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抗人肺癌mAbLC-1的人-鼠嵌合Fab片段基因表达质粒的构建与表达被引量：4: 2000年; 目的表达抗人肺癌单克隆抗体(mAb)LC 1的人鼠嵌合基因工程抗体。方法将mAbLC 1的VL 和VH 基因插入质粒 pWS1 中 ,构建成表达mAbLC 1人鼠嵌合Fab片段基因的质粒pLC 1 ,转化大肠杆菌TG 1并在其中表达。结果酶切鉴定表明 ,mAbLC 1的VL 和VH 基因插入方向正确 ,该载体能在大肠杆菌TG1中表达预期相对分子质量的蛋白 ,表达产物对mAb具有较强的竞争结合抗原的活性。结论成功地表达了具有较高亲和活性的人鼠嵌合抗人肺癌的基因工程抗体。; 陈良谢荷煌王珏范赵娟林心楷陈松华刘伟葛锡锐; 关键词：肺癌单克隆抗体质粒

免疫磁珠纯化γδT淋巴细胞的方法被引量：3: 1999年; γδＴ淋巴细胞在人外周血单个核细胞中的含量不超过１０％，而研究γδＴ淋巴细胞的功能需要大量的γδＴ淋巴细胞。为此，采用磁珠（ｍａｇｎｅｔｉｃｍｉｃｒｏｂｅａｄｓ）阳性选择（ｐｏｓｉｔｉｖｅｓｅｌｅｃｔｉｏｎ）法分离和纯化γδＴ淋巴细胞，纯化可达９９％左右；同时对富集的γδＴ淋巴细胞在体外的增殖和细胞毒效应进行观察，此法快速、有效、纯度高，对γδＴ淋巴细胞功能影响较小。为γδＴ淋巴细胞的研究和应用提供了便利。; 王兆源陈松华刘伟葛锡锐; 关键词：ΓΔT淋巴细胞磁珠细胞毒效应

人外周血致敏型γδ^+T细胞在体外的扩增被引量：1: 2000年; 目的建立一种人外周血γδ+ T细胞体外选择性扩增的模式 :即在IL 2的作用下 ,不需要γδ +TCR特异性配体(或抗原)的刺激 ,可使一类个体体外培养的外周血单个核细胞(PBMC)中的γδ+ T细胞发生优先增殖 ,逐渐成为培养细胞的主要群体。方法将10个γδ+ TCR的个体的PBMC分别在含3×105U/LIL 2培养液中培养1～2wk后 ,其中的γδ+ T细胞的比率可达38 %～78 %。结果对3个这样的个体的扩增细胞做RT PCR分析表明 ,扩增出的γδ +T细胞表达TCRVδ2 基因片段。这种γδ +T细胞体外优先扩增的性质类似于记忆性αβT细胞的体外生长特征 ,可能反映了γδ +T细胞在体内的致敏状态。结论该现象将有利于进一步了解γδ+ T细胞在免疫系统中的地位和进化上的意义。; 陈松华大野忠夫刘伟戴慧敏车裕芳王珏葛锡锐; 关键词：体外扩增致敏状态 T细胞

癌症患者群体LAK细胞的体外抗肿瘤的细胞毒活性: 1997年; 本研究应用^(125)I-UdR释放实验,测定了大量随机取样于111位癌症患者的外周血淋巴细胞以及从它们中诱导出的处于不同培养期的淋巴因子激活的杀伤细胞对K562和Raji肿瘤细胞的体外细胞毒活性.对560个有效数据的统计分析,获得以下结果:1.经过培养系统的作用,对K562细胞的细胞毒活性,从培养前的34.78±25%上升到8～13天培养期的68.04±17.3%之后基本稳定于近70%的水平,直至23～27天的培养期.此细胞毒活性的构成比模式表明,在培养之前,样品分布于很广的活性区域(10～90%);培养 8～13天和以后的培养期,约85%的样品集中到高活性区域(50～95%).2.对 Raji细胞的细胞毒活性,从培养前的8.9±8%上升到8～13天培养期的42.1±22%之后,在随后的培养期中,维持于约35%的水平.对Raji的细胞毒活性的构成比显示,在培养前,全部样品处于低活性区域(<25%);在培养过程中,部分样品(约30%)向高活性区域发生明显的扩展(50～90%),但另一部份样品(约40%)一直位于低活性区域(<35%).这样形成高低两个分布区域.这种现象的机理值得进一步探讨.; 陈松华刘伟车裕芳戴慧敏王球达王珏葛锡锐; 关键词：LAK细胞细胞毒活性肿瘤

IL-2R反义S-ODNs抑制人淋巴细胞增殖及IL-2R表达: 1999年; ＩＬ２Ｒα、β、γｍＲＮＡ上起始密码子ＡＵＧ的下游序列，合成与之互补的硫代反义寡聚脱氧核糖核酸（ＩＬ２Ｒα、β、γＳＯＤＮｓ），长度为２０ｎｔ。实验结果表明，ＩＬ２ＲαＳＯＤＮｓ对外周血淋巴细胞生长最高抑制率可达到８１－９２％；而ＩＬ２ＲβＳＯＤＮｓ和ＩＬ２ＲγＳＯＤＮｓ的抑制作用较低，其最高抑制率均为５９－１％。在１０μｍｏｌ／ＬＩＬ２ＲαＳＯＤＮｓ作用后的第４８小时，ｓＩＬ２Ｒ的表达下降８０％；ｍＩＬ２Ｒα的表达下降５１－５％。; 师双平陈松华刘伟戴慧敏王珏葛锡锐; 关键词：IL-2R 外周血淋巴细胞

磷酸脂配体体外激活人外周血γδT细胞的研究被引量：3: 2000年; 人γδT细胞可识别非肽类的磷酸脂分子。本研究用非肽类磷酸脂配体MEP在体外选择性扩增人外周血γδT细胞。MEP激活的PBMC中主要为CD3+ CD45RO+ γδTCR+ 细胞群。激活的γδT细胞可分泌IFN γ ,但不分泌IL 4,因此激活的γδT细胞可能分泌Thl型细胞因子。MEP激活γδT细胞需要有辅佐细胞的存在 ,但不需要抗原的处理和递呈 ,并且激活的γδT细胞对多种肿瘤细胞具有非MHC限制性的细胞毒作用。以上结果提示MEP可有效激活γδT细胞 ,使其表现出独特的免疫学特征和生物学功能。; 黄岚陈松华戴慧敏刘伟葛锡锐; 关键词：ΓΔT细胞细胞毒性

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刘伟