魏海燕
- 作品数：7 被引量：41H指数：5
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 短发夹状RNA抑制SMYD3基因在HepG2细胞中的表达被引量：5
- 2006年
- 目的构建针对人SET-和MYND-结构域含有蛋白3(SMYD3)基因的短发夹状RNA (shRNA)表达载体pGenesil-1-s,观察其对人肝癌细胞株HepG2细胞SMYD3基因表达的特异性抑制效应。方法设计合成针对SMYD3 mRNA编码序列267～288、302～323靶位点之间的核苷酸片断,并定向克隆到仅表达EGFP的空载体pGenesil-1的U6启动子下,构建重组质粒pGenesil-1-s1、pGenesil-1-s2；不针对任何序列的重组质粒pGenesil-1-hk作为对照。通过脂质体介导转染人肝癌细胞株HepG2,应用逆转录聚合酶链反应,western blot蛋白免疫印迹法分别从mRNA、蛋白水平检测阻抑效应。结果酶切鉴定和测序结果证实了pGenesil-1-s1、pGenesil-1-s2、pGenesil-1-hk的成功构建,转染HepG2细胞后,pGenesil-1- s1、pGenesil-1-s2组SMYD3 mRNA和蛋白表达均明显下调,与pGenesil-1-hk组及pGenesil-1对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01)。结论构建的重组质粒pGenesil-1-s1、pGenesil-1-s2能特异性抑制SMYD3 在HepG2细胞中的表达。
- 徐鋆耀陈立波徐鋆阳杨镇魏海燕许荣华
- 关键词：RNA肝细胞
- Gal-3与Bcl-2、层粘连蛋白受体在胰腺癌中表达的关系及意义被引量：6
- 2003年
- 目的:研究Gal-3与Bcl-2、层粘连蛋白受体(LR)在胰腺癌中的表达,并探讨它们与胰腺癌的发生、发展与转移的关系以及Gal-3与Bcl-2、LR在胰腺癌中的表达之间的关系及意义。方法:应用免疫组织化学技术S-P法检测胰腺癌组织中Gal-3、Bcl-2、LR等3种蛋白质的表达,并与3者在良性胰腺组织中的表达进行对照,采用四格表x^2检验对结果进行统计学分析。结果:(1)在68例胰腺癌组织标本中,Gal-3、Bcl-2、LR表达的阳性率分别为81％(55/68)、48.5％(33/68)、55.4％(37/68)。30例良性病变胰腺组织中,Gal-3呈无或弱表达,而LR和Bcl-2呈阳性或强阳性表达,表达率各为40％(12/30)、76.7％(23/30)、83.3％(25/30),与在胰腺癌中的表达相比,Gal-3的表达水平明显下降(P<0.01),Bcl-2与LR的表达显著升高(P<0.01、P<0.05)。(2)3者的阳性表达都与癌组织的分化程度无关。Gal-3在转移灶中的表达水平显著升高(P<0.05)。Gal-3的表达随着肿瘤的进展而增强,Bcl-2、LR的表达则减弱。结论:Gal-3可能与胰腺癌的发生发展及转移有关,而Bcl-2、LR可能是维持细胞正常活动的重要因子。
- 魏海燕王春友
- 关键词：GAL-3胰腺癌半乳糖凝集素BCL-2层粘连蛋白受体免疫组织化学技术
- 术中腹腔神经丛阻滞术对不能切除的胰腺癌疼痛减轻及生活质量的影响被引量：11
- 2006年
- 目的对不能切除的胰腺癌行姑息手术的同时行无水酒精腹腔神经丛阻滞术,观察其镇痛效果、并发症及对生活质量的影响。方法选取122例肿块不能切除、伴消化道梗阻、腹部和/或腰背部癌性疼痛的胰腺癌患者,其中姑息手术加腹腔神经丛阻滞术80例患者归为A组,仅行姑息手术42例患者归为B组,比较两组术后疼痛缓解情况、临床受益反应及术后不良反应。结果A与B组术后2周疼痛完全缓解率分别为52.5%和11.9%,总有效率分别为96%和47.6%;半年疼痛完全缓解率分别为20.7%和0%,总有效率分别为68.9%和11.1%;两者在术后各时间点(2周、1个月、3个月、6个月)之间差异有统计学意义(P<0.05)。A组治疗前后KPS评分比较差异有统计学意义(t=6.864,P<0.05),两组治疗前后KPS评分差值比较亦有统计学意义(t=5.326,P<0.05)。术后两组无严重并发症和手术死亡。结论经腹行腹腔神经丛阻滞术具有直视下定位准确、疼痛缓解满意、安全程度高等优点,能有效改善患者的生活质量。
- 杨俊陶京王春友熊炯忻魏海燕
- 关键词：腹腔神经丛阻滞术胰腺癌
- RNA干扰SMYD3基因表达对诱导肝癌细胞凋亡的影响被引量：9
- 2006年
- 背景与目的:SMYD3(SETandMYNDdomain-containingprotein3)基因的表达蛋白是一种组蛋白甲基转移酶,参与肿瘤细胞增殖与凋亡的调控。本研究旨在探讨利用RNA干扰(RNAinterference,RNAi)抑制SMYD3基因表达对肝癌细胞增殖与凋亡的影响。方法:RT-PCR、免疫组织化学法分别检测SMYD3在肝癌细胞和肝癌组织中的表达。构建小发夹状RNA(smallhairpinRNA,shRNA)干扰质粒Pgenesil-1-s1、Pgenesil-1-s2及无干扰效应质粒Pgenesil-1-hk并转染入肝癌细胞HepG2,阻抑其表达SMYD3,以空质粒Pgenesil-1转染组为对照。Westernblot检测阻抑效应;MTT检测细胞增殖抑制率,流式细胞术及TUNEL检测细胞凋亡。结果:SMYD3在肝癌组织和多种肝癌细胞中表达明显增强。shRNA转染HepG2细胞后:SMYD3蛋白表达下调75%～85%;细胞增殖明显受抑制,抑制率高达60.95%～72.14%;流式细胞术结果显示Pgenesil-1-s1组HepG2细胞凋亡率(17.68±2.36)%、Pgenesil-1-s2组(19.07±1.78)%,均显著高于Pgenesil-1-hk组[(1.44±0.28)%]及Pgenesil-1组[(0.47±0.12)%](P<0.01);TUNEL检测的凋亡指数结果与流式细胞术检测结果类似。结论:SMYD3高表达于多种肝癌细胞及肝癌组织;RNAi能特异性下调SMYD3的表达,抑制肝癌细胞增殖并促进细胞凋亡,提示其可能为治疗肝癌提供新的途径。
- 徐鋆耀陈立波徐鋆阳杨镇魏海燕许荣华
- 关键词：肝肿瘤肝癌细胞系RNA干扰凋亡
- AKT2短发夹状RNA抑制胰腺癌细胞生长的研究被引量：2
- 2006年
- 蛋白激酶B（PKB／AKT）是一种重要的信号蛋白分子，AKT蛋白与细胞生长代谢密切相关。AKT2是AKT蛋白3种主要亚型之一，有研究证实AKT2在胰腺癌中表达增高，且AKT2对胰腺肿瘤的发生发展有重要促进作用，本实验旨在研究AKT2短发夹状RNA表达载体对胰腺癌细胞生长的影响。
- 杨鹏王春友黄文广刘胜洪魏海燕徐建波杨明
- 关键词：胰腺癌细胞生长短发夹状RNAAKT2AKT蛋白蛋白激酶生长代谢
- AKT2、HIF-1α在胰腺癌中的表达及其临床意义被引量：7
- 2006年
- 目的探讨胰腺癌组织中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶2(AKT2)、HIF-1α蛋白的表达及其临床意义。方法应用免疫组化SABC法检测63例胰腺癌组织和23例胰腺良性病变组织中AKT2、HIF-1α蛋白的表达,分析其与胰腺癌临床病理因素的关系。结果AKT2、HIF-1α蛋白在胰腺癌组织中的阳性表达率分别为39.7%(25/63)、63.5%(40/63),明显高于胰腺良性病变组的13%(3/23)、17.4%(4/23)(P<0.05)。AKT2表达与HIF-1α表达呈正相关(P<0.05)。AKT2表达与组织学分级、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05),而与患者的性别、年龄、胰腺癌大小无关(P>0.05)。结论AKT2和HIF-1α在胰腺癌组织中表达增高,AKT2可能通过调节HIF-1α表达来影响胰腺癌的发生、发展、转移。
- 杨鹏王春友牛彦锋万赤丹魏海燕徐建波罗威杨明
- 关键词：胰腺癌缺氧诱导因子1Α免疫组织化学
- RNA干扰技术靶向SMYD3基因治疗肝癌的实验研究被引量：8
- 2006年
- 目的构建针对人SET-和MYND-结构域含有蛋白3(SMYD3)编码基因的短发夹状RNA(shRNA)干扰质粒,并研究其对肝癌细胞的作用。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测SMYD3 mRNA在肝癌细胞系HepG2、Hep3B、SMMC7721的表达。构建重组SMYD3 shRNA表达质粒Pgenesil-1-s,并采用介导转染法导入HepG2细胞,蛋白免疫印迹法(W estern b lot)检测阻抑效应,噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞生长增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率。建立人肝癌细胞HepG2皮下移植瘤裸鼠模型,注射Pgenesil-1-s,动态观察肿瘤体积并于2周后处死裸鼠称取瘤重。结果肝癌细胞株HepG2、Hep3B、SMMC7721的SMYD3 mRNA表达水平显著高于正常肝细胞株L-02;Pgenesil-1-s转染HepG2细胞后,SMYD3蛋白表达明显下调,而且细胞凋亡率显著增加,细胞生长明显受抑;经重组质粒治疗14 d后,裸鼠皮下移植瘤生长缓慢,相较于对照组瘤体明显缩小、瘤重明显减轻(P<0.01)。结论肝癌细胞高表达SMYD3,shRNA干扰特异性抑制SMYD3表达,可以促进肝癌细胞凋亡并抑制裸鼠移植瘤的生长。
- 徐鋆耀陈立波徐鋆阳杨镇许荣华魏海燕
- 关键词：基因RNA肝肿瘤
