刘玲侠
- 作品数：15 被引量：99H指数：5
- 供职机构：第四军医大学口腔医学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 牙周组织工程中人转化生长因子基因转染人牙龈成纤维细胞的生物学特性被引量：5
- 2005年
- 目的:为早日实现利用人转化生长因子(humantransforminggrowthfac-tor-β,hTGF-β1)的基因治疗,研究hTGF-β1基因转染的人牙龈成纤维细胞(gingivalfibroblast,GF)及其培养上清的生物学特性,为牙龈成纤维细胞能否成为牙周组织工程中的种子细胞提供理论依据。方法:实验于2004-04/10在第四军医大学口腔颌面外科实验室完成。用脂质体转染法、细胞计数法、MTT比色法研究hTGF-β1基因转染人GF的增殖与分化及其培养上清对人牙周膜细胞(periodontalligamentcells,PDLCs)及GF增殖与分化的影响。结果:与未转染组相比,hTGF-β1基因转染可显著的促进细胞增殖,并且随时间进行差异增大。转染后的GF碱性磷酸酶(ALP)活性也较对照组有显著提高(t=7.952,P<0.01),并且与PDLCs的ALP活性接近(t=0.621,P>0.05)。转染人GF的上清与未转染人GF上清相比,可显著促进人PDLCs及GF的增殖(tPDLCs=5.745,tGF=4.621,P<0.01),这种促增殖作用呈时间依赖性;同时使人PDLCs及GF的ALP活性显著提高(tPDLCs=6.126,tGF=5.972,P<0.01)。结论:转染人GF不仅可以诱导自身向成骨样细胞分化,而且通过旁分泌途径诱导牙龈、牙周膜细胞增殖与分化,促进牙周组织再生,为人GF成为牙周组织工程中的种子细胞提供理论依据。
- 许杰吴织芬储庆董广英魏红宇刘玲侠
- 关键词：生物医学工程转化生长因子Β转染
- SDF-1α/CXCR4轴影响牙周膜干细胞血管内皮向分化的初步研究被引量：5
- 2013年
- 目的:探讨牙周炎时SDF-1α/CXCR4轴对PDLSCs血管内皮向分化的影响。方法:分别从正常和炎症牙周组织分离培养鉴定牙周膜干细胞(H-PDLSCs、P-PDLSCs);Real time PCR检测两种干细胞中基质细胞衍生因子-1α(stromal cell-derived factor-1α,SDF-1α)及趋化因子受体4[chemokine(c-x-c motif)receptor4,CXCR4]的表达;然后用SDF-1α分别对两种干细胞进行诱导(14 d),Real time PCR检测H-PDLSCs和P-PDLSCs中成血管相关基因CD31、VWF mRNA的表达;Matrigel基质胶管腔形成实验观察、比较H-PDLSCs和P-PDLSCs的管腔形成情况及差异。结果:P-PDLSCs较H-PDLSCs高表达CXCR4 mRNA(P<0.05),低表达SDF-1αmRNA(P<0.05);经SDF-1α诱导后,P-PDLSCs中成血管相关基因CD31、VWF mRNA的表达水平均明显高于H-PDLSCs(P<0.05);其管腔形成数量也明显高于H-PDLSCs(P<0.05)。结论:P-PDLSCs中CXCR4 mRNA高表达,对牙周炎症组织环境中的SDF-1α更加敏感,其血管内皮向分化的趋势和能力均增强。
- 褚云娟叶菁李晶王萌王新文陈芳王欣刘玲侠王勤涛
- 关键词：牙周膜干细胞基质细胞衍生因子-1Α趋化因子受体4
- 人转化生长因子β1基因转染牙龈成纤维细胞促进牙周组织再生的动物实验被引量：3
- 2009年
- 目的 评价人转化生长因子β1（human transform growth factor-β1，hTGF-β1）基因转染犬自体牙龈成纤维细胞（gingival fibroblast，GF）在治疗人工Ⅱ度根分叉骨缺损中作为组织工程种子细胞所发挥的作用。方法将hTGF．B1基因转染后的犬自体GF作为组织工程种子细胞，与海螵蛸骨天然纳米羟基磷灰石（cuttlebone—transformed nanometer hydroxyapatite，CBHA）体外复合，制备犬下颌前磨牙区的Ⅱ度根分叉人工骨缺损模型，应用随机化完全区组设计方法将36颗犬前磨牙分为以下4组：①阴性对照组：不作任何处理直接缝合；②阳性对照组：置入牙周韧带细胞（periodontal ligament cell，PDLC）．CBHA复合物；③转染GF组：置入hTGF—β1基因转染犬GF—CBHA复合物；④未转染GF组：置入犬GF—CBHA复合物。每组9颗牙。对各组进行组织学观察和测量，并作示踪实验。结果与阴性对照组比较，转染GF组、阳性对照组均可显著促进根分叉区牙周组织的再生（P〈0．01），丽组的新生牙骨质高度（NC）、新生牙槽骨高度（NB）及新生结缔组织高度（NCT）分别为：（2．97±0．50）、（4．29±0．26）及（4．73±0．06）mm；（3．09±0．26）、（4．46±0．25）及（4．69±0．10）mm，且两组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。未转染GF组虽可促进牙槽骨再生[NB=（3．46±0．32）mm]，但牙根有一定程度的吸收；示踪实验显示：转染后的GF在新生牙槽骨及牙周膜组织中均可发现。结论hTGF—β1基因转染后的犬自体GF作为组织工程种子细胞，与CBHA体外复合后在人工Ⅱ度根分叉骨缺损的治疗中有显著的促牙周组织再生的作用，参与了新生牙槽骨及牙周膜的形成。
- 储庆吴织芬谢光远万玲何海丽刘玲侠
- 关键词：转化生长因子Β1转染牙龈成纤维细胞
- 牙周基础治疗对慢性牙周炎伴继发性咬合创伤患牙临床及咬合影响的随机对照研究被引量：31
- 2013年
- 目的 评价龈下刮治、根面平整与调（牙合）对合并继发性咬合创伤的牙周炎患牙力学状况及牙周临床指标改善的影响，以期为临床提供参考。方法将18例慢性牙周炎合并咬合创伤患者按咬合时间测定值大小分层区组随机分为A、B两组，每组9例；0d时（基线），A组先实施全口龈下刮治＋根面平整治疗，B组实施咬合创伤牙位调（牙合）治疗；第28天，A组接受咬合创伤牙位调（牙合）治疗，B组接受全口龈下刮治＋根面平整治疗。调（牙合）在T—ScanIII型咬合分析系统指导下完成。在0、28、56d检查A、B两组全口牙周探诊深度、附着丧失、出血指数、咬合创伤牙位咬合时间及咬合受力百分比。采用SPSS18．0统计软件对基线时A、B两组间牙周临床指标及咬合指标差异、各组内治疗前后牙周临床指标与咬合指标变化、两组在28、56d牙周临床指标与咬合指标变化值的差异进行配对t检验，检验水准为双侧α=0．05。结果基线时A组与B组全口平均探诊深度、附着丧失、出血指数差异均无统计学意义（P〉0．05）；A组与B组咬合创伤牙位平均探诊深度、附着丧失、出血指数差异均无统计学意义（P〉0．05）；同时，A、B组间咬合创伤牙位咬合时间[分别为（1．29±0．39）、（1．34±0．35）S1、咬合受力百分比[分别为（6．8±2．1）％及（7．4±1．7）％]差异均无统计学意义（P〉0．05）。龈下刮治＋根面平整前后咬合创伤牙位牙周临床指标及咬合时间均显著降低（P〈0．05）；A、B两组单纯调哈前后纳入牙位牙周临床指标差异均无统计学意义（P〉0．05）。终点时，A、B两组牙周临床指标较基线的改变值差异均无统计学意义（P〉0．05）；咬合时间、咬合受力百分比相比基线的改变值A组[分别为（0．85±0．41）s、（2．2±2．2）％]均显著大于B组[（0．70±0．38）s、（1．5±1．
- 王鹏程唐杭瑞许杰张戎刘玲侠王勤涛
- 关键词：牙周炎咬合创伤调[牙合]
- 人转化生长因子β1质粒真核表达载体的构建与鉴定
- 2003年
- 目的构建并鉴定人转化生长因子β1(TGF-β1)基因真核表达栽体。方法设计含XbaI和XhoI酶切住点的TGF-β1cDNA引物，采用RT-PCR法，扩增TGF-β1cDNA片段，纯化PCR产物，XbaI和XhoI双酶切并连接至pcDNA3。转化感受态大肠杆菌DH5α。酶切鉴定阳性重组子，并进行序列测定。结果琼脂糖凝胶电泳显示，用XbaI和XhoI双酶切后可形成两条带，分子量分别为1．2kb和5．38kb。符合物理图谱，表明栽体成功构建，并且测序结果与预期结果完全一致。结论成功构建了人TGF-β1基因真核表达栽体。
- 储庆吴织芬孙强何海丽刘玲侠
- 关键词：TGF-Β1基因真核表达载体质粒DH5ΑDNA引物重组子
- 牙冠延长术的术前宣教、手术配合及术后护理被引量：4
- 2006年
- 刘玲侠闫伟艺石晓婷关利娜
- 关键词：牙冠延长术宣教手术配合
- 颌骨骨髓基质细胞与牙周膜细胞的生物学特性比较被引量：1
- 2012年
- 目的:比较颌骨骨髓基质细胞与牙周膜细胞的基本生物学特性。方法:分离颌骨来源骨髓基质细胞和牙周膜细胞,进行改良体外原代培养。倒置显微镜观察细胞生长及克隆形成情况;CCK-8检测细胞生长曲线;免疫荧光染色检测STR0-1表达;成脂诱导后检测脂滴形成,矿化诱导后检测碱性磷酸酶的变化并用RT-PCR检测7、14 d成骨相关基因OCN的表达水平。结果:两种细胞体外培养均呈成纤维样细胞外形,能克隆生长,均具有活跃的增殖能力;两种细胞STR0-1表达阳性;成脂诱导后可见脂滴形成;矿化诱导后骨髓基质细胞的碱性磷酸酶活性较强,而且OCN基因表达较早且较强。结论:颌骨来源骨髓基质细胞具有较强的增殖及成骨分化能力,具有干细胞特性,可能是有较大临床应用潜力的组织工程种子细胞。
- 王欣房明刘敏杰董广英王新文刘玲侠王勤涛
- 关键词：颌骨人骨髓基质细胞人牙周膜细胞
- 人转化生长因子β1基因转染人牙龈成纤维细胞及其稳定表达被引量：7
- 2004年
- 目的 :探讨人转化生长因子 - β1(hTGF - β1)基因转染人牙龈成纤维细胞 (GF)的表达能力。 方法 :体外培养人GF ,传代培养后以阳离子脂质体 (Lipofectamine) :pcDNA3-hTGF - β1为 3μL∶1μg的比例转染。通过免疫组织化学染色的方法及图像分析检测hTGF - β1表达水平 ;利用水貂肺上皮细胞生长抑制法检测TGF - β1的生物学活性。结果 :转染后的GF呈强阳性表达 ,并持续 4周以上。图像分析显示转染细胞hTGF - β1表达显著增强 ,与对照组比较差异显著 (P <0 .0 1)。转染后细胞上清可有效的抑制水貂肺上皮细胞的生长。结论 :hTGF - β1基因转染可使牙龈成纤维细胞有效而稳定的表达活性hTGF -
- 储庆吴织芬何海丽谢光远王鑫刘玲侠
- 关键词：转化生长因子Β1基因转染牙龈成纤维细胞生物学活性真核表达载体
- 骨髓基质细胞-乌贼骨转化羟基磷灰石复合物促进牙周组织再生的研究被引量：7
- 2004年
- 目的 :评价乌贼骨转化羟基磷灰石材料 (CBHA)复合骨髓基质细胞 (BMSC)修复牙周缺损、促进牙周再生治疗的可行性。方法 :体外培养犬BMSC ,复合CBHA后移植到犬下颌后牙的根分叉骨缺损中 ,8周后进行组织学观察。结果 :BMSC -CBHA组新生牙周组织量明显高于CBHA组、对照组。结论 :BMSC -CBHA复合物可加快牙周组织的再生 。
- 谢光远吴织芬王勤涛储庆王鑫朱国强刘玲侠
- 关键词：牙周组织再生骨髓基质细胞
- 正常和炎症来源的人牙周膜干细胞内皮向分化能力的比较被引量：5
- 2014年
- 目的:比较炎症和正常牙周膜组来源的牙周膜干细胞(iPDLSCs和PDLSCs)体外成血管的能力。方法:组织块酶消化法培养iPDLSCs和PDLSCs,并经有限稀释法纯化和干细胞表面标记物检测鉴定后,对其进行成血管诱导,并通过免疫荧光染色、实时定量PCR、Matrigel assay检测其内皮细胞相关标记物的表达水平及毛细血管网形成状况。结果:两种细胞经纯化后均阳性表达干细胞标记物CD90、CD29、CD105、CD146;iPDLSCs比PDLCSs具有更高的克隆形成能力;两种细胞经内皮向诱导培养后其内皮细胞标记物VEGF、vWF、CD31、VE-cadherin mRNA的表达水平均较诱导前明显上调(P<0.05),并且均能在体外形成管腔样结构;iPDLSCs中CD31、VE-cadherin mRNA的表达水平和管腔长度、分支节点数等均明显高于PDLSCs(P<0.05)。结论:正常和炎症来源的人牙周膜干细胞均具有成血管能力,并且炎症来源的成血管能力更高。
- 叶菁张戎褚云娟李晶王萌陈芳王欣刘玲侠王勤涛
- 关键词：牙周膜干细胞分化血管化
