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吴昆昱: 作品数：10 被引量：184H指数：5; 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划科研院所技术开发研究专项资金国家科技部科研院所技术开发研究专项更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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从我国人群中再次分离到H9N2亚型流感病毒被引量：59: 2000年; 目的　了解分离流感病毒毒株表面抗原亚型和特性及其来源。方法　病毒通过MDCK细胞分离 ,用红细胞凝集抑制 (HI)和神经氨酸酶抑制 (NI)测定对病毒株表面抗原进行鉴定和特性分析 ,人血清中抗体测定采用HI和中和实验。对患者进行个案调查。结果　分离物为甲型流感病毒H9N2亚型 ,属G9类似毒株 ,它的HA抗原特性与已经从人、鸡和鸽分离到的H9N2亚型毒株均有差异。患者恢复期血清对分离物的HI抗体滴度为 40 0 ,中和效价为≥ 6 40。其母血清的HI滴度为 1:2 5。结论　从患者所分离出的病毒为H9N2亚型流感病毒 ,属G9类毒株。它的HA抗原性与测定的H9N2毒株均存在差异。; 郭元吉谢健屏王敏董婕郭俊峰张烨吴昆昱; 关键词：人流感

流感病毒A/广州/333/99(H9N2)毒株基因组特性的研究被引量：44: 2002年; 目的　了解一株再次从流感患儿中分离出禽H9N2流感毒株的基因组特性 ,并弄清它的来源。方法　病毒在鸡胚中传代 ,从收获的尿囊液中提取RNA ,通过逆转录合成cDNA ,cDNA用PCR扩增。PCR产物用纯化试剂盒纯化 ,接着做核苷酸序列测定 ,然后用MegAlign(Version 1 0 3)和Editseg(Version 3 69)软件进行基因进化树分析。结果　A 广州 333 99(H9N2 )毒株的基因组属于禽流感病毒 ,但它明显不同于A Duck HongKong Y439 97毒株。同时不含有任何人流感病毒基因节段 ,其基因组中有 4个基因节段 (分别编码HA、NA、NP和NS蛋白 )来自G9毒株基因系 ,而其余 4个基因节段 (分别编码PB2、PB1、PA和M蛋白 )来自G1毒株基因系。结论　A 广州 333 99(H9N2 )病毒是G9和G1毒株通过基因重配而来的重配株 ,它最大可能性直接来自禽。进一步证实了禽H9N2毒株能感染人 ,同时首次证实了H9N2不同基因系毒株间。; 郭元吉吴昆昱董婕王敏张烨郭俊峰陈继明陈稚峰李梓谢健屏; 关键词：基因组流感病毒

流感病毒哺乳动物细胞高产毒株、其重组毒株及其制备方法和应用: 本发明公开了一种流感病毒哺乳动物细胞高产毒株、其基因重组毒株及其制备和应用，所述毒株包括SEQ.NO.1、SEQ.NO.2、SEQ.NO.3、SEQ.NO.4、SEQ.NO.5、SEQ.NO.6、SEQ.NO.7、SEQ...; 张智清董婕孙梅生徐红张立国吴昆昱齐立; 文献传递

流感病毒哺乳动物细胞高产毒株、其重组毒株及其制备方法和应用: 本发明公开了一种流感病毒哺乳动物细胞高产毒株、其基因重组毒株及其制备和应用，所述毒株包括SEQ.NO.1、SEQ.NO.2、SEQ.NO.3、SEQ.NO.4、SEQ.NO.5、SEQ.NO.6、SEQ.NO.7、SEQ...; 张智清董婕孙梅生徐红张立国吴昆昱齐立; 文献传递

甲型流感病毒H9N2亚型毒株血凝素基因特性的研究被引量：2: 2001年; 目的　了解人甲型流感病毒H9N2亚型毒株的来源及从分子生物学角度来弄清不同宿主来源的H9N2亚型毒株间相互关系。方法　病毒在鸡胚中传代 ,从收获的尿囊液中提取病毒粒RNA ,通过逆转录合成cDNA。cDNA通过PCR进行扩增 ,接着PCR产物用纯化试剂盒进行纯化。而后 ,RNA序列测定是采用双脱氧链末端终止和克隆法。最后用MegAlign( 1.0 3版 )和Editseq( 3.69版 )软件进行种系发生学分析。结果　从中国所分离出的H9N2亚型毒株。它们的HA1与HA2间裂解部位的氨基酸序列均为R S S R ,除一株鸽病毒其HA蛋白分子上仅含 7个潜在的糖基化位点外 ,而其余的均含 8个。 6株H9N2毒株HA蛋白分子上氨基酸序列有 2 - 16个不同 ,这些不同分布在 2 4个不同的位点上。近来在中国同时流行着多种HA基因系的H9N2亚型毒株。结论　人甲型流感病毒H9N2亚型毒株可能性最大来自鸡的H9N2毒株 ,而不是来源于鸽的H9N2毒株。但 ,H9N2毒株是否具有人传人能力 ,至今仍不清楚。在中国同时流行着多种HA基因系的H9N2毒株。; 郭元吉董婕王敏张烨郭俊峰吴昆昱; 关键词：甲型流感病毒 H9N2亚型 HA基因

乙型流行性感冒病毒两大谱系的起源及其演变特征被引量：45: 2001年; 测定 1972～ 2 0 0 0年间在中国分离并保存的乙型流行性感冒 (流感 )病毒一些毒株的HA1区核苷酸序列 ,结合GenBank中其它毒株的相关序列以及流行病学资料进行分析 ,结果提示 ,当前在世界上流行的乙型流感病毒两大谱系起源于 2 0世纪 70年代中期 ,而不是以前推测的 6 0年代末 ,并且其中一个谱系起源于中国。结果还提示 ,乙型流感病毒的演变同时受到很强的正选择与负选择的作用 ,而以前人们认为选择对乙型流感病毒的演变作用甚微。还修正了乙型流感病毒变异速率的计算方法。; 陈继明郭元吉吴昆昱郭俊峰; 关键词：乙型流行性感冒病毒进化流行病学

一种新的甲型流感病毒重配株(H1N2)来源的研究被引量：3: 2000年; 3株H1N2亚型毒株基因分析表明, 它们仅HA基因节段类似于A/广东/6/91(H1N1)病毒, 即PR8类似毒株, 而其他7个基因节段均类似于1995年人群中流行的H3N2毒株, 故可认为新分离出H1N2亚型毒株是由PR8类毒株与1995年人群中流行的H3N2毒株通过基因重配而来. 由于1995与1998年分离到的H1N2毒株间基因组非常相似, 故可认为1998年分离到的H1N2毒株并不是由PR8类毒株与1998年人群中流行的H3N2毒株重配而来, 而是由1995年H1N2毒株演变而来.; 郭元吉祁俊林董婕王敏张烨郭俊峰吴昆昱孔令群程小雯; 关键词：甲型流感病毒

流行性感冒病毒鸡胚高产株的遗传特性分析被引量：2: 2002年; Influenza virus strain A/PR/8/34(H1N1)acquired a high-yielding property after serial passages in fertilized eggsSix internal RNA segments of the high-yielding strain were sequenced from their cloned cDNAs and compared with the corresponding original sequences in the prime A/PR/8/34(H1N1)strainNinety-three point mutations were found accumulated in six genes(PB2,PB1,PA,NP,M,and NS),which lead to 27 amino acid changesA significant low mutation frequency without amino acid change was observed in PA geneThe mutation frequency at the amino acid level was the highest(about 3%)in M2 proteinOur data suggest that the unequal distribution of mutations among different viral proteins may correlate with individual role of each protein in viral; 董婕张立国陈爱君吴昆昱孙梅生张智清; 关键词：流行性感冒病毒基因突变

在MDCK细胞上高产的乙型流行性感冒病毒株的筛选及其全基因组克隆被引量：14: 2004年; 流行性感冒(流感)病毒可引起世界范围的大流行,因此需要及时地生产流感疫苗来预防流感的流行。乙型流感病毒是疫苗的重要组成部分。传统制备疫苗的方法是使用鸡胚生产,存在很多缺陷,应用哺乳动物细胞生产流感疫苗是个更好的选择。但是,乙型流感病毒感染MDCK细胞后,很难得到持续的高产。此实验筛选到的乙型流感病毒在MDCK细胞连续传代15代后,PFU值从第1代的8×104到第15代2×109,TCID50从第1代6 5到第15代的8 0。将筛选到的毒株进行全基因组克隆,用两套引物获得乙型流感病毒的全部8个节段。此结果为利用反向遗传技术将高产毒株与流行毒株重配,进而在哺乳动物细胞上生产基因工程流感疫苗打下基础。; 齐立吴昆昱李梓张烨董婕张立国张智清; 关键词：流行性感冒病毒乙型流感通用引物全基因组克隆

应用反向遗传学技术在哺乳动物细胞中产生甲型流感病毒被引量：31: 2002年; 在国内首次应用反向遗传学技术将多个质粒共转染哺乳动物细胞 ,得到了具有活性的甲型流感病毒。采用自行构建的含有 polⅠ和polⅡ启动子和终止子序列的pIVV2质粒 ,将A/PR/8/34(H1N1)流感病毒基因组全部 8个RNA节段的cDNA分别克隆到该质粒的两个启动子之间 ,得到了 8个可在真核细胞中复制和表达的质粒。将这 8个质粒共转染 2 93T细胞 ,培养 4 8h后吸取上清液 ,转接入MDCK细胞中 ,再经过 72h培养 ,发现在MDCK细胞中有明显的流感样细胞病变产生 ,测上清病毒血凝滴度为 1:10。将MDCK细胞冻融液继续接种鸡胚和MDCK细胞 ,培养后将鸡胚尿囊液和MDCK细胞冻融上清液进行血凝和血凝抑制实验 ,证明所得病毒为A/PR/8/34(H1N1)。; 陈稚峰张立国董婕吴昆昱陈爱珺孙梅生黄银霞齐立张智清郭元吉; 关键词：哺乳动物细胞甲型流感病毒质粒共转染

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