周洪
- 作品数：16 被引量：66H指数：6
- 供职机构：上海第二医科大学基础医学院上海市免疫学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 自异体皮混合移植成活机制中角质形成细胞及细胞因子作用的实验研究被引量：10
- 2004年
- 目的 观察细胞因子及角质形成细胞在自异体皮混合移植成活机制中的作用。 方法建立自异体皮混合移植大鼠模型和人体表皮细胞 淋巴细胞混合培养 (MELC)模型 ,检测大鼠移植术后血清及创面局部组织标本培养上清液中白细胞介素 (IL)1 0的水平 ,观察体外表皮细胞在诱导免疫抑制中的作用。 结果 术后 7d,移植大鼠血清IL 1 0含量为 (2 5 .89± 2 .82 )ng/L,明显高于正常大鼠的 (1 4 .2 0± 2 .4 3)ng/L(P <0.0 5 )。术后 4～ 1 4d,大鼠组织标本培养上清液中IL 1 0含量显著不同(P <0.0 5或 0 .0 1 ) ;术后 2 1、2 8d与正常大鼠比较 ,差异无显著性意义 (P >0.0 5 )。自体表皮细胞、角质形成细胞在MELC体系中的抑制作用与其剂量相关。自体角质形成细胞加入到MELC中 ,辅助性T淋巴细胞 (Th)1分泌的细胞因子谱主要通过IL 1 0介导而抑制Th2细胞因子谱的分泌 ;当加入抗IL 1 0单克隆抗体后该抑制作用消失。 结论 自异体皮混合移植后 ,嵌入自体皮片中的角质形成细胞通过激活Th2使局部IL 1 0水平升高 ,这可能是移植成活的重要原因之一。
- 青春曹颖平史济湘周洪陶箭郑泽铣陆树良廖镇江周光炎
- 关键词：角质形成细胞异体皮IL-10细胞因子表皮细胞辅助性T淋巴细胞
- 绵羊红细胞分离猪的T细胞方法
- 1999年
- 参照人的T细胞分离方法用于猪T细胞分离,经二次绵羊红细胞分离的T细胞,用PHA从功能上鉴定获得纯度很高的T细胞,能进一步用于有关T细胞方面研究。
- 谢晋周洪鲍世民沈佰华周光炎
- 关键词：T细胞绵羊红细胞PHA纯度
- 建立猪MHCⅠ类抗原特异性人T细胞系的探讨被引量：1
- 2002年
- 目的 建立间接识别中国版纳猪SLAⅠ类P1分子的特异性人T细胞系的方法 ,以进一步研究SLAⅠ类分子的间接识别在猪→人异种细胞性排斥中的作用。方法 以E·coli中表达并纯化的SLAⅠ类分子P1为抗原 ,体外反复刺激健康人PBMC ,3H TdR掺入法筛选特异性增殖的T细胞 ,FACS作表型初步分析。结果 初步测定健康人外周血版纳猪SLAⅠ类P1分子特异性T细胞反应频率约 6 .67× 1 0 - 7,所建 4个T细胞系表型均为TCRαβ+ ,其中 3株以CD4+ 为主 ,1株以CD8+ 为主。结论 利用E .coli表达的纯蛋白抗原可建立间接识别版纳猪SLAⅠ类P1分子的特异性人T细胞系。
- 唐军张冬青沈佰华周洪周芸柳子星周光炎
- 关键词：基因表达T细胞系器官移植
- 天花粉蛋白在不同小鼠品系中区分性下调树突状细胞IL-12分泌和CD80表达被引量：5
- 2005年
- 目的 :阐明天花粉蛋白 (Tk)诱导免疫抑制和基因调控的机制。方法 :同时在高易感品系 (HS)和低易感品系(LS)小鼠中 ,应用淋巴细胞体外增殖试验测定Tk对DC细胞递呈抗原和激活T细胞的影响、ELISA方法测定TK对DC细胞分泌IL-12p4 0的影响、流式细胞术测定TK对DC细胞表面MHCⅡ类分子及共刺激分子 (CD80、CD86、CD4 0 )和CD11c表达的影响。结果 :(1)Tk抑制高易感品系C5 7BL 6 (H 2 b)DC细胞的抗原递呈和激活T细胞的能力 ,对低易感品系C3H He(H-2 k)影响甚小 ;(2 )Tk抑制C5 7BL 6DC细胞成熟过程中IL-12p4 0的分泌 ,对C3H He的抑制减弱 ;(3)Tk选择性下调C5 7BL 6DC细胞CD80的表达 ,对C3H He无明显影响 ;(4)DC细胞表面CD4 0、CD86及CD11C分子的表达在两种小鼠品系中均不受Tk的影响。结论 :Tk选择性地在HS小鼠品系中下调DC细胞IL-12和CD80的表达 。
- 王保龙周芸江阳辛利军周洪周光炎
- 关键词：天花粉蛋白DC细胞P40共刺激分子
- 天花粉蛋白通过激活CD8Tc2亚群诱导人体免疫抑制被引量：10
- 2005年
- 为了探讨天花粉蛋白(Tk)诱导免疫抑制的机制,采用抗原非特异性T淋巴母细胞增殖系统,筛选了37个Tk致敏的抑制性T细胞系。分析表明,健康人体内Tk相关抑制性T细胞的频率为5.0×10-7～10.8×10-7,该细胞系属CD8+TCRαβ+,细胞因子表达格局呈现向IL-4和IL-10明显偏移和IFN-γ分泌明显下降的格局。结合我们已有关于CD8+T细胞介导Tk相关应答而不显示细胞毒性的工作,可从表型和功能分析上确认,Tk针对体外人体淋巴细胞增值的免疫抑制,由CD8Tc2细胞介导。
- 周芸周洪王保龙陶箭江阳辛利军张冬青周光炎
- 关键词：天花粉蛋白免疫抑制
- 重组天花粉蛋白片段的表达及其抑制性肽序的定位研究
- 天花粉蛋白(Tk)是一种从葫芦科植物栝楼(Tr-chosanthes kirilowil Max)块根中提取的一种碱性植物蛋白,由247个氨基酸残基组成,等电点9.4,分子量为24kD。这一蛋白由我国学者最早分离,进行过...
- 周洪周芸王宝龙陶箭周光炎
- 文献传递
- 自体角质形成细胞在混合皮肤移植中诱导免疫抑制被引量：4
- 2001年
- 目的探索混合皮肤移植中，自体皮岛诱发移植免疫耐受的免疫机制。方法在体外建立混合表皮淋巴细胞(MELC)培养体系，以反映移植受者对皮肤移植物的免疫排斥反应。同时，将自体表皮细胞引入已建立的混合表皮淋巴细胞培养体系，以模仿混合皮肤移植中的自体皮岛效应,并分析发挥抑制效应的细胞来源。结果自体角质形成细胞可抑制淋巴细胞对同种异体抗原的增殖。结论自体皮岛中的角质形成细胞参与对同种异体抗原的提呈而诱导移植物耐受。
- 周洪沈佰华李宁丽郑泽铣周光炎
- 关键词：混合皮肤移植免疫抑制
- IL-2R缺陷所致X-性联严重联合免疫缺陷病及其基因治疗
- 1998年
- 人体白介素-2受体(IL-2R)γ链是组成中、高亲和力 IL-2R 的重要成员,其基因已被定位于 Xq13区。遗传学连锁分析提示 IL-2R γ链基因与 X-性联严重联合免疫缺陷病(X-SCID)位点存在于同一位置,并发现 X-SCID 患者的 IL-2Rγ链基因存在突变,从而证明 X-SCID 与 IL-2R的γ链缺陷有关。现行的同系骨髓移植疗法缺点在于其导致的移植物抗宿主反应及 B 细胞功能重建不完全。而在患者淋巴细胞中导入正常的γ链基因的疗法为 X-SCID 的治疗展示了美好的前景。
- 周洪周光炎
- 关键词：基因治疗免疫缺陷病
- 天花粉蛋白抑制T细胞增殖的免疫学机制研究被引量：12
- 2005年
- 目的 研究天花粉蛋白 (Tk)诱导免疫抑制的免疫学机制。方法 应用淋巴细胞体外增殖抑制试验 ,分别对丝裂原ConA、可溶性抗原OVA及CD3联合CD2 8McAb三种T细胞增殖系统进行Tk诱导免疫抑制的剂量依赖性试验。建立OVA特异性的T细胞系 (Tova) ,观察Tk对由IL 2 IL 2R信号介导的T细胞增殖的抑制作用。用FACS测定Tk处理过的脾脏单个核细胞 (SMC)的凋亡。分离骨髓诱导产生未成熟的DC(iBDC) ,比较Tk冲击处理前后DC激活T细胞增殖能力的差异。用Tk冲击处理Tova ,观察Tk冲击处理前后T细胞增殖能力的变化。结果 低剂量的Tk(1ng ml～ 5 0 0ng ml)对OVA增殖系统有强烈的抑制作用 ,对ConA增殖系统抑制较弱 ,而对CD3联合CD2 8McAb及IL 2增殖系统的T细胞增殖几乎无抑制作用。在 5 μg ml的浓度以下 ,Tk不诱导SMC凋亡。Tk冲击处理过的iBDC提呈OVA激活特异性T细胞的能力明显下降 ;而Tk冲击处理过的Tova增殖能力没有受到影响。结论 Tk通过影响APC来诱导免疫抑制。
- 王保龙周芸江阳辛利军周洪周光炎
- 关键词：T细胞增殖免疫学机制天花粉蛋白CD28丝裂原
- 中国版纳猪MHCI类P1分子全长的原核表达与纯化被引量：8
- 2002年
- 目的：获得原核表达的中国版纳猪ＳＬＡＩ类Ｐ１蛋白质分子。方法：ＰＣＲ扩增去信号肽的ＳＬＡＩ类Ｐ１ｃＤＮＡ序列，亚克隆至ｐＧＥＭＴ载体，测序。将亚克隆的Ｐ１ ｃＤＮＡ片段插入表达载体ｐＥＴ４２ｂ（＋），构建重组表达质粒ｐＥＴ－４２ｂ（＋）／ｓｌａ－ｐｌ，转化Ｅ·ｃｏｌｉ表达菌 ＢＬ２１－ＣｏｄｏｎＰｌｕｓ（ＤＥ３）－ＲＩＬ，ＩＰＴＧ诱导 Ｐ１－８ ｘ ｈｉｓ融合蛋白表达，经包涵体洗涤，８ ｍｏｌ／Ｌ尿素变性溶解，Ｎｉ２＋亲和层析，梯度透析后，定量保存。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ鉴定目的蛋白的表达与纯化。结果：目的蛋白（分子量３９．５ ｋＤ）表达量占细菌总蛋白 １５％，每升表达菌获得纯度９５％的目的蛋白 ４０ ｍｇ～６０ｍｇ。结论：成功建立猪 ＳＬＡ分子全长原核表达、纯化体系，为建立间接识别猪移植抗原ＳＬＡＩ类分子的人Ｔ细胞系及表位分析打下基础。
- 唐军陈福祥李宁丽王颖沈伯华周洪周光炎
- 关键词：原核表达蛋白纯化
