廖振林
- 作品数：6 被引量：9H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Tie2受体研究进展及其在抗肿瘤治疗中的应用被引量：3
- 2004年
- Tie2是胚胎血管发育和肿瘤血管形成都需要的内皮细胞酪氨酸激酶受体,血管生成素(Ang)是其配体。正常成人组织中,Ang/Tie2受体水平较低,用于维持成熟的血管结构;一般癌组织中Ang/Tie2的表达较为活跃。本文综述了Ang/Tie的结构和功能研究的最新进展,Ang/Tie2在血管形成中的重要调节作用,以及可溶性Tie2在治疗肿瘤方面的前景。
- 廖振林侯利华陈薇童贻刚
- 关键词：TIE2受体血管生成素肿瘤
- 人血管生成素-1原核表达载体的构建与表达
- 2003年
- 目的 构建人血管生成素 - 1的原核表达载体 ,并进行表达。方法 利用PCR技术扩出人血管生成素 - 1基因片段 ,并克隆到PQE - 31载体中 ,转化E .coliM 15菌株后进行诱导表达。结果 构建了PQE31Ang - 1原核表达载体 ,在M 15中进行了高效表达。结论 通过原核表达得到人血管生成素 - 1蛋白 ,其具有良好的抗原性 。
- 吕永强廖振林童贻刚
- 关键词：人血管生成素-1原核表达载体PCR细胞因子基因表达原核表达
- 抗人整合素ανβ_3单链抗体的构建和表达被引量：4
- 2004年
- 目的 :利用基因工程抗体技术构建抗人整合素ανβ3 单链抗体(scFv)。方法 :从分泌抗人整合素ανβ3 单抗 (mAb)的杂交瘤细胞E10总RNA中 ,用RT PCR扩增VH 和VL 基因 ,对其核苷酸序列分析后 ,通过PCR在VH 和VL 基因间插入柔性连接子(Gly4Ser) 3,组装成scFv基因 ,并克隆至原核表达载体pTIG TRX中。以重组子转化大肠杆菌BL2 1(DE3 )诱导目的基因表达。结果 :转化菌可表达相对分子质量 (Mr)为 3 10 0 0的scFv。Westernblot证实 ,具有His6标签蛋白的表达。经低剂量的IPTG诱导和较低温度培养 ,scFv获得了可溶性形式表达。表达产物经Ni NTA琼脂糖层析纯化后纯度达 91%以上。ELISA鉴定证实 ,scFv具有良好的抗原结合活性。结论 :成功地构建并表达抗人整合素ανβ3 的scFv ,为进一步临床研究奠定了基础。
- 王臣侯利华张彦明李建民廖振林杜桂鑫陈薇孙启鸿童贻刚
- 关键词：单链抗体
- 人血管生成素-1基因的克隆及表达载体的构建被引量：1
- 2004年
- 【目的】克隆人血管生成素 1基因 ,并构建原核、真核表达载体。【方法】提取人骨髓中的总RNA ,反转录成cDNA ,利用巢式PCR技术扩出人血管生成素 1基因片段 ,并克隆到PQE 31、B7载体中。【结果】克隆了正确的人血管生成素 1基因 ,构建了PQE31Ang 1、B7Ang 1载体。【结论】人血管生成素 - 1基因的克隆及表达载体的构建 ,为进一步研究其功能、活性和应用奠定了基础。
- 吕永强杜桂鑫廖振林罗保君童贻刚
- 关键词：人血管生成素-1巢式PCR原核表达载体真核表达载体
- 半合成抗体库的构建及抗Tie2 Fab抗体的筛选
- 2004年
- 构建一个半合成抗体库 ,不经免疫制备人源抗Tie2Fab抗体。通过RT PCR方法 ,从人脐带血淋巴细胞总RNA扩增轻链基因及重链VH段基因 ,将轻链基因插入pCOMb3载体中 ,得人轻链质粒库 ;从HBsAb的Fd段基因制备含有不同长度随机化CDR3的FR3 CDR3 J CH1片段 ,然后将VH段基因与随机化的CDR3融合 ,得到Fd基因片段 ,再将其插入轻链质粒库中 ,得半合成人Fab质粒库。通过多次建库 ,获得总容量为 2× 1 0 7的半合成抗体库。其Fd段和轻链基因的重组率为 5 0 %。经 3轮淘洗 ,从噬菌体抗体库中筛选到与Tie2抗原特异结合的噬菌体克隆。
- 廖振林侯利华李建民陈薇童贻刚王臣王慧春安小平
- 关键词：噬菌体抗体库TIE2FAB
- 抗人整合素ανβ_3 单抗E10鼠/人嵌合Fab噬菌体抗体的构建和表达被引量：3
- 2004年
- 为构建抗人整合素ανβ3单抗E10鼠/人嵌合Fab噬菌体抗体表达载体,并在噬菌体表面表达,采用PCR方法从整合素ανβ3单抗E10ScFv载体中,扩增重链可变区VH和轻链可变区VL基因。将VH基因与人重链恒定区CH1基因连接,VL基因与人CK基因连接,分别构建了鼠/人嵌合重链FD基因和轻链基因,将其克隆入pComb3,构建了鼠/人嵌合Fab噬菌体抗体表达载体,用辅助噬菌体VCSM13超感染,间接ELISA及竞争抑制ELISA检测鼠/人嵌合Fab噬菌体抗体活性。结果成功构建了鼠/人嵌合Fab噬菌体抗体表达载体,并在噬菌体表面展示了可结合人整合素ανβ3抗原的鼠/人嵌合Fab抗体。
- 王臣侯利华张彦明李建民廖振林杜桂鑫陈薇童贻刚
- 关键词：整合素ΑΝΒ3噬菌体展示肿瘤血管形成细胞粘附分子
