刘艳玲
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：莱芜职业技术学院信息工程系更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金山东省自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 麻花艽β-amyrin合成酶基因GsAS2的载体构建及遗传转化
- 2017年
- 【目的】本文拟进行麻花艽β-amyrin合成酶基因GsAS2的载体构建及遗传转化。【方法】首先利用gateway方法进行GsAS2的RNAi载体(pK7GWIWG-GsAS2)和过表达载体(pK7WG2D-GsAS2)的构建,并利用基因枪转化麻花艽胚性愈伤组织,经卡那霉素(Kan)筛选后,进一步用35S启动子引物进行抗性植株总DNA的PCR检测。【结果】获得GsAS2的RNAi阳性植株5株,过表达植株8株,转化频率分别为2.94%和4.00%。对转基因植株进行GsAS2的半定量RT-PCR分析和齐墩果酸的HPLC测定表明:GsAS2的表达在RNAi系中受到较大抑制,其齐墩果酸含量均低于对照(为对照的48.5%~80.7%),而在过表达系中GsAS2则超量表达,且齐墩果酸含量均高于对照(为对照的1.67~2.46倍)。【结论】说明GsAS2的表达与下游产物齐墩果酸的含量关系密切。
- 刘艳玲向凤宁
- 关键词：麻花艽
- 麻花艽×狭叶柴胡F_1代β-amyrin合成酶基因表达及齐墩果酸含量分析
- 2018年
- 【目的】本文旨在分析麻花艽×狭叶柴胡F_1代β-amyrin合成酶基因的表达及下游产物齐墩果酸的含量。【方法】首先根据进化树分析亲本及体细胞杂种中β-amyrin合成酶基因与其它物种中同族基因的亲缘关系,然后通过序列分析进行了该基因在杂种中的等位变异研究,最后利用半定量RT-PCR和HPLC方法分析了亲本及杂种中β-amyrin合成酶的基因表达情况及其下游产物齐墩果酸的含量变化。【结果】β-amyrin合成酶基因在杂种ZA中发生了1个碱基突变,在ZB中未发生突变,在ZC中发生了2个碱基突变。虽然本实验证明β-amyrin合成酶基因的表达与齐墩果酸含量呈正相关,但杂种中这些基因的变异与齐墩果酸含量没有对应关系。【结论】本实验表明,β-amyrin合成酶中个别基因的突变对其功能未造成影响。
- 刘艳玲向凤宁
- 关键词：麻花艽狭叶柴胡齐墩果酸
- 苯基三甲基溴化胺对小麦幼苗生长和抗氧化能力的影响被引量：2
- 2012年
- 采用不同浓度的苯基三甲基溴化胺(PTMAC)对济麦22进行种子处理和叶面喷施处理。结果表明:与对照相比,不同浓度PTMAC对幼苗鲜重、干重、叶绿素含量、光合速率、SOD活性和CAT活性都有影响,其中最适宜的PTMAC浓度为20 mg/L,且在适宜浓度的PTMAC作用下,能大大地提高非胁迫条件下小麦的抗氧化能力,促进其生长。
- 刘艳玲金桂芳
- 关键词：小麦幼苗生长
- O-GlcNAcase抗原片段的选择、优化表达和多克隆抗体的制备被引量：1
- 2011年
- 为了探讨O-GlcNAc修饰的生物学作用和相关疾病的发病机理,需制备高效、专一的O-GlcNAcase（OGA）抗体。通过对人源OGA蛋白进行序列分析发现,氨基端1~350 aa片段（sOGA）抗原性和亲水性较强,将该片段构建至原核表达载体pET-28a,并在大肠杆菌Escherichia coli BL21（DE3）中进行诱导表达,通过优化IPTG浓度（0.05 mmol/L）和诱导时间（10 h）获得了高可溶性表达的重组蛋白酶。采用Ni-NTA亲和层析和分子筛层析对重组蛋白进行了纯化,SDS-PAGE检测分子量的大小（45 kDa）和纯度（95%以上）。以4-MU-O-GlcNAc为荧光底物,检测到sOGA的糖苷酶活性为106 nmol/（min.mg）,表明该片段是OGA糖苷酶的活性区域。以此片段作为抗原免疫新西兰大白兔,以CNBr活化Sepharose 4B微珠纯化抗血清制备OGA特异性多克隆抗体。Western blotting和ELISA检测表明,该抗体可以特异识别含有OGA糖苷酶活性区域的多种变体,检测灵敏度为0.11 ng/mL（效价为1∶80 000）,可应用于O-GlcNAcase生物功能研究。
- 林霖李国超李中华徐田高飞李静刘艳玲
- 关键词：O-GLCNACASE生物活性多克隆抗体
