康燕燕
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
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- Survivin两个结构域中不同磷酸化位点对乳腺癌细胞周期与凋亡调控的影响
- Survivin是哺乳动物细胞中凋亡抑制基因(Inhibitor of Apoptosis Protein, IAP)家族最小的成员,在胎儿组织和各种人类肿瘤中高表达.但在大多数正常成人终末分化组织中无法检测到。Surv...
- 康燕燕
- 关键词：点突变乳腺癌凋亡
- 文献传递
- 酵母Bir1p同源物Survivin对毕赤酵母的分子重组与生长影响
- 2010年
- Bir1p是酵母凋亡途径中抑制细胞凋亡的重要蛋白,Survivin是Bir1p的人源同源物,Survivin第34位氨基酸T向A的突变能使其功能逆转。将Survivin及其突变体Survivin(T34A)的基因分别构建到组成型穿梭表达质粒pGAPZA中,整合入毕赤酵母的基因组,分析对酵母细胞凋亡的影响。酵母生长曲线、MTT及流式细胞仪测定数据显示,Survivin和其突变体基因在酵母中的表达分别抑制和促进了酵母凋亡。多样的工艺对工业用酵母的凋亡提出了不同的要求,本研究为工程酵母的理性改造提供了理论依据。
- 刘琨陈海龙马兴元康燕燕许玉馨
- 关键词：毕赤酵母凋亡
- 重组蛋白TATm-Survivin(T34/117A)对乳腺癌细胞周期变化与凋亡的影响
- 2011年
- 背景与目的:Survivin是一个抗凋亡、促增殖的双功能基因,且高表达于多种恶性肿瘤和转化组织中,使其成为抗肿瘤药物研究的新靶点。本研究观察经点突变的重组蛋白药物TATm-Survivin(T34/117A)处理乳腺癌细胞B-Cap-37后,对乳腺癌细胞B-Cap-37细胞周期和增殖的影响,检测其对癌细胞促凋亡且抑制增殖的药效并初步探讨其分子机制。方法:重叠PCR法在TATm-Survivin(T34A)基因上引入突变位点Thr117→Ala117,MTT法检测细胞增殖;流式细胞术分析细胞凋亡和细胞周期及线粒体膜电位变化;Western blot检测Aurora B激酶底物Histone H3的磷酸化水平和Caspase-3激活情况。结果:TATm-Survivin(T34/117A)蛋白对B-Cap-37细胞的增殖有显著的抑制作用;作用24 h后,细胞被阻滞在G0/G1期,G0/G1期细胞由对照组的(54.1±6.1)%显著增加到(62.7±5.1)%(P<0.05),作用48 h后,细胞被阻滞在G2/M期,G2/M细胞由对照组的(16.6±8.9)%显著增加到(24.0±6.0)%;Aurora B激酶活性通过Histone H3的磷酸化水平间接反映,蛋白药物处理48 h后p-Histone H3的灰度值由对照组的100%降低到89.8%(P<0.05);48 h时,细胞线粒体膜电位由对照组的(649.9±8.0)%显著降低到(582.9±15.6)%(P<0.05);细胞凋亡率由对照组的(4.6±0.7)%显著增加到(42.7±0.5)%(P<0.01),与对照相比,不同浓度的重组蛋白均激活了Caspase-3。结论:重组蛋白TATm-Survivin(T34/117A)对乳腺癌B-Cap-37具有抑制增殖、促凋亡作用,其与降低Aurora B激酶的活性,并激活Caspase-3相关。
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- 关键词：点突变乳腺癌凋亡
