢荷煌王珏范赵娟林心楷陈松华刘伟葛锡锐
- 关键词:肺癌单克隆抗体质粒
- 掌叶半夏有效提取物单独或与顺铂联合对体外培养宫颈癌HeLa细胞的作用被引量:8
- 2007年
- 目的观察中药掌叶半夏有效提取物(PE)对体外培养宫颈癌HeLa细胞的作用,以及PE对HeLa细胞对顺铂(DDP)敏感性的影响,以期寻找药物治疗宫颈癌更完善的途径。方法体外培养宫颈癌HeLa细胞,分别用PE、DDP及DDP+PE处理细胞;用倒置相差显微镜观察细胞生长及摄影,MTT法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡。结果PE及DDP对宫颈癌HeLa细胞的生长均表现出明显的抑制作用,低剂量PE可加强DDP对HeLa细胞的抑制作用;流式细胞术检测结果显示PE作用后HeLa细胞呈现出凋亡,且随着作用时间的延长,凋亡细胞的比例明显增加。结论PE对宫颈癌HeLa细胞有明显的抑制生长和促凋亡作用,同时能提高HeLa细胞对顺铂的敏感性。
- 李桂玲归绥琪朱德厚陈松华叶阳
- 关键词:掌叶半夏宫颈癌HELA细胞株
- 免疫磁珠纯化γδT淋巴细胞的方法被引量:3
- 1999年
- γδT淋巴细胞在人外周血单个核细胞中的含量不超过10 % , 而研究γδT淋巴细胞的功能需要大量的γδT淋巴细胞。为此, 采用磁珠(magnetic microbeads)阳性选择(positiveselection) 法分离和纯化γδT淋巴细胞, 纯化可达99% 左右; 同时对富集的γδT淋巴细胞在体外的增殖和细胞毒效应进行观察, 此法快速、有效、纯度高, 对γδT淋巴细胞功能影响较小。为γδT淋巴细胞的研究和应用提供了便利。
- 王兆源陈松华刘伟葛锡锐
- 关键词:ΓΔT淋巴细胞磁珠细胞毒效应